N+离子注入技术在中性蛋白酶高产

为获得中性蛋白酶高产菌株,选用低能（30keV）N⁺离子束以不同剂量注入中性蛋白酶,产生菌枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）AS1.398,研究其诱变效应,菌株存活率曲线为典型的“马鞍型”剂量 效应曲线,且在马鞍形区域内具有较高的正突变率。经多次筛选,获得一株稳定高产突变株ZC-12,突变株产中性蛋白酶活力为初始菌株的1.84倍。通过对PCR扩增诱变前后两菌株编码中性蛋白酶基因的DNA序列的测序和比对,在所报道的该酶催化区域内,有3个氨基酸位点发生突变,表明N⁺离子束注入细胞的辐射诱变方法具有独特的诱变效果,可用于菌种选育。     

LYCD制备及保湿抗衰老功效评价

本文研究了生产LYCD的最佳条件,并对LYCD乳液的保湿、抗衰老功效进行了人体测试,通过水合度、皮肤弹性、透皮失水率（TEWL）及皮肤更新速率的研究,结果表明：LYCD是一种安全有效的新型保湿抗衰老化妆品。     

白腐菌木素过氧化物酶发酵条件及其酶液对稻草降解的研究

研究营养条件对白腐菌合成木素过氧化物酶(ligninperoxidase,LiP)的影响。在最适培养条件下,第6天获得7560U/L的酶活。利用LiP粗酶液在体外直接降解稻草,3天后Klason木素的降解率为8.7%,经红外光谱分析其降解产物,推断LiP粗酶液在体外降解稻草的反应主要是氧化反应。     

双酶酶法制备大豆肽及其性质研究

为探讨脱脂豆粕在双酶作用下的水解效果及其酶解物的性质,选用碱I生蛋白酶和风味蛋白酶为水解酶,采用单因素实验确定双酶水解豆粕的最佳条件,并对脱脂豆粕酶解物的性质进行了初步研究。结果表明碱性蛋白酶和风味蛋白酶水解豆粕的最佳条件为：底物质量分数5％,先加入嘲陛蛋白酶用量为10000U／g底物,在55℃、pH8．0下酶解0．5h,调节pH至7．5,再加入风味蛋白酶5％,双酶同时酶解3h。脱脂豆粕蛋白酶解物的溶解度和吸水性比大豆分离蛋白有很大提高,粘度明显降低水解物中肽的分子量主要集中在500～1200之间。     

蚕蛹油提取和精制工艺研究

应用环己烷-石油醚混合溶剂提取蚕蛹毛油，通过单因素及正交试验确定了皂化法精制蚕蛹油的最佳工艺，并对精制的蚕蛹油进行了成分分析。结果表明：在80℃、固液比为1：3条件下蒸馏3h，毛油提取率为36.4％；在碱浓度14％、超碱量74．4％条件下精制毛油，其精制率为68％。蚕蛹油不饱和脂肪酸中亚油酸、油酸、α-亚麻酸、γ-亚麻酸的含量分别为6．36％、27．52％、32．77％及0．21％。     

红茶菌枣饮料的研制及副产物的利用

以红枣为原料,采用红茶菌(酵母菌Saccharomycess.p、胶醋酸杆菌Acetobacterxylinum、植物乳酸杆菌Lactobacillusplantarum组成的混合菌液)对其发酵,研制红茶菌枣饮料,利用其副产物含菌枣渣开发枣纤维片。结果表明,发酵培养基的枣水最佳配比为1∶4(W/W),总接种量为5%(酵母菌1%、醋酸杆菌1%、乳酸杆菌3%),发酵温度(30±2)℃,发酵时间50～60h,经过分离、灭菌可得到酸甜可口的红茶菌枣饮料;含菌枣渣经过混合造粒、烘干,压制成枣纤维片。     

地衣芽孢杆菌耐高温α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及其产物的分泌

以耐高温α 淀粉酶生产菌地衣芽孢杆菌染色体DNA为模板 ,通过PCR扩增耐高温α 淀粉酶基因 ,将扩增产物 1 9kb的DNA片段插入到pUC1 9质粒中 ,再转化大肠杆菌JM1 0 9,通过在淀粉平板上形成透明圈等方法筛选到一株阳性克隆菌株JM1 0 9(pUAM) ,其表达产物可分泌到培养基中 ,除去菌体的发酵液中每 1 0 0mL酶活可达到 2 7个单位。将发酵上清液浓缩后用冷无水乙醇分级沉淀 ,所得样品进行SDS PAGE分析 ,得到分子质量为 60ku的目的蛋白带。     

磷脂酰丝氨酸合成酶发酵及反应条件的研究

研究重组磷脂酰丝氨酸合成酶表达条件及其用于酶法合成磷脂酰丝氨酸的反应条件。结果表明,在50 mL培养基中,菌体浓度为OD600=0.6时,用0.5 mmol/L的IPTG,在温度为20℃,转速为120 r/min的条件下,诱导12 h后,重组磷脂酰丝氨酸合成酶活力可达1.33 U/mL,是优化前的1.66倍。酶法转化磷脂酰丝氨酸的最适温度为38℃,最适pH为8.0,最适离子是12 mmol/L Mn2+,最适表面活性剂是1.0%Trition X-100。在最适条件下,磷脂酰丝氨酸转化率可达33.15%。     

二级连续系统混合培养益生菌及纤维益生菌片的研制

将填充床固定化系统连于单级液态连续培养系统后构建二级连续培养系统,接种肠膜芽孢杆菌、双歧杆菌与酪酸菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌,运行12d、三个批次,未出现污染、堵塞现象,五种益生菌固相总生物量高达3.5×1010/g.连续混合培养五种益生菌,菌密度高,菌与纤维载体不需分离,经干燥、干法压片得到了纤维益生菌片,产品活菌数为109/g,高出国家标准1000倍.     

脱脂豆粕酶法制备大豆肽

采用单因素实验研究了超声处理对脱脂豆粕蛋白质浸提率的影响,结果表明,容器式超声仪(300 W)浸提蛋白的最佳工艺为:频率30 kHz、料液比(质量体积比)为5%、在pH值8.5下处理20 min,此时上清液中蛋白质浓度增加58.68%.比较了五种蛋白酶对脱脂豆粕的水解效果,筛选出水解能力最强的碱性蛋白酶, 用正交实验法确定了其水解脱脂豆粕的最佳条件为:底物质量分数5%、酶用量10 000 U/g底物、温度55℃、pH值8.5、反应时间4 h,此时大豆肽溶出率为59.34%.