产黄青霉苯乙酰CoA连接酶基因phl的克隆表达及其纯化酶的性质分析

苯乙酸与CoA反应,生成苯乙酰CoA,利用RT-PCR方法成功地从产黄青霉中扩增得到1737 bp不含内含子的phl基因,并将其克隆到pET30a原核表达载体,在大肠杆菌BL21（DE3）中低温诱导表达。经SDS-PAGE检测分析,获得与预期大小（62.1 kDa）一致的蛋白表达特异条带。通过Ni-NTA亲和层析柱纯化了重组酶,经检测苯乙酸的吸收,表明纯化酶对苯乙酸和CoA有明显的催化活性,酶活为1 680 U/mL。研究表明,纯化酶PCL最适宜温度为30℃,有一定的热稳定性,最适宜pH值为8.0,pH值为7.0~8.5时酶比较稳定。     

精密铸造在工程机械制造中的应用

工程机械尤其是装载机的市场需求量很大,但生产厂家多、竞争激烈,而国内各厂家产品的质量、技术档次及价格等均基本相当,因此在保证产品质量的前提下,如何通过改进零部件结构设计及制造工艺来降低成本、提高企业盈利水平及产品的市场竞争力是各企业非常重视的问题.     

基于ANSYS的汽车发动机水泵预应力模态分析

某款汽车水泵在装配发动机后发生异响,针对该款汽车水泵的实际工况建立了水泵预应力模态计算数学模型,运用计算预应力模态技术,对该水泵在承受传动皮带拉力下进行固有频率的模拟分析,并根据分析结果优化水泵设计方案,最终解决了水泵装配发动机后发生异响的问题,为后期解决类似问题提供了思路和方法。