大豆外源基因遗传转化的研究现状及展望

用于大豆遗传转化的方法有很多,如农杆菌介导法、电击/PEG电击、基因枪、花粉管通道等。本文对这些方法在大豆上近些年的研究和应用现状（大豆品质改良、抗病和抗虫等）进行了阐述,并对各种转化方法存在的不足和今后应解决的主要问题和研究目标作了概述。     

PVY、CMV双价抗性RNA沉默表达载体的构建

采用RT-PCR方法克隆了PVYCP基因、PVYHC-Pro基因、CMVCP基因和CMV2b基因的保守片段,分别将PVYCP片段和CMV2b片段、PVYHC-Pro片段和CMV2b片段、PVYHC-Pro片段和CMVCP片段连接起来,以此为靶标构建并得到3个RNA沉默表达载体pCAMPb、pCAMHb和pCAMHP。获得的载体可以应用于植物转基因抗病毒育种工程中。     

烟草靶斑病菌（Rhizoctonia solani）SRAP-PCR 体系建立及优化

采用烟草靶斑病菌YC-9, LJT-8和QYS-7为DNA模板,初步筛选SRAP引物组合;采用L16(45)正交试验设计,对烟草靶斑病菌的SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs, Taq DNA聚合酶、引物和DNA模板浓度等5个因素进行优化试验。结果表明:共筛出13对扩增条带清晰且多态性好的引物组合;烟草靶斑病菌的最佳SRAP反应体系为Mg2+浓度2.0 mmol/L、dNTP浓度200μmol/L、Taq DNA聚合酶0.8U、引物浓度140 mmol/L、模板DNA 20 ng及1×PCR buffer,反应总体积为20 μL;各因素对SRAP-PCR扩增反应结果影响的差异较大,依次为Taq DNA聚合酶>引物> Mg2+> dNTPs=模板DNA。      

恩施州不同类型烟区气候特征及其适宜性分析

依据气候数据,通过聚类分析,将恩施州8个植烟县(市)分为3个区域类型:利川、咸丰为一类,巴东单独为一类,宣恩、鹤峰、来凤、建始和恩施为一类;3类区域各气候因子之间具有显著差异。与国内外优质烟区气候特征比较,利川、咸丰与美国相似,但该类型区域所产烟叶化学成分含量与美国烟区相比有较大差异。3类区域烟叶化学成分含量之间均具有显著差异。气候条件对烟叶内在品质有较大的影响。     

小麦秸秆还田对烤烟叶片发育及产质量的影响

为探讨适宜的小麦秸秆施用方式,田间试验比较了小麦秸秆直接施用和制成生物炭施用两种方式对烤烟叶片发育、烟叶产量及品质的影响。结果表明,与常规施肥相比,秸秆直接施用前期抑制、后期促进烟株叶片发育,对产量、产值及中部叶片外观质量影响较小,中、上部烟叶含钾量及烟碱含量均显著提高;施用秸秆生物炭促进了烤烟叶片发育,产量、产值显著提高,增幅分别为21.83%、54.23%,改善了中部烟叶外观质量,叶片身份、油分得分及外观质量总分显著增加,显著提高了中、上部烟叶含钾量,增幅分别为8.39%和22.63%,且烟碱含量增加不明显。可见,施用小麦秸秆生物炭能够促进烟株生长、提高烟叶产量、改善烟叶品质。     

烟草抗PVYN突变株SN01的SRAP—PCR反应体系的建立与优化

采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素（dNTPs、Mg2＋、TaqDNA聚合酶、引物和DNA）进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明,在20μL的反应体系中,各因素的最佳加入量分别是：dNTPs（2．5mmol／L）3．2μL、Mg2＋（25mmol／L）1．6μL、TaqDNA聚合酶（2．5u／μL）0．16μL、引物（10μmaol／L）0．6gL、DNA模板120ng。对该SRAP—PCR反应程序中的退火温度和循环次数筛选表明,最佳退火温度为57℃,循环次数为35次。该优化体系的建立,为进一步对烟草抗PVYN突变株SN01的抗病基因研究提供了可靠基础。     

不同种植方式下烤烟烟田土壤酶活性研究

以棕壤为供试土壤,研究了烤烟不同种植方式(绿肥烤烟轮作、烤烟纯作、麦茬烟和麦套烟)对烟田耕层土壤酶活性的影响。结果表明,在研究时段内,耕层土壤(0～25 cm)的过氧化氢酶、蔗糖酶和脲酶活性在4种种植方式下均无显著差异,但3种土壤酶活性随时间的变化各异,其中过氧化氢酶随时间变化较平稳,在烤烟移栽后30 d(6月20日)有最低值;蔗糖酶活性在烤烟移栽30 d后有所下降,随后逐渐升高,在采收期(9月7日)达到最高值;脲酶活性在烤烟现蕾期(移栽后68 d)达到最高值,随后急剧降低。就不同土壤层次(0～5 cm,5～15 cm,15～25 cm)而言,烟田土壤过氧化氢酶和脲酶活性在耕层内随土壤深度增加而增加,但增幅较小;而蔗糖酶活性在耕层内随土层深度大致呈现先增加后减小的趋势。在整个烤烟生育期内土壤酶活性的时间变异表现为,土壤脲酶的时间变异系数最大,显示其受外界环境的影响最大;蔗糖酶次之,而过氧化氢酶最小,其季节变化最稳定。     

低肥力土壤施氮对烤烟干物质积累、氮素吸收及产质量的影响

在低肥力地块上,通过田间试验研究了不同氮肥用量对烤烟干物质积累、氮素吸收及产质量的影响.结果表明,增加施氮量可提高烟株干物质积累量、氮素积累量和根、茎、叶的氮素含量;土壤中无机氮含量变化可分为前期增加、中期降低和后期相对稳定3个阶段,增施化学氮肥可以短期内明显增加植烟土壤中无机氮含量.在0～105 kg/hm2施氮范围内,随施氮量增加,烟叶产量、均价、产值增加,烟叶化学成分趋于协调.施氮对烤烟生物产量、氮素吸收积累和烟叶产质量有明显的影响.     

施用有机肥对棕壤养分及氨基氮含量的影响

选取5种具有代表性的有机肥样品,与棕壤原位培养和淹水培养14周后,测定有机质、全氮、总糖、粗脂肪及17种常见氨基酸含量。结果表明,增施有机肥能够明显增加土壤中有机质、全氮及氨基酸含量;原位培养后样品中总糖及粗脂肪含量均高于对照;淹水培养后各处理总糖含量均低于对照,加入麦秆和鸡粪的处理粗脂肪含量低于对照,其他处理高于对照。原位培养后猪粪对氨基酸总量影响最大,麦秆、鸡粪、冬牧70次之,豆饼最小;淹水培养对氨基酸总量的影响依次为麦秆>冬牧70>猪粪>豆饼>鸡粪。有机肥对土壤有机营养成分含量有明显影响。     

3％双氟·唑草酮悬乳剂动态表面张力与除草活性及安全性关系

[目的]通过对药液动态表面张力(DST)的测定,研究除草剂药液动态表面张力与制剂活性及安全性的关系。[方法]通过不同助剂体系制备3%双氟·唑草酮悬乳剂,测定稀释液的动态表面张力及室内除草活性、安全性。[结果]在7 g a.i./hm~2剂量稀释下,A配方的最终10 000 ms的动态表面张力为48.02 m N/m,低于其他配方,药效显示A配方的除草活性ED90值最低,为3.6 g a.i./hm~2,安全性较佳。[结论]不同3%双氟·唑草酮悬乳剂配方在3种稀释浓度下,分析动态表面张力数值表明优选配方的除草活性最佳,对小麦抑制率较低,这与室内生物活性测定结果一致。通过动态表面张力的测定,可以指导未来制剂配方开发中除草剂安全性与药效的平衡。