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卤代醇脱卤酶可以催化合成具有光学纯的环氧化物及β-取代醇等高价值手性药物中间体。作者所在实验室利用宏基因组技术从无锡新区工业集中地污染土壤中筛选了一段编码基因Y,经测序知其片段包含有765 bp的核苷酸,编码254个氨基酸。经Blast软件分析,其氨基酸序列与来自根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的卤代醇脱卤酶Hhe C同源性为81%,且含有卤代醇脱卤酶类的保守催化三联体Ser132-Thr145-Arg149。推测其属于卤代醇脱卤酶Hhe C类,命名为Sy Hhe C。根据大肠杆菌Escherichia coli BL21的密码子偏爱性,对基因Y进行密码子优化和人工合成,命名为Syhhe C,构建重组表达质粒p ET28a-Syhhe C,转化感受态E.coli BL21,表达产物经镍柱亲和层析后获得电泳纯的重组卤代醇脱卤酶re Sy Hhe C。SDS-PAGE分析,re Sy Hhe C的相对分子质量为34 000。以2-溴-1-(4-硝基苯基)-乙醇为底物,re Sy Hhe C催化底物产生2-(4-硝基苯基)环氧乙烷的比活性为5.2 U/mg。 相似文献
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面对日益增多的突发事件,本文设计一套稳定的应急救助指挥系统,以减少事件带来的损失是势在必行之举.首先,对相关概念进行解析,以便于快速了解研究内容;其次,阐述了系统的设计需求和方案;再次,对应急救助中心接处警系统进行设计;最后,通过对系统的验证,达到了系统功能的实现. 相似文献
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正截至缅甸时间2018年7月17日,中缅原油管道自2017年5月19日原油抵达国门至今,累计接卸油轮47艘,卸载原油1 098×104 t,向中国输送原油超过1 000×104 t。中缅原油管道一期设计输量1 300×104 t/a。管道的全面贯通成功开辟了我国印度洋能源进口通道,源自国际市场的优质原 相似文献
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<正>2019年5月14日,国家能源局官网发布关于印发《能源标准化管理办法》及实施细则的通知。通知表示,为进一步规范能源领域标准化管理工作,根据《中华人民共和国标准化法》及相关法规,结合能源领域实际情况,国家能源局修订形成了《能源标准化管理办法》《能源行业标准管理实施细则》和《能源行业标准化技术委员会管理实施细则》。《能源标准化管理办法》所定义的能源标准化包括石油、天然气、页岩气、煤炭、煤层气/煤矿瓦斯等十大范围,在明确能源标准化工作任务和职责的同时指出,没有国家标准而又需要在能源行业内统一的技术和管理要求,可制定能源行业标准;鼓励能源 相似文献
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2013年2月,国家发改委核准了粤东液化天然气项目一期工程项目建设。这个项目建设规模为每年400×10^4t,总投资为150亿元。一期工程2015年建成,2016年达产。 相似文献
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作为中国石油唯一的稠油开采先导试验基地,辽河油田稠油开采先导试验基地立足辽河,面向全国,针对我国稠油油藏埋藏深、地质条件复杂和原油黏度高等难题展开攻关。2009年初步建成后,这个基地逐渐成为技术研究与工业化生产一体化、面向集团公司的开放式稠油开采新技术示范基地,为集团公司提供先进、成熟和配套的开采技术,并形成一系列管理规范和技术标准。 相似文献
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目的克隆、表达宇佐美曲霉(Aspergillus usami)羧肽酶成熟肽基因,并检测其酶学性质。方法根据前期克隆的宇佐美曲霉羧肽酶基因序列设计引物,克隆羧肽酶成熟肽基因AucpA,构建重组表达质粒pPIC9k-AucpA,电击转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导重组蛋白表达。表达的重组蛋白经Sephadex-50层析纯化后,进行酶活性及其影响因素的检测。结果重组表达质粒pPIC9K-AucpA经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约81 000,纯化的重组羧肽酶最高比酶活为57.15 nkat/mg,最适反应温度为45℃,最适反应pH为3.5,金属离子、EDTA对重组羧肽酶的酶活性无影响,而PMSF对重组羧肽酶酶活性的抑制率达50%以上。结论已成功在毕赤酵母中表达了具有较高酶活的宇佐美曲霉羧肽酶,为进一步研究该重组酶的应用奠定了基础。 相似文献
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本文以南华工商学院为例对高职人才的需求情况进行调查分析,并对高职院校在双转移形势下的人才培养进行了初步思考. 相似文献
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