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31.
S. Lick A. Mayr M. Müller A. Anderson H. Hotzel I. Huber 《Journal für Verbraucherschutz und Lebensmittelsicherheit》2007,2(2):161-170
Many PCR-techniques have already been published for the detection of thermophilic Campylobacters. In order to provide a practical overview for the user – without laying claim to completeness – we present a collection of
actual PCR detection methods, some of them were modified and some are still unpublished. They are listed along with their
target genes and specificities. Four conventional and seven real-time PCR methods were tested and compared using a panel of
65 Campylobacter strains belonging to 12 different more or less related species. The regular PCR methodes tested include the 16S rRNA gene
based technique that specifically detects C. jejuni, C. coli and C. lari without differenciating to species level, two flaA gene based typing-methods, one for C. jejuni and C. coli in combination, which was slightly modified according to Nachamkin et al. (1993, 1996), and additionally for C. lari. Another duplex PCR was carried out which allows identification of the two species C. jejuni and C. coli simultaneously. Among the real-time methods tested there were three techniques allowing identification of C. jejuni alone, two assays based on the flagellin A gene capable to identify C. jejuni and C. coli in combination, a duplex PCR performed as triplex PCR combined with an internal amplification control that detected C. jejuni and C. coli separately, and a Lightcycler method that detected C. jejuni, C. coli and C. lari simultaneously. Inclusivity and exclusivity were shown for each of the methods. In most cases inclusivity was good, but some
techniques raised problems concerning exclusivity. Flagellin based real-time PCR techniques partially crossreacted either
with C. lari or C. upsaliensis. C. hyoilei which is very closely related to C. coli reacted in almost all methods applied like C. coli.
Eingegangen: 31. Januar 2007 相似文献
Zusammenfassung: Eine Vielzahl von PCR-Nachweismethoden für Campylobacter jejuni und C. coli wurden bereits publiziert. Hier wird eine Zusammenfassung von aktuellen PCR-Nachweismethoden für thermophile Campylobacter spp. pr?sentiert, die dem Anwender exemplarisch eine schnelle tabellarische übersicht über aktuelle Methoden bietet sowie über deren Zielgene und Spezifit?ten. Es wurden vier konventionelle und sieben Real-Time PCR-Methoden zur Identifizierung von Campylobacter spp. verglichen. Bei den konventionellen Methoden handelt es sich um eine auf dem 16S rRNA-Gen basierende PCR, die spezifisch mit C. jejuni, C. coli und C. lari reagiert, zwei auf dem Flagellin-Gen beruhende PCR-Typisierungsmethoden, die in modifizierter Form für C. jejuni, C. coli und zus?tzlich für C. lari durchgeführt wurden. Als vierte Methode wurde eine Duplex-PCR zur Identifzierung von C. jejuni und C. coli mit einbezogen. Unter den getesteten Real-Time PCR-Methoden befanden sich drei 5′-Nuklease Assays, die spezifisch C. jejuni detektieren, zwei Assays, die auf dem Flagellin-Gen beruhen und C. jejuni und C. coli gemeinsam erfassen, eine Duplex-PCR, die C. jejuni (mapA-Gen) und C. coli (ceu-EGen) identifizieren kann und noch mit einer unver?ffentlichten internen Kontrolle kombiniert wurde, sowie eine Lightcycler-Methode, die auf dem 16S rRNA-Gen basiert und C. jejuni, C. coli und C. lari gemeinsam detektiert, aber nicht differenziert. Die Methoden sind entweder unver?ndert aus Publikationen übernommen oder auch nach Datenbankanalysen modifziert worden. Zum Testen wurden 65 Campylobacter-St?mme aus 12 verschiedenen Spezies eingesetzt. Die Inklusivit?t war insgesamt bei allen Methoden sehr gut, bei der Exklusivit?t gab es Unsicherheiten. Real-Time PCR-Methoden, die auf dem Flagellin-Gen beruhen, k?nnen in manchen F?llen die verwandten Arten C. lari oder C. upsaliensis mit erfassen. Der enge Verwandte C. hyoilei wird in fast allen F?llen gleichzeitig mit C. coli detektiert.
Eingegangen: 31. Januar 2007 相似文献
32.
HB Lick 《Canadian Metallurgical Quarterly》1998,59(11):753-757
How do we move from diatribe to dialogue? Since the Donald E. Cummings Award was first established in 1943, the profession of industrial hygiene has seen many changes. The traditional hazards Alice Hamilton addressed in her 1948 Cummings lecture have been controlled. However, the advent of the Occupational Safety and Health Administration (OSHA) has changed the approach of many of today's industrial hygienists from "best professional practices" to regulatory compliance or OSHA industrial hygiene. Further, the dialogue that has existed between academia, business, government, and labor that allows industrial hygienists to identify and resolve health hazards is now threatened by lawsuits and lobbyists. Industrial hygienists have a professional responsibility to workers, employers, clients, and the public. Our vision for the future must refocus on this responsibility as we once again embrace dialogue instead of diatribe. This lecture was presented at the American Industrial Hygiene Conference and Exposition in Atlanta, Ga., on May 13, 1998. 相似文献
33.
In order to understand the transport and fate of hydrophobic organic chemicals (HOCs) in consolidated sediments and saturated soils, long-term (up to 512 d), one-dimensional, time-dependent diffusion experiments were done with a representative HOC, hexachlorobenzene (HCB), in three different sediments and soils. In addition, long-term HCB partitioning experiments in suspended sediments at high concentrations and tritiated water diffusion experiments in consolidated sediments were done in order to more accurately interpret the HCB diffusion experiments. Numerical models were used to analyze the results. Good agreement between the experimental data and calculated results was obtained. Despite the length of the experiments, the experimental results demonstrate that the HCB in the consolidated sediments was far from a steady-state chemical equilibrium. Experiments and theoretical results also indicate that the assumption of local chemical equilibrium was not valid, and sorption rates must therefore be considered for a valid analysis of transport. 相似文献