人GINS2基因重组腺病毒表达质粒的构建及鉴定

目的利用AdEasy系统构建携带人GINS2基因的重组腺病毒表达质粒,并进行鉴定。方法以pcDNA3.1-GINS2质粒为模板,PCR扩增GINS2基因,克隆至穿梭质粒pAdTrace-TO4中,构建重组腺病毒穿梭质粒pAdT-GINS2,经双酶切及测序鉴定正确的阳性质粒与骨架质粒pAdEasy-1同时转化感受态大肠杆菌BJ5183,经同源重组获得重组腺病毒质粒pAdE-GINS2,转染HEK293细胞,包装出重组腺病毒Ad-GINS2,大量扩增后,测定病毒滴度,进行PCR鉴定。Western blot法检测重组腺病毒感染的人HL60细胞中GINS2蛋白的表达,MTT法检测重组腺病毒感染对HL60细胞增殖的影响。结果重组腺病毒穿梭质粒pAdT-GINS2经双酶切及测序证明构建正确;经酶切鉴定证明重组腺病毒质粒pAdE-GINS2构建正确;经PCR鉴定证明重组腺病毒Ad-GINS2包装成功,经3轮扩增后病毒滴度可达1.35×1012IU/ml;与空载体感染及未感染的HL60细胞相比,重组腺病毒感染的HL60细胞内GINS2蛋白的表达及细胞增殖水平均明显升高(P<0.05)。结论已成功构建携带人GINS2基因的重组腺病毒表达质粒,感染人HL60细胞后可促进其增殖,为进一步研究该基因在急性髓细胞白血病发生发展中的作用奠定了基础。     

农残乙草胺的毛细管气相色谱分析

乙草胺具有较长的降解周期,对人、动植物有一定的毒害作用,已被美国环境保护局定为B-2类致癌物。实验采用SE-30毛细管柱与FID检测器联用,以二苯胺作为内标物,对花生样品中的乙草胺进行了含量分析,建立了农残乙草胺的毛细管气相色谱分析方法,拓展了气相色谱法在农残检测方面的应用。实验研究了影响测定的各种因素,结果表明:测定方法的精密度较高,标准偏差为0.39,变异系数为8.92%;回收率在95.70%～100.02%之间。该方法中,乙草胺与内标物分离效果和重现性很好,内标物容易得到,适于推广适用。     

国内钢铁分析研究进展

综述了最近20年国内在钢铁分析研究中的进展,包括原子光谱分析、分子光谱分析、离子色谱分析以及电化学分析等方法,并对各种分析方法的特点作了比较。     

坡地住宅设计需注意的几个问题

当今,随着人口数量的不断增加,对丘陵地区来说,仅有的一点平地上,建筑物早已是鳞次栉比了。为了满足人们日趋紧张的住房要求,人们不得不把建筑物搬到山坡、山顶。这样虽缓解了住房用地的紧张,但也带来了新的问题。对坡度较大的地段,为了便于布置道路,简化个体建筑的设计、施工并结合朝向,大多数建筑仍采用平行于等高线的布置方式,使栋与栋之间存在着较大的高差,而不得不在高差处设挡墙。这些挡墙有的与其下面的住宅间距仅为3m或4m,而高度达5m以上,从而给住宅环境带来了如下一些问题:     

典型老城区管网沿河排放状况调查与分析

通过不同季节周中、周末对老城区河道主要入河排污口进行连续24h采样,分析了其水质、水量的变化特征。结果表明:冬季污水量小于春季和夏季,而污染负荷则远高于春、夏两季,冬季COD负荷对河道污染的贡献率30%;冬、春季周末的污染负荷略低于周中,而夏季周末的污染负荷略高于周中。各个污染负荷随时间的变化规律基本类似,于中午11:00—14:00及夜间19:00—22:00会出现相应的负荷高峰。针对调研分析结果,对管网改造及截污措施提出了建议。     

影响稻草降解及其产纤维素酶的几个关键性因素

本文考察了外加碳源、稻草不同部位、稻草预处理等对一株康宁木霉固态发酵稻草产纤维素酶的影响.结果表明,与添加麸皮相比,添加淀粉能使产酶高峰期提前1d.12%的淀粉添加量为最适添加量,而添加不同的淀粉对产酶也有一定的影响,直链淀粉与支链淀粉的配比为2:1时产酶为最大.将稻草分为叶、茎、穗3个组分,考察了各组分对降解及产酶的影响,结果表明,叶组分发酵产酶酶活、失重率、纤维素分解率最高.相对于未预处理的稻草,经水抽提后的稻草其FPA酶活降低了85%,而经乙醇抽提后的稻草其FPA酶活降低了19%.     

复合蛋白酶(Protamex)提取米糠蛋白条件优化

以米糠为原料,利用复合蛋白酶(Protamex)提取蛋白。在提取过程中,以蛋白收率为指标,确定提取时间、提取温度、pH值和酶添加量4个因素对脱脂米糠蛋白收率的影响。经试验确定出复合蛋白酶法提取米糠蛋白的最佳条件为:提取时间3h、温度45℃、pH值6.0、酶添加量为400U/g,水解度为2.33%,经测定所用的米糠原料成分为蛋白质14.83%、脂肪22.94%、纤维素24.55%、水分8.84%。     

新疆传统乳制品中优良乳酸菌的筛选及多菌株发酵剂的研究

从新疆地区采集的46份传统乳制品中分离获得的612株乳酸菌,根据菌株来源、培养条件,形态特征、凝乳状态和产酸特性,选择其中20株乳酸菌进行生理生化鉴定和酸奶发酵试验,结果表明,分离株中3株为链球菌,4株为乳球菌,13株为乳杆菌,平均发酵产酸速率在8.11~12.43oT/h,不同菌株在酸乳冷藏期间表现出不同的后酸化活性,冷藏15d滴定酸度提高了6.3%~55.7%。不同菌株凝乳时黏度在272~1085cp,多数菌株发酵乳在冷藏期间黏度呈上升趋势,球菌的产黏能力普遍低于杆菌。气相色谱分析结果显示不同菌株发酵乳中丁二酮在3.51~68.74mg/L,乙醛在3.51~68.74mg/L,丙酮在0.87~48.35mg/L,乙酸乙酯在0~103.68mg/L,异戊醇都未检出。经过混合菌株发酵生产酸乳比较,发现以S.thermophilusX1、S.thermophilusX5、L.plantarumY5和L.delbrueckii bulgaricussubsp.Y10按1∶1∶1∶1比例组合作为发酵剂,生产的酸乳组织状态较好、风味独特、后酸化弱。     

酶制剂在制革工业中的应用及其前景

酶制剂在制革工业中的应用日益广泛。本文较为系统地介绍了酶制剂在制革浸水、脱脂、脱毛、局部处理、浸灰、复灰、软化以及基于酶制剂的制革前处理。展望了酶制剂在制革工业中进一步应用的广阔前景，指出制革工业发展的趋势是生物制革。     

嗜热链球菌grx02对酒精性肝损伤大鼠保护作用的分子机制

研究了嗜热链球菌grx02对急性酒精性肝损伤大鼠模型的保护作用机制。建立了急性酒精性肝损伤大鼠模型,观察嗜热链球菌grx02对急性酒精性肝损伤大鼠血清转氨酶以及炎症细胞因子的改善作用。结果表明,酒精可诱导大鼠血清谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙二醛(MDA)水平显著升高,;血清、肝匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)细胞因子水平显著升高;乙醇脱氢酶(ADH)、还原性谷胱甘肽(GSH)、增加谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性显著下降,与对照组比较均有显著性差异。结论:grx02可能通过抑制炎性因子,增强抗氧化酶系活性、抑制氧化应激引发的肝损伤,对大鼠急性酒精性肝损伤发挥保护作用。