耦合末端盐桥与定点突变的重组腈水合酶催化动力学

双亚基腈水合酶是催化丙烯腈水合生产丙烯酰胺的重要工业酶。通过Discovery Studio 2.5软件对C-末端盐桥耦合定点突变改造的耐热型基因重组腈水合酶NHase^M-TH-SB^M（S344K-S346K-L347E-N362S-435DT436（+））进行盐桥网络分析,发现其全局盐桥总数有所下降,但双亚基界面间盐桥数量提高到7个。在重组大肠杆菌中表达了原腈水合酶NHase^M-TH（TH）、盐桥突变酶NHase^M-TH-SB（SB）和盐桥耦合定点突变的重组酶NHase^M-TH-SB^M（SB^M）,研究了3种酶的催化反应动力学和失活动力学。结果表明,SB^M的腈水合酶活性为543.9 U·mg^-1,比TH提高了31.0%;其米氏方程催化速率常数K_cat比TH提高了20%。SB^M的表观失活常数K_D在25～42℃范围内均明显低于对照TH,在42℃时为TH的68.0%,显示了良好的热稳定性。SB^M是活性和稳定性同时提高的重组腈水合酶。     

我国包装装潢设计的现状与发展

一、包装设计的概念包装从本质上来说,最主要是用来运送货品保护货物的。当然,在新时代的大环境下,愈发激烈的市场竞争使平面设计赋予了包装更多作用及含义。在现代包装概念中,包装设计是对制成品的容器及其包装的构筑外观进行的设计。目的是为了获得一种具有宜人性的、牢固的、美好的、有一定创造性的人为事物。包装设计是将美术与自然科学相结合,运用到产品的包装保护和美化方面,它不是广义的“美术”,也不是单纯的装潢,而是含科学和艺术、材料、经济、心理、市场等综合要素的多功能的体现。     

蒸汽疏水阀选型原则

根据疏水阀的国家标准和实际使用效果,采用定性、定量相结合的方法,分析蒸汽疏水阀的选型原则,提出选型建议。     

后奥运时代中国武术发展方向

本文以后奥运时代的中国武术发展为研究对象,采用了文献资料法、逻辑分析法、专家访谈法,通过对中国武术的现状、发展,进行研究、分析,提出后奥运时代我国武术必须在符合我国体育发展的总体目标、方针、政策下,走深化竞技武术、发展武术养生、继承武术文化、坚持武术大众化的道路。     

一步酶法生产7-氨基头孢烷酸的研究进展

7-氨基头孢烷酸是合成头孢类抗生素的重要中间体,一般由头孢菌素C通过化学法或生物酶法裂解脱去侧链分子制备得到。综述了头孢菌素C酰化酶的来源、特性及其基因的克隆和改造,表达与纯化,固定化及其催化工艺的研究,并展望了一步酶法生产7-氨基头孢烷酸的应用前景。     

维生素D2生产新工艺

经预处理、萃取、浓缩、结晶等过程从富含麦角固醇的菌丝体中提取麦角固醇,并用自制紫外光源和反应器将其转化为维生素D_2。此新工艺成本低,麦角固醇转化率高,具有良好的经济效益,得到的麦角固醇和维生素D_2分别符合SIGMA公司试剂标准和国家药典标准。     

YH14混凝土养护剂的研究与应用

介绍了混凝土养护剂ＹＨ１４的研制与应用过程,并对养护剂的使用方式及养护进行了讨论。     

青少年遥感知识认知程度的调查与思考

遥感科学的应用领域越来越广,通过调查青少年对遥感知识的认知程度却较低,需要建立遥感科普网站,加强遥感的科普工作。     

反相高效液相色谱法测定紫山药中薯蓣皂苷的含量

建立薯蓣属中紫山药中薯蓣皂苷含量测定方法,考察不同产地紫山药中薯蓣皂苷的含量,并与该属中其他山药进行对比。样品经冷冻干燥后研磨成粉末,然后经70%甲醇回流提取1h,采用HPLC法进行测定。色谱柱:DiamonsilTM（钻石）C18柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相:甲醇-水（84∶16）,流速:1.0mL·min-1,检测波长:206nm,柱温:30℃。结果表明,薯蓣皂苷与其他成分分离良好,线性范围0.65～65μg·mL-1（r=0.9999）,回收率100.6%,不同产地山药中薯蓣皂苷含量差异较大。该方法简便、准确、重现性好,可用于山药及其同属其他植物中薯蓣皂苷的质量控制。      

Rhodococcus rhodochrous tg1-A6腈水解酶催化3-氰基吡啶合成烟酸的研究

利用高产腈水解酶的菌株Rhodococcus rhodochrous tg1-A6催化3-氰基吡啶合成烟酸,实验结果表明,腈水解酶的最适底物浓度为130mmol/L,最适催化温度为55℃,最适pH值为pH7.0.经过15h连续补加底物3-氰基吡啶,反应体系中产物烟酸的浓度可达到165.2g/L.在产物浓度累积不高的情况下,菌体经过7批次(共67h)的催化,烟酸的最终质量浓度累计可达到529g/L.