金黄色葡萄球菌GapC蛋白与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白的融合表达及其活性

目的在大肠埃希菌中融合表达金黄色葡萄球菌(Staphylococcus.aureus,S.aureus)GapC蛋白与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白,并检测其甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)活性。方法采用PCR技术分别扩增鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白flic基因和S.Aureus GapC基因,通过overlap PCR将这两段基因拼接并克隆至载体pQE30a,构建重组表达质粒pQE30-flic-GapC,将重组表达质粒转化E.coli XL-blue,IPTG诱导表达,表达产物经镍柱亲和层析试剂盒纯化后,进行SDS-PAGE及Western blot分析,并检测其GAPDH活性。结果重组表达质粒pQE30-flic-GapC经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达产物相对分子质量约95 000,最佳诱导表达时间为5 h,主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的31.4%;纯化产物可与小鼠抗S.aureus全菌体多抗血清和抗鼠伤寒沙门菌全菌体多抗血清发生特异性反应,GAPDH活性为(0.337±0.019)。结论成功表达并纯化了具有较高生物学活性的flic-GapC融合蛋白,为S.aureus亚单位疫苗的研究奠定了基础。     

多维电极法处理活性染料废水影响因子正交实验分析

以活性嫩黄K-4G染料模拟废水为处理对象(CODCr=4000mg／L，色度=13000，pH=6.5)采用多维电极法．选择了6个影响脱色率和CODCr降解率的因素，每个因素3个水平进行正交试验。实验结果表明：电解时间、电流密度和电导率对脱色率和CODCr降解率影响最大。最优水平组合为A3B3C3D1E1F3，在此条件下脱色率为81%，CODCr降解率为85％。     

计算机辅助-工程项目成本控制系统的建立方法

本文运用工程项目管理学中的动态成本控制原理和MIS的建立方法,结合我国大多数建筑施工企业的工程成本管理实践,阐述了计算机辅助的建筑工程项目成本控制系统的建立方法。本文的核心思想是动态控制。全文分为成本控制的基本原理;系统分析;系统设计三部分。     

建设项目投资风险综合评估方法初探

本文从工程——管理科学方法的角度出发,在分析我国建设项目投资风险特点的基础上,结合国外投资风险研究的最新成果,融会风险工程的分析思想,随机网络的构模方法和计算机模拟技术,提出了一整套对建设项目投资风险进行定性和定量综合评估的方法     

病毒伺机入侵

我国台湾地区不久前发生的地震致使海底通信光缆中断,造成中国大陆至台湾地区、美国、欧洲等方向的通信线路大量中断,国际、港、澳、台互联网访问质量受到严重影响。由于一部分国外杀毒软件在中国内地没有设置升级服务器,使得国内的个人用户、企业和政府局域网用户无法升级。国家计算机病毒应急处理中心专家分析,由于地震造成影响的时间临近春节假期,正是用户网络访问量增大,各种病毒进行疯狂传播的高峰时期,近1个月时间无法升级杀毒软件的病毒代码库,很可能使这些计算机用户的计算机系统遭受病毒和黑客的攻击而没有保护,如果大量的计算机系统被病毒攻陷,则会变成巨大的病毒感染源和黑客攻击的平台或是源头。     

卫星通信地球站终端技术的发展

本文介绍了卫星通信地球站终端技术的发展过程,初步论述了新技术应用的环境,为今后研制卫星通信设备提供某些参考。     

红宝石激光显微照射在细胞生物学中的应用

利用XJX-2型红宝石激光显微仪对模式组织和大豆胞株,小家鼠及免2-细胞期胚胎等动植物细胞进行了激光显微照射的生物学试验.在利用生物细胞天然发色团或进行活体染色的基础上,对供试的几种动植物细胞产生了有效的选择性损伤.     

激光微束显微切割植物染色体的研究

激光微束是六十年代激光技术问世后在生物学和医学领域中出现的一项新技术。该技术利用激光方向性好、光色单一和亮度高等独一无二的特点,把激光束通过光路系统引入显微镜并聚焦成很小的光点对细胞或细胞器进行精细的细胞或亚细胞水平的显微外科术。染色体是细胞核里一种极重要的结构。每一种真核生物都有一定数目的染色体;每条染色体上都有排列次序一定的基因。任何染色体数目的变化和染色体上基因排列次序的变化,都会引起生物遗传性的变异。激光微束遗传操作真核生物染色体是激光生物学中重要和活跃的研究课题。Berns等以两栖类和哺乳动物细胞为材料进行了激光显微照射染色体及其子细胞遗传分析的大量研究。梁宏等用氩离子激光显微切割长鼻(鼠菐)培养细胞有丝分裂染色体或使受照染色体区域DNA失活都取得了成功。Monajembashi和Cremer建立了用激光微束显微切割人淋巴细胞染色体的技术。本文报道用激光微束切割高等植物染色体的实验结果,其目的是建立起对农作物染色体进行激光遗传操作的有效技术方法。