过氧化物酶A4-Prx在毕赤酵母中的优化表达

以来源于不动杆菌Acinetobacter sp.SM04的过氧化物酶A4-Prx的毕赤酵母工程表达菌株GS115/pPIC9K-A4-Prx为研究对象,优化其表达培养条件以提高该菌株对于目的蛋白A4-Prx的表达量。本论文首先研究了培养基成分与诱导条件对表达量的影响,结果表明培养基的pH、甘氨酸浓度和诱导温度对外源蛋白的产量均有显著影响。采用Box-Behnken设计,利用Design Expert软件进行二次回归分析得到了目的蛋白的最优表达条件为:诱导培养基pH 7.0、甘氨酸浓度为0.11%及诱导温度30℃。在此优化条件下重组蛋白的理论表达量达129.87 mg/L,约为未优化下的2倍,实验验证实际表达量达128.94 mg/L,且重组表达的过氧化物酶A4-Prx对酒糟蛋白饲料(DDGS)和食品中的玉米赤霉烯酮毒素(Zearalenone,ZEA)具有高效降解能力。本研究为过氧化物酶的工业化高密度发酵奠定了基础,推动生物降解ZEA研究的进展。     

颗粒度对乳粉品质稳定性的影响

目的通过建立乳粉感官评价体系和理化指标评价体系两个评价方法来反映乳粉的品质稳定性,从而综合评定乳粉颗粒度对乳粉品质稳定性的影响。方法乳粉的感官主要从乳粉的气味、冲调液的滋味和气味方面进行感官评定。乳粉的理化评价体系主要考察乳粉的表面油含量、酸值及过氧化值。结合感官评价体系和理化评价体系的结果,调整乳粉生产工艺,选择最佳的乳粉颗粒度。结果乳粉的颗粒大小、脂肪的存在形态影响乳粉的品质稳定性。结果表明乳粉颗粒越大,其品质稳定性相对越高。结论综合感官及理化指标,颗粒度与乳粉的感官及品质稳定性呈正相关:乳粉的颗粒越大,感官得分越高,理化指标(表面油含量、酸值及过氧化值)越低,乳粉的品质稳定性越好。     

世界甘蔗糖业澄清技术专利信息分析及广西甘蔗制糖发展的创新对策

澄清是制糖生产最重要的工段,糖汁澄清效果的优劣对成品糖的质量影响重大。本研究以制糖业澄清工艺专利申请为切入点,借助国内外大型数据库及多种分析工具,围绕制糖澄清技术领域开展专利信息分析研究,了解该领域的技术动态、研发热点专利布局和发展趋势,并提出了广西甘蔗制糖业澄清工艺创新发展的浅见,希望借此为广西乃至全国甘蔗制糖业澄清工段的工艺创新提供新思考与新视点。     

戊糖片球菌NCU301对豆粕强化发酵工艺优化及营养成分的测定

研究戊糖片球菌NCU301对豆粕(未灭菌)强化发酵的最佳工艺条件,测定豆粕发酵前后营养成分和抗营养因子的变化。以乳酸菌活菌量为指标,通过单因素实验和Box-Behnken响应面分析法优化豆粕强化发酵工艺,确定最佳工艺条件为:发酵时间50.0 h、发酵温度30.0 ℃、料水比1：0.82、接种量8%,优化后活菌量达到1.15×10¹⁰ CFU/g。此外,测定豆粕发酵前后营养成分和抗营养因子变化。结果表明:与未发酵豆粕相比,强化发酵豆粕中粗蛋白、酸溶性蛋白、小肽、游离氨基酸的含量分别提高4.78%、36.04%、52.21%、19.10%,胰蛋白酶抑制剂活性和脲酶活性分别下降89.56%、91.72%;与自然发酵豆粕相比,粗蛋白、游离氨基酸总量分别提高0.6%、35.89%,酸溶性蛋白含量、小肽含量,胰蛋白酶抑制剂活性和脲酶活性分别下降4.64%、3.35%、72.79%、60%。使用戊糖片球菌作为豆粕发酵的菌种不仅可以作为抗生素替代品,还可以提高豆粕的营养价值。     

中链甘油三酯干预对大鼠和小鼠体重影响的Meta分析

肥胖或超重已经成为现代社会严重的流行性健康问题,是导致糖尿病、脂代谢紊乱等多种代谢疾病的危险因素之一,动物实验是临床前实验研究的重要组成部分,是研究疾病、药理作用的重要方法。本研究目的是研究中链甘油三酯(Medium-Chain Triglycerides,MCT)对大鼠和小鼠体重影响。检索了PUBMED,EMBASE和WEB of SCIENCE三个数据库相关文献,比较分析了含中链甘油三酯或椰子油饮食干预与长链甘油三酯饮食对大鼠和小鼠体重的影响,数据以标准化平均差(SMD)或加权平均差(MD)和95%置信区间(CI)表示。结果发现,中链甘油三酯的干预可以减轻大鼠[SMD,-0.76(95% CI:-1.16,-0.37)]或小鼠[MD,-1.39(95% CI:-2.23,-0.54)]的体重。因此,中链甘油三酯的干预对大鼠和小鼠有一定的改善体重的作用。     

响应面法优化微波辅助果胶酶制备壳寡糖的工艺

为优化壳寡糖制备工艺,提高壳寡糖得率,以壳聚糖为原料,采用微波法辅助果胶酶酶解壳聚糖制备壳寡糖,以还原糖含量作为壳寡糖的产率依据,通过单因素实验和响应面实验确定最佳工艺条件为:果胶酶加酶量2100 U/g,微波功率510 W,pH4.4,反应温度50℃,在此工艺条件下获得的降解产物中还原糖浓度为1.964 mg/mL,与单一果胶酶酶解法(1.747 mg/mL)相比提高了12%,与单一微波法(1.671 mg/mL)相比提高了18%。     

防治水果病害的生防酵母及生防制剂研究进展

水果在生长和贮藏过程中极易受到病原菌侵染而腐烂,从而造成巨大的经济损失。目前,田间病害防控及 采后果实贮藏保鲜主要依靠化学制剂。化学制剂因其高效性及便利性在农业领域备受欢迎,但化学制剂的广泛使用 对人体和环境都造成了很大的危害。因此,水果防腐需要寻求更安全、环保并高效的方法,其中生物防治是替代化 学防治的有效措施之一。本文主要探究了生防酵母对于水果采后病害的生防效果及存在问题,并对国内外生防制剂 的研究现状和前景进行了分析讨论,以期能为我国酵母生防制剂的商业化生产与应用提供有价值的参考。     

单宁酸通过抑制TRAF6向细胞质膜的招募抑制Akt信号通路

目的：表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）/蛋白激酶B（protein kinase B, PKB,也称Akt）信号通路在大多数人类实体肿瘤中过度激活、表达失调,促进肿瘤细胞增殖。植物单宁属于植物 多酚类物质,能够抑制肿瘤细胞的增殖。然而,单宁酸通过何种机制调控肿瘤细胞中过度激活的Akt信号通路仍不 清楚。方法：本实验选用人胶质瘤U87细胞作为模型,研究单宁酸抑制人胶质瘤U87细胞EGFR/Akt信号通路的分子 机制。结果：单宁酸抑制人胶质瘤U87细胞Akt的磷酸化以及受Akt信号通路调控的相关蛋白4EBP-1和核糖体S6蛋 白的磷酸化。进一步研究发现,单宁酸抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumor necrosis receptor-associated factor 6,TRAF6）向细胞质膜的招募,导致与TRAF6相互作用的Akt蛋白减少,进而抑制人胶质瘤细胞中Akt的磷酸化 激活。利用EGFR组成型激活突变体EGFR vIII研究单宁酸对TRAF6向细胞质膜招募的影响发现：一方面单宁酸对 EGFR的抑制作用需要EGFR胞外区第2～7外显子区域的存在;另一方面单宁酸对EGFR磷酸化的抑制是导致TRAF6 向细胞质膜招募减少的原因。结论：EGFR是单宁酸发挥其抗肿瘤作用的受体蛋白,单宁酸通过抑制EGFR的磷酸 化改变TRAF6向细胞质膜的招募进而介导了单宁酸对肿瘤细胞中Akt磷酸化的抑制,从而控制蛋白质的翻译,为食 品来源单宁酸的抗肿瘤研究提供理论依据。     

莱茵衣藻IFT25的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备

IFT25是维持纤毛运动和感知所必须元件纤毛内运输蛋白IFT复合物B中的重要组分之一,探索IFT25尤其在模式生物莱茵衣藻中的作用机制具有重要作用。作者采用经济和简单的方法,制备莱茵衣藻IFT25的兔源多克隆抗体。将ift25分别连接到pMAL-c2X-和pET-28a(+)-载体上,转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导大量表达,并经亲和纯化后蛋白质纯度超过90%。通过颈背部皮下多次免疫8周龄大的新西兰大白兔,制备多克隆抗体,取第五次免疫后血清用ELISA测定效价超过128 000。抗血清依次经过Protein A和硝酸纤维素膜纯化后,用Western blotting检测抗体特异性,结果表明制备的抗体可以特异性识别莱茵衣藻中的IFT25,为IFT25作用机制的阐明和纤毛相关疾病的诊断提供了重要理论和方法支持。     

Optimisation of acid extraction of pectin from sweet potato residues by response surface methodology and its antiproliferation effect on cancer cells

The response surface methodology was employed to study the acid extraction of pectin from sweet potato residues. The effects of extraction temperature, extraction time, solution pH and liquid/solid ratio on yield and galacturonic acid content of pectin were investigated. Experimental data were fitted to quadratic polynomial models and analysed using appropriate statistical methods. The determined optimum conditions were extraction temperature 93 °C, extraction time 2.2 h, solution pH 1.7 and liquid/solid ratio (v/w) 30:1. Under these conditions, the experimental extraction yield and galacturonic acid content of pectin were 5.09% and 70.03% (w/w), which were in good agreement with predicted values, 5.08% and 69.40%, respectively. In addition, sweet potato pectin exhibited remarkable antiproliferation effects on human colon cancer cells HT‐29 and human breast cancer cells Bcap‐37 by 46.64% and 42.64% at 1.00 mg mL^?1 separately, indicating that it could potentially be used as a natural supplement in functional foods.