5 种食用菌多糖理化性质及免疫活性的比较研究

目的：研究平菇、茶树菇、香菇、木耳、金针菇5 种食用菌多糖的理化性质和免疫活性,为食用菌的开发利用提供理论支持。方法：采用水提醇沉法提取多糖;采用分光光度法、高效凝胶渗透色谱法（high performance gelpermeation chromatography,HPGPC）、气相色谱-质谱联用法（gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）、红外光谱法（infrared spectrometry,IR）分析多糖的理化性质;采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA）测定多糖的免疫活性。结果：相同条件下,5 种食用菌多糖提取率依次为平菇多糖（Pleurotusostreatus polysaccharides,POP）3.39%、茶树菇多糖（Agrocybe chaxingu polysaccharides,ACP）2.71%、金针菇多糖（Flammulina velutipes polysaccharides,FVP）2.69%、香菇多糖（Lentinus edodes polysaccharides,LEP）2.32%和木耳多糖（Auriculari aauricular polysaccharides,AAP）2.31%,它们均由分子质量不同、糖苷键为β-构型的多糖组分组成,均含有甘露糖（mannose,Man）、葡萄糖（glucose,Glc）和半乳糖（galactose,Gal）残基,且ACP还含有鼠李糖（rhamnose,Rha）和阿拉伯糖（arabinose,Ara）,AAP还含有少量的木糖（xylose,Xyl）;甲基化分析显示不同多糖具有不同的糖苷键连接方式,POP和LEP以→1,3-β-Glc和→1,6-β-Glc为主要连接方式,ACP以→1,6-β-Glc和→1,6-β-Gal为主要连接方式,而AAP和FVP是以→1,4-β-Glc为主要连接方式;体外免疫活性实验结果表明,5 种多糖在25～400 μg/mL质量浓度范围内无细胞毒性,可不同程度地提高巨噬细胞的吞噬能力和促进巨噬细胞分泌NO、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）的能力,其中以→1,3-β-Glc和→1,6-β-Glc为主要连接方式的LEP活性最强,以→1,3-β-Glc和→1,6-β-Glc为主要连接方式的POP次之,以→1,6-β-Glc和→1,6-β-Gal为主要连接方式的ACP效果一般,以→1,4-β-Glc为主要连接方式的AAP和FVP效果最差。结论：5 种食用菌多糖具有不同的理化性质和对巨噬细胞的免疫调节活性,且活性大小与多糖是否含有→1,3-β-Glc和→1,6-β-Glc连接方式相关。     

蓝莓色素的超声提取工艺及稳定性

在单因素试验基础上,采用中心组合设计方法优化蓝莓色素的超声提取工艺,并分析色素的稳定性。结果表明：蓝莓色素超声提取工艺的最佳条件为乙醇体积分数45%、料液比(g/mL)1:13、超声温度55℃、pH4.5、超声功率450W、超声时间50min。在此条件下,蓝莓色素提取率为274.36U/g。蓝莓色素耐热,在K+、Na+、Mg2+ 等金属离子以及山梨酸钾等食品添加剂条件下稳定性较高,而在Zn2+、Fe2+、Fe3+、Ca2+ 及碱性环境条件下不稳定。     

蚕豆β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其性质研究

本文利用硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-cellulose-50离子交换、SephadexG-100层析、MILLIPORE超滤浓缩法从蚕豆中分离纯化了β-葡萄糖苷酶,并对β-葡萄糖苷酶的酶学性质进行分析研究.     

菠萝皮渣多糖的提取与体外抗氧化活性研究

研究菠萝皮渣多糖的提取工艺参数,并对提取的多糖进行体外抗氧化活性的评价。单因素试验和三因素二次通用旋转组合设计试验表明,菠萝皮渣多糖的最佳提取工艺为料液比1:25(m/V)、提取时间5h、提取温度70℃。提取的多糖具有一定的抗氧化活性,对O2·和ABTS 自由基的清除率表现为显著的量效关系,清除O2·和ABTS 自由基的半抑制率(IC50)分别为1.76mg/ml 和2.49mg/ml。     

大健康背景下“生化分离工程”教学设计与探索

“生物分离工程”是一门理论性、应用性和逻辑性都很强的专业基础课。根据大健康背景下营养与保健品制造业的人才需求及工科院校的学生工学基础较强的特点,对“生化分离工程”的课程教学与实验教学进行了设计与探索,以期在有限的教学学时内使学生掌握“生化分离工程”的理论知识与实验技能,培养学生的创新思维,提高学生的创新能力。     

单核细胞增生李斯特菌复合抑菌剂的研究

单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes,LM）在0～4℃也能生长,为确保冷却肉卫生安全,必须阻止肉中污染的LM的生长繁殖。本实验通过研究不同抑菌剂对3株LM的最小抑菌浓度（MIC）,选取了ε-聚赖氨酸、Nisin、曲酸三种抑菌剂,利用响应面法找出最佳组合。结果表明:ε-聚赖氨酸、Nisin、曲酸对单核细胞增生李斯特菌的最小抑菌浓度分别为50μg/mL、200μg/mL、6.4mg/mL。当ε-聚赖氨酸、Nisin、曲酸的浓度分别为20.5μg/mL、184.6μg/mL、4.37mg/mL时对单核细胞增生李斯特菌的抑制作用最佳。      

稀土铕双功能螯合剂的合成

均相时间荧光免疫分析(HTRF)是一种快速、简便的分析方法,它将荧光共振能量转移与时间分辨荧光相结合,以稳定的穴状稀土螯合剂为荧光标记物进行检测分析。为了满足HTRF的分析要求,以2,6-二甲基吡啶-4-羧酸甲酯为原料,经N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)溴化、水解等化学反应制备得到Eu~(3+)-双功能螯合剂2,6-{N,N',N,N'-[二(2,2’-联吡啶-6,6’-二甲基)]二氨甲基}-吡啶-4-羧酸-Eu~(3+),通过IR、MS等表征方法证明各化合物结构的准确性。对螯合剂荧光性质进行研究。螯合剂的最大激发波长为320nm;最大发射波长为597nm (~5D_0-~7F_2),Stokes位移达到277nm;荧光寿命828μs;荧光量子产率Y_f=0.233。其荧光性质可以满足HTRF的分析要求。     

TRFIA螯合剂中间体2,6-二(3′-溴甲基-1′-吡唑基)-4-溴吡啶的合成、分离与表征

以2,6-二（3-甲基-1-H-吡唑基）-4-溴吡啶为原料,经重氮化、溴化合成了新型时间分辨荧光免疫分析（TR-FIA）双功能螯合剂中间体2,6-二（3＇-溴甲基-1＇-吡唑基）-4-溴吡啶,通过IR、GC-MS1、HNMR和元素分析等对其结构进行了确认,探讨了合成条件及反应机理。同时,通过GC-MS1、HNMR和元素分析等对第一副产物4-溴-2-（3＇-溴甲基-1＇-吡唑基）-6-（3＇-甲基-1＇-吡唑基）吡啶的结构也进行了确认,以其为原料可继续合成目标化合物,大幅提高总产率。