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目的 建立盐干海参的核酸提取及其分子鉴定方法。方法 选取5种盐干海参, 采用直接处理、洗涤处理和浸泡处理3种处理方式, 比较磁珠法和离心柱法两种核酸抽提方式的提取质量, 并采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)法对提取的核酸进行分析确认。结果 同一种抽提方式不同海参处理组间核酸质量没有显著差异, 而两种抽提方式间核酸质量差异显著, 其中磁珠法提取的核酸得率高、纯度高, 而离心柱法提取的核酸得率及纯度均偏低。经PCR扩增验证, 磁珠法提取的核酸效果较佳。将扩增产物进行测序及系统进化分析发现5种海参实际种类与标注名称仿刺参存在较大差异。结论 盐干海参处理方式对核酸提取结果影响不大, 磁珠法提取核酸效果较好,单纯依靠COI和16S rRNA基因通用引物并不能对所有的海参种类进行鉴定。 相似文献
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黑加仑、WunBo、无花果、桑椹和啤酒花苦味酸及制品抗氧化作用研究 总被引:4,自引:0,他引:4
利用单扫描示波极谱法研究了黑加仑、WunBo、无花果、桑椹及各种啤酒花有效成分对活性氧自由基(O2^.-)的清除作用。超氧阴离子自由基通过邻苯三酚自氧化体系产生。啤酒花中主要的有效成分α-酸、β-酸、浸膏和苦水对超氧阴离子自由基有一定的清除作用,其中苦水最强,α-酸和浸膏略差,β-酸因难溶于测试溶液而未得到结果;黑加仑、WunBo、无花果和桑椹也可以消除超氧阴离子自由基,其中清除能力的大小顺序为:黑加仑>WunBo>桑椹>无花果。分别计算了各样品对自由基清除作用的IC25。 相似文献
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为建立高效的西马特罗(Cimaterol, CIM)检测方法,试验用以重氮化法合成的西马特罗完全抗原免疫新西兰大白兔,提取兔脾细胞总RNA,反转录合成cDNA第一链,设计兼并引物,扩增兔源抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),通过45 bp的连接肽(Linker)连接成VH-Linker-VL并大量扩增;利用噬菌体表面展示技术将单链抗体(ScFv)片段与噬菌体展示载体pCANTAB-5e连接,电转化至大肠杆菌TG1感受态细胞,得到兔源噬菌体ScFv抗体库。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)判断是否偶联成功,用紫外扫描(UV)及基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定人工抗原的偶联比。将富集的抗体库侵染对数期大肠杆菌进行抗体库滴度测定合成抗体库的质量进行鉴定,对抗体库进行三轮淘选,取最优的CIM-ScFv进行氨基酸序列分析。结果表明:CIM-BSA及CIM-OVA偶联比分别为8:1及10:1,CIM-BSA免疫原免疫新西兰大白兔,间接ELISA测得免疫血清校价为1:32000,免疫血清半数抑制浓度为9.77 ng/mL, 曲线的拟合度为0.997。抗西马特罗兔源噬菌体ScFv免疫库的插入率为92%,库容为1×1010 pfu,多样性为83.3%,经过4轮淘选,获得一株与CIM有结合活性的噬菌体ScFv菌。以上结果表明西马特罗完全抗原的合成效果良好,可用于建立西马特罗检测方法,兔源噬菌体抗体库为快速获得CIM单链抗体奠定基础,为西马特罗快速检测提供新思路。 相似文献
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980.
烷基糖苷是近年来发展起来的一类新型非离子表面活性剂,性能优良,应用领域广泛,越来越受到表面活性剂行业及油田化学行业的重视。本文对烷基糖苷的合成及在钻井行业中的应用研究进展进行了综述,为后续烷基糖苷的合成及应用研究提供一定的指导。 相似文献