H5N1流感病毒疫苗株(NIBRG-14)在MDCK-G1细胞上的遗传稳定性

目的分析H5N1流感病毒疫苗株(NIBRG-14)在MDCK-G1细胞上的遗传稳定性。方法将H5N1种子毒株在MDCK-G1细胞上传代,收获病毒液作为P2病毒,继续传至P15,每隔5代[即P1(原代)、P5、P10、P15]进行测序。分别以含不同浓度(1、2、4μg/mL)TPCK-trypsin的培养基及不同病毒接种MOI(1、0. 1、0. 01、0. 001、0. 000 1、0. 000 01)在MDCK-G1细胞上培养P1 H5N1病毒,检测血凝滴度,计算CCID50,确定最适MOI及TPCK-trypsin浓度。将P1和P15 H5N1病毒接种鸡胚,收获尿囊液,经Sepharose 4 Fast Flow凝胶柱层析法纯化病毒后,进行电镜观察;采用培养法和指示细胞培养法(DNA染色法)检测支原体。结果 H5N1流感病毒疫苗株(NIBRG-14)在MDCKG1细胞传代过程中血凝滴度增加,从1∶128升至1∶1 024,P1、P5、P10和P15 H5N1种子病毒8条基因序列(PB1、PB2、PA、HA、NP、NA、M、NS)经DNAMAN比对结果一致。H5N1种子病毒株在MDCK-G1细胞传代的最适TPCKtrypsin浓度为4μg/mL,最适MOI为0. 001。两种方法检测P1、P15 H5N1种子病毒株均未被支原体感染。结论H5N1种子病毒株在MDCK细胞中传至P15时,病毒滴度增加但基因序列未发生改变,表明H5N1种子病毒株在MDCK-G1细胞中传代具有一定的遗传稳定性。     

钢结构中弯矩作用下螺栓连接计算方法的探讨

钢结构是一种具有强度高、自重轻、可靠性好等优点的结构,目前,在我国钢结构也得到了广泛的应用。根据作者长期从事钢结构的教学研究及设计实践,本文就弯矩作用下普通螺栓连接的计算问题进行探讨。 普通螺栓连接,螺栓受拉可分为3种情况:见图1 钢结构设计规范GBJ—17—88给出的抗拉普通螺栓连接的计算公式为:N_1≤N_t~b。式中N_1表示最大受拉螺栓的拉力设计值,N_t~b表示一个受拉螺栓的抗拉强度设计值(N_t~b=     

市政排水工程造价影响因素研究

市政排水工程对于城市基础建设有着极其重要的影响,因此必须力争将其建设成为一个完善的管理体系,而工程造价对排水工程也有着深远的影响,本文针对一些实例将两者之间的关系做出了一些总结性的对比,并针对性地研究了一些内容,以此来提高市政排水工程在工程造价方面的管理与控制程度。     

纤维缠绕气瓶用金属内衬与塑料内衬的优缺点比较

自1977年以来,纤维缠绕复合材料制作的气瓶已广泛用于存储压力在150bar以上,有严格重量要求的压缩气体存储中。比如自救呼吸装置及应用大然气的汽车工业中。传统上复合材料气瓶使用金属内村,外面用高强纤维复合材料缠绕制成。人们一直关心的是如何减轻复合材料气瓶的重量并降低成本,因而在开发塑料内村方面作了很多L作。本文中对锅内村和塑料内村的优缺点作为比较介绍一卜,供参考：l铝内衬的优势纤维缠绕复合材料气瓶用的铝内衬代表着一种稳定的技术,这一技术已被证明有20多年了,而且已有300多万气瓶在安全的使用着。①标准的复合材…     

大小转弯装置在胶带输送机中的应用

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锥形口罩耳带焊接工作台控制系统的设计

详细介绍了三菱可编程控制器在锥形口罩耳带焊接工作台中的应用;分析了焊接工作台的工作原理,根据工作原理给出了一个工作周期的控制要求;分析了各个气缸的动作顺序,并进行了控制系统硬件和软件的设计。     

基于指纹特征的考生身份识别系统

在现有考试模式中,考试对象的身份鉴别问题一直是考试组织者、考试管理部门特别关心的问题,也是急于解决的问题。提出的解决方案能有效解决考试中考生身份作弊的现象。