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目的在毕赤酵母GS115中表达抗菌肽Cecropin D,并检测其抗菌活性。方法根据毕赤酵母密码子的偏爱性,人工合成6条寡聚核苷酸片段,经磷酸化、退火、连接并克隆入酵母表达载体pPIC9K。重组表达质粒pPIC9K-D转化至毕赤酵母菌GS115,经G418筛选,阳性高拷贝克隆用0.5%的甲醇诱导表达,表达产物经CM-Sepharose层析柱纯化,Tricine-SDS-PAGE分析,琼脂糖扩散法和比浊法测定其抗菌活性。结果经Tricine-SDS-PAGE检测,在相对分子质量3900左右处可见目的蛋白表达条带,纯化后的目的蛋白纯度达90%以上,获得的抗菌肽Cecropin D对一些革兰阳性菌和革兰阴性菌均有抑菌活性。结论抗菌肽Cecropin D成功地在毕赤酵母中分泌表达,为以后深入研究抗菌肽奠定了基础。 相似文献
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目的探讨在悬浮Vero细胞中快速扩增轮状病毒(RV)的方法。方法 Vero细胞经消化后,直接接种KMG1b7株RV。采用微量滴定法、PAGE和RT-PCR等方法比较悬浮扩增、静置培养及微载体发酵培养RV的感染性滴度、基因组核酸带型和型特异VP7基因序列;采用电镜观察和Westernblot鉴定悬浮扩增RV的形态及结构蛋白的抗原性。结果悬浮细胞扩增的RV接种24h后病毒感染性滴度达峰值,为6.00lgCCID50/ml;而静置培养和微载体发酵培养分别在接种后(96±24)h和(48±6)h达峰值,分别为(6.00±0.25)lgCCID50/ml和(6.50±0.25)lgCCID50/ml。悬浮扩增的RV基因组呈典型的4-2-3-2G1血清型带型,G1型特异基因VP7序列未发生突变。悬浮扩增的RV形态和结构蛋白的抗原性未发生改变。结论在悬浮Vero细胞中扩增RV可以缩短病毒制备周期,提高病毒收获量,有利于RV疫苗的研制或生产。 相似文献
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分析氢化丁腈橡胶、丙烯酸酯橡胶、硅橡胶及氟橡胶等特种橡胶的性能及特点,讨论汽车行业和其他行业所用胶管对橡胶材料性能的要求,为特种橡胶在胶管中的应用提供参考依据。 相似文献
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在日常生产中,我们应该充分发挥"!""?""……"三个符号的意义,把身边的安全工作做精、做细、做实。"!",用事故案例惊醒教育人!事故并非都是孤立的、唯一的个例。因此,职工要根据自己的行业特征、工作环境、操作技术,收集相关事故案例,进行深刻剖析,找出事故原因,并查找身边存在的类似的安全隐患,提早预防。"?",做事前先问问自己是否处于安全状态。工作前问问自己:劳保用品穿戴整齐了吗?安全操作规程都记牢了吗?班中也要问自己:对人、机、物、环境等安全因素都 相似文献
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研究实时环境下运动车辆的检测算法,针对存在渐变及重复性运动的车辆运动背景采用改进的高斯背景建模法,对背景进行更新,将所得的当前背景与前一帧视频图像进行相减,得到当前时刻车辆的运动图像。将所得图像进行数学形态学去噪处理得到较为理想的车辆检测效果图,并根据处理后的图像判断车辆是否运动以及其运动轨迹。实验证明该方法能去除噪声对图像产生的影响,对判断某一时刻车辆是否运动行之有效。 相似文献
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