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目的构建HIV-1HXB2株ta(tB41-101N)融合基因原核表达质粒,表达并纯化Ta(tB41-101N)融合蛋白,为进一步研究其免疫原性奠定基础。方法在HIV-1HXB2株天然Tat蛋白N-端添加Tat41-101位氨基酸(aa),采用PCR法从HIV-1HXB2株tat基因中扩增分别编码Tat41-101aa和Tat1-101aa的tat41-101和tat1-101两个基因片段,重叠延伸PCR法扩增其融合基因ta(tB41-101N),并构建其原核表达质粒pET32a-ta(tB41-101N),经双酶切及测序验证后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。融合蛋白经Ni2+-NTA柱亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE、Westernblot及ELISA鉴定。结果重叠延伸PCR扩增出约500bp的ta(tB41-101N)融合基因,酶切及测序结果表明重组表达质粒pET32a-ta(tB41-101N)构建正确。SDS-PAGE分析显示,表达的Ta(tB41-101N)融合蛋白相对分子质量约为36000,约占菌体总蛋白的7%,纯化后纯度约为60%;Westernblot和ELISA分析显示,Ta(tB41-101N)融合蛋白与小鼠抗Tat单抗及抗-HIV阳性血清(抗Tat抗体阳性)均呈特异性阳性反应。结论已成功构建了HIV-1HXB2株ta(tB41-101N)融合基因原核表达质粒,并表达了其融合蛋白,该蛋白较好地保留了天然Tat蛋白的免疫反应性,为Tat新型疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
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家庭网络体现了通信、信息和媒体娱乐产业的融合,围绕家庭网络,向家庭用户提供综合的信息、通信和娱乐服务成为各个运营商、服务提供商、设备提供商关注的焦点。在此大环境下,家庭网络如何组网、如何进行业务实现值得探讨。[编者按] 相似文献
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介绍了采用一套PLC在多台蓄热式均热炉控制系统中的应用实例,分析了PLC在多台炉窑控制系统中实现群控的可行性,运行结果表明,该控制系统具有操作灵活、简便,工作可靠,维护量少等特点。 相似文献
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建筑装饰所指的是敷设与建筑物或者建筑物表面的装饰层,它的主要作用是保护建筑的构件,同时还对建筑工程起到一定的美化作用,使其的使用功能大大增加,并改善建筑物的使用环境。本文的主要目的是针对当前装饰施工中存在的众多问题进行分析,并为之提出相应的具有针对性的强化建筑装饰工程施工质量及管理的措施。 相似文献
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北京市大兴区在清剿火灾隐患战役中,紧紧围绕工作主旨,结合实际,灵活运用舆论战、正面战、突击战、歼灭战、持久战等多种谋略战法,以空前规模的宣传和压倒一切的力度,政府带头、多警联动、高线执法,形成一场“清剿火患”全民参与的“人民战争”。 相似文献