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81.
82.
抗稻瘟病新基因pi-hit-1的克隆与功能研究 总被引:3,自引:0,他引:3
采用差异显示法(DD-PCR)寻找易感稻瘟病的突变品系与野生型对照品系中的差异表达基因。结果发现与野生型对照相比,Rubisco小亚基、pi-hit.1(AF450251)和pi-hit-2(AF448491)基因在易感稻瘟病的突变品系中高表达,pi-hit-1和pi-hit-2是功能未知的新基因。进一步采用电子克隆和RT-PCR方法克隆了pi-hit-1基因的全长eDNA(AF514859),该基因编码的蛋白质属于ATP依赖的Clp蛋白酶家族。分析pi-hit-1基因的组织特异性表达发现,此基因在叶片组织特异表达。进一步设计接种诱导实验研究pi-hit-1基因表达与水稻稻瘟病易感性的关系。在易感稻瘟病的突变品系中pi-hit-1受稻瘟病菌诱导,接种后其表达量明显升高,而野生型对照品系pi-hit-1基因表达在接种前后无明显变化。比较易感稻瘟病的突变品系与对照品系pi-hit-1基因序列差异发现,稻瘟病敏感品系中pi-hit-1基因第一外显子发生缺失突变使pi-hit-1蛋白功能缺失,导致突变品系易感稻瘟病。这些实验结果提示野生型pi-hit-1是稻瘟病抗性基因。 相似文献
83.
梅林青霉Z18纤维素酶降解纤维素的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为增加纤维素的酶解反应速率,通过降解羧甲基纤维素钠、微晶纤维素、纤维素粉Sigmacell type50,研究梅林青霉(Penicillium Melinii Thom)Z18菌株纤维素酶的特性和作用条件.结果表明:纤维素底物浓度影响酶降解效率,纤维素浓度高于5%时,产生明显底物抑制,50~70℃和pH5.5是纤维素酶解最佳温度和酸碱度,酶解时间的延长有利于降解,但反应超过2 h,还原糖增加缓慢,K+和Mn2+能够增加纤维素酶降解羧甲基纤维素钠和纤维素粉Sigmacell type50效率,Fe2+和Cu2+对于所有纤维素酶解表现抑制,较低结晶度的羧甲基纤维素钠降解速率高于较高结晶度的纤维素粉,纤维素酶水解作用条件的优化和纤维素结晶度的降低能够提高纤维素酶的水解反应速率. 相似文献
84.
为了研究全新几丁质酶基因Chit37(DQ647957)的特性与功能,将该基因在大肠杆菌中进行了外源表达.通过构建哈茨木霉(Trichoderma harzianum)菌丝生长期的cDNA文库及对部分表达序列标签序列的测定与生物信息学分析,成功获得了基因Chit37的全长cDNA序列.该基因的编码框长度为1032bp,编码343个氨基酸,理论分子量为36.6kDa.采用PCR扩增的方法克隆该基因并将其构建到原核表达载体pET28(a+)上,构建了原核表达载体pET-Chit37并转化宿主菌BL21(DE3),菌落PCR及酶切鉴定均证实转化子的正确性,重组蛋白经IPTG诱导后获得表达.优化的表达条件为终浓度0.1mM IPTG诱导培养4h. 相似文献
85.
筛选哈茨木霉的cDNA文库,克隆到泛素结合酶基因的cDNA全长序列,并对其进行生物信息学分析,该序列的长度为951 bp,包含一个455 bp的完整开放阅读框,编码157个氨基酸,其理论分子量为17.64ku.在氨基酸水平上,具有较高的保守性.以克隆载体pBK5313为模板,设计含有XhoI和BamH I酶切位点的引物,成功地获得包含完整阅读框的目的基因;将目的基因连接到表达载体pET28上,构建出含有泛素结合酶基因的重组子pET28-UBc,转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,成功地获得了大量的大肠杆菌转化子.通过对大肠杆菌转化子菌落PCR检验、质粒双酶切鉴定及测序分析,证实了成功转化.通过IPTG诱导,优化了泛素结合酶原核表达的条件,最佳诱导时间为4 h,诱导剂浓度对蛋白表达量影响不大.本研究为进一步研究哈茨木霉的生物防治作用机制,诠释蛋白质代谢途径提供基本技术支持. 相似文献
86.
影响球毛壳菌原生质体转化的因素 总被引:2,自引:0,他引:2
采用PEG介导的原生质体转化法研究了含有多菌灵抗性基因的质粒pRBl29转化球毛壳菌的影响因素.结果表明,最佳转化条件为:以1.0mol/L山梨醇作为渗透压稳定剂,20mmol/L Ca^2 和终质量分数为50%的PEG4000作为转化介质,于25℃转化10min,采用缓慢逐步稀释的方法,转化后l.5d筛选转化子,此时,转化率最高,且有较高的重复性,DNA平均转化率为5.6个/μg.该结果对球毛壳菌其他性状的改进及其他丝状真菌的遗传转化具有重要参考价值. 相似文献
87.
For exploring the biological effect of space environment on different genotype of rice seeds, the cytological effects of M1 generation after space flight were studied. Twelve different genotypes of rice seeds which belong to different climate ecotype (early, medium and late) of indica and japonica were onboard "Shenzhou 4" spaceship for 162 h. After recovered the total number of mitosis cells and chromosomal aberration were observed. In all the lines the mitotic index (MIs) of space flight are much higher than control, which indicates the stimulate effect of space environment. The cell rate of chromosomal aberration (CRCA) of space flight is also much higher than control, but varies from line to line. It indicates that biological effect of space environment on rice seed dependents not only on flight duration but also on rice genotype. The radiosensitivities of different lines were also discussed according to CRCAs. 相似文献
88.
利用大豆乳清生产细菌纤维素的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
本研究着眼于利用大豆乳清作为培养基质生产细菌纤维素 ,以达到降低生产成本和环境保护的目的。着重研究了在大豆乳清中添加不同物质对细菌纤维素产量的影响 ,发现蔗糖、蛋白胨、(NH4 ) 2 SO4 、柠檬酸三钠及MgSO4 ·7H2 O对木醋杆菌产生纤维素有促进作用。经L9(34 )正交试验优化 ,大豆乳清培养基成分为 :蔗糖 7 0 % ,蛋白胨 0 5 % ,(NH4 ) 2 SO4 0 5 % ,柠檬酸三钠 0 .1% ,MgSO4 ·7H2 O 0 2 %。实验证明 ,使用大豆乳清代替蒸馏水作为培养液基质 ,细菌纤维素的产量有所提高 ,而生产成本降低 相似文献
89.
地震资料宽带约束反演方法及应用 总被引:9,自引:3,他引:6
宽带约束反演是用井中测得的波阻抗作为初始模型和约束条件,应用随机反演理论,与最优化计算技术相结合蜓人间外推,从而获得了最佳宽带波阻抗剖面。本文展示了实际应用的例子,证明宽带约束反演是一种精度高,稳定性强,收敛快的反演方法,具有广阔的应用前景。 相似文献
90.
一、深入学习和宣传“5.31”讲话,把厅直党员干部的思想统一到讲话上来。要深刻理解和把握贯彻“三个代表”重要思想,关键在坚持与时俱进,核心在保持党的先进性,本质在坚持执政为民,要深刻理解和把握新世纪、新阶段,发展要有新思路,改革要有新突破,发展是党执政兴国的第一任务,紧紧抓住国家和省大力发展水利事业的历史性机遇,不断开创水利改革和发展的新局面。 二、深入学习和宣传“5.31”讲话,进一步推动水利各项事业的全面发展。上半年,我厅组织实施的向扎龙湿地补水工作受到省委省政府好评;全省水利基本建设项目进度很快,并通过检查,质量良好;对省委省政府确定的解决200万农村饮水困难人口工作抓得紧抓得实,成效显著……可以说,时间过半,工作任务也已完成过半。 三、深入学习和宣传“5.31”讲话,不断加强和改进厅直党的作风建设。我们要通过扎扎实实的工作,把中央的治水方针和全省水利的中心工作落实到基层和具体工作中,好的形象是干出来的,努力做贯彻执行“八个坚持”、“八个反对”的表率。 四、深入学习和宣传“5.31”讲话,以先进典型引导党员干部献身水利事业。我们身边的典型申建海、刘辰龙和省水利四处是我们的宝贵财富,要把学习先进典型与进一步塑造新世纪黑龙江水利人形象结合起来,内强素质, 相似文献