化学-酶法制备^15N-L-酪氨酸的研究

通过化学-酶法途径制备了稳定性同位素标记的^15N-L-酪氨酸。以大肠杆菌所含的天冬氨酸转氨酶催化自制的对羟基苯丙酮酸和^15N-L-天冬氨酸,转化成^15N-L-酪氨酸。主要对酶转化的条件进行了研究,酶反应液经分离纯化后,得到的^15N-L-酪氨酸产品的丰度达98．62％,比原料下降了0．44％,^15N的利用率达40．78％。     

同位素稀释质谱法测定土壤中氨基酸的含量

建立了同位素稀释质谱法测定土壤中缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸共4种氨基酸含量的检测方法。通过在样品中加入同位素内标试剂——稳定同位素~(15)N标记的氨基酸,经酸解、固相萃取等前处理手段对目标氨基酸进行提取、富集以及衍生化后,利用GC-MS/MS多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果表明,在线性范围内,4种氨基酸的线性相关系数(R~2)均大于0.999,加标回收率为92.2%～108%,方法检出限(LOD)为1.4～2.9μg/kg,定量限(LOQ)为5.2～8.8μg/kg。方法高效、重现性好,可用于土壤中氨基酸的定量检测。     

2-甲氧基-3-异丁基吡嗪-(甲氧基-~(13)C)的合成研究

近年来,稳定同位素示踪技术在代谢组学的研究中起到了重要作用。以亮氨酰胺盐酸盐为原料,与乙二醛发生环化反应得到中间体2-羟基-3-异丁基吡嗪,再通过氯化反应制备2-氯-3-异丁基吡嗪,在碱性条件下和同位素标记甲醇-~(13)C发生缩合反应得到目标化合物。合成路线避免中间体由烯醇式变为酮式,避免得到目标产物的同分异构体,且操作简单,工艺流程短,副产物少,收率可达70%以上,~(13)C同位素丰度稀释低。产物经HPLC、MS、~1HNMR和~(13)CNMR表征,结果表明:化学纯度99%,同位素丰度98.8 atom%~(13)C。     

丙酮与重水氢-氘交换反应催化剂的考察研究

为丙酮与重水氢-氘交换的基础研究,考察了丙酮与重水在不同催化剂存在下的一次交换效果,并利用单因素实验,考察了n(重水)∶n(丙酮)=12.5∶1的固定条件下,催化剂的用量、反应温度和反应时间对丙酮氢-氘交换(H-D交换)反应的影响。结果表明,产物氘代丙酮的氘同位素丰度随着以上变量先增加后平衡,平衡条件为碳酸钠添加量0.015 9mol/mol、反应温度45℃、平衡时间3 h,交换后丙酮的氘原子同位素丰度达到80.53 atom%D。     

同位素稀释-气相色谱-三重四级杆串联质谱法测定白酒中的塑化剂含量

以上海化工研究院研制的氘代邻苯二甲酸二甲酯(DMP-D6)和氘代邻苯二甲酸二乙酯(DEP-D10)为内标,利用三重四级杆气相色谱质谱联用仪(GC-MS/MS),建立了白酒中邻苯二甲酸二甲酯(DMP)和邻苯二甲酸二乙酯(DEP)的检测方法。其中,DMP和DEP的检测限分别为0.25和0.1 ng/m L,定量限为0.75和0.375 ng/m L,平均回收率为96.5%和80.0%,精密度均小于5.4%,可满足白酒中DMP、DEP塑化剂的检测需求。     

~(13)C、~(15)N双标记氨基脲的同位素丰度测定

采用微量高温灼烧法制备样品气,运用同位素质谱测定稳定性同位素13 C、15 N双标记氨基脲(13C、15 N3-SEM)产品的13C、15 N同位素丰度。通过实验对影响测定结果准确度的相关因素进行了考察,确定了最佳质谱转化条件为:称取1mg 13C、15 N3-SEM.HCl样品,10mg微粒状氧化铜,放入玻璃样品管,于真空状态下熔封样品管。将样品管放入马弗炉,530℃反应4h。实验表明:测定结果具有良好的精密度、重复性及再现性,满足了稳定性同位素13 C、15 N双标记氨基脲产品的同位素丰度测定的要求。     

稳定性同位素15N质谱分析用校准样品的研制

根据稳定同位素15N质谱分析的特点和仪器校正的需求,以高纯度天然丰度的硫酸铵和高纯度的浓缩硫酸铵-15N2为原料物质,精确配制标准样品。对标准样品研制过程中影响不确定度的主要因素进行了分析,得到标准样品的不确定度为0.01~4.00×10-4。     

叔胺萃取分离钴(Ⅱ)、铁(Ⅱ)

研究了不必预先氧化二价铁,直接用叔胺从氯化物溶液中萃取分离钴(Ⅱ)、铁(Ⅱ)的新方法.考察了不同改性剂对叔胺萃取钴(Ⅱ)、铁(Ⅱ)的影响以及各种因素对钴(Ⅱ)、铁(Ⅱ)萃取、洗涤及反萃的影响.提出了用叔胺萃取分离钴(Ⅱ)、铁(Ⅱ)的最佳工艺参数.     

气相色谱-质谱法研究13C标记脂肪酸的同位素丰度和化学纯度

稳定同位素¹³C标记的脂肪酸呼气试验被广泛地应用于医学临床研究。本实验利用脂肪酸在EI质谱中共有的麦氏重排碎片离子,建立了通用的稳定同位素¹³C标记（羧基位或α位）短链及中链脂肪酸同位素丰度的气相色谱-质谱（GC/MS）检测方法,并考察了稳定同位素样品的“同位素记忆效应”和样品配制浓度对检测结果的影响。以上海化工研究院研制的乙酸-1-¹³C和辛酸-1-¹³C为样品,测得两者的同位素丰度分别为98.5%和98.7%,精密度优于0.06%;实验还发现,EI源和ESI源对中链脂肪酸辛酸-1-¹³C同位素丰度的测定结果一致,且具有良好的精密度。该方法可以实现对¹³C脂肪酸同位素丰度和化学纯度的同时测定。