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目的原核表达并纯化单核李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)溶血素(Listeriolysin O,LLO)蛋白。方法用1对LM LLO基因特异性引物从LM基因组DNA中扩增LLO基因,并构建重组原核表达质粒pET-30a(+)/rLLO,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的rLLO蛋白经镍离子金属螯合柱纯化后,进行SDS-PAGE及质谱分析。结果重组表达质粒pET-30a(+)/rLLO经PCR、双酶切及测序,证明构建正确。表达的rLLO融合蛋白相对分子质量约为78 000,主要以包涵体形式表达。质谱分析显示,两个相对分子质量分别为35 000和45 000的小分子也均为LLO蛋白。结论已成功地在大肠杆菌中表达了rLLO蛋白,并进行了纯化,为进一步研究LLO蛋白的生物学功能及研制基于LLO蛋白的特异性诊断制剂奠定了基础。 相似文献
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以间溴苯酚和3-溴丙酸为原料,合成了间溴苯氧丙酸,并以间溴苯氧丙酸为原料,进一步合成了7-溴苯并二氢吡喃-4-酮。探讨了投料比、反应时间、反应温度、氢氧化钠的质量分数和加料顺序等因素对间溴苯氧丙酸收率的影响。适宜的反应条件为:n(间溴苯酚)∶n(氢氧化钠)∶n(3-溴丙酸)=1∶1∶1.3,反应温度95℃,氢氧化钠的质量分数8%,反应时间7 h,间溴苯氧丙酸收率71.4%。以间溴苯氧丙酸为原料,以85%的收率合成了7-溴苯并二氢唑喃-4-酮。 相似文献
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以欧拉多项流模型为基础,对底角锥度为60°、床直径为0.44 m的喷动床内气固两相流的动力学特性进行了模拟研究,并对不同气速下喷泉高度、颗粒体积分数、颗粒速率的变化进行分析,结果发现喷泉高度与进口气速在u/ums=1.2~1.8范围内具有良好的线性关系,拟合度可达到0.9997。固体颗粒体积分数在轴心区域较高,随着径向距离的增加逐渐下降,且随高度的增加呈现先减小后增大的趋势;颗粒体积分数受速率的影响较大,随着喷动速率的增大,颗粒体积分数趋于减小,但减小幅度不同。颗粒速度在喷泉核心区随床层高度增大而减小。同一床层高度上的颗粒速度随气速的增加而增大,但增大值不同。 相似文献
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采用PC-5(固定相为交联5%苯基-95%甲基聚硅氧烷)毛细柱直接进样分析环境(水和空气)中的甲醇,实现甲醇及共存物干扰物质(甲醛、乙醇、丙酮、丙酮、异丙醇)的分离,利用高浓度(分流比5.0)和低浓度(分离比1.0)两个工作曲线对环境中甲醇进行准确测定。 相似文献
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针对高灰分焦粉大量废弃堆存的状况, 采用不同浸出剂对高灰分焦粉进行脱灰实验, 确定了碱-酸联合浸出的脱灰工艺, 研究了碱-酸联合浸出脱灰过程温度与脱灰率的关系.使用光谱分析、XRF和化学分析方法, 分析了原料焦粉、碱浸焦粉、碱浸后酸浸焦粉灰分中主要杂质元素铁、铝、钙、硅的存在形态和含量, 探讨了提纯过程的反应机理.焦粉经碱-酸联合浸出后, 灰分由28.6%降至3.85%, 脱灰率达到86.5%. 相似文献
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采用热浸镀的方法,在镍基高温合金DZ125样品表面制备Al、AlSi和AlSiY三种不同的铝化物涂层,研究1 000℃时涂层的抗高温氧化性能。利用扫描电子显微镜(SEM)以及能谱仪(EDX)对合金涂层的形貌以及元素成分分布进行观察分析。研究结果表明:在高温环境下,Al元素快速与氧反应生成氧化铝层。由于元素之间的相互扩散,纯Al涂层中的Al元素快速消耗,导致整个涂层的快速失效。AlSi和AlSiY涂层由于Si富集层的形成,有效地阻止了元素的互扩散,提高了涂层的抗氧化性能。AlSiY涂层中Y元素的添加,Si富集层更加均匀致密,并且Y与Si、Cr、Mo电负性差值较大,更易形成稳定化合物,极大提高了涂层使用寿命。AlSiY涂层的抗高温氧化性能更优于纯Al和AlSi涂层。 相似文献