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目的构建百日咳毒素(PT)S1亚基片段原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法根据GenBank中登录的百日咳毒素S1亚基基因序列,人工合成密码子优化的S1基因,利用重叠PCR技术将S1基因上的两段DNA序列拼接在一起,形成一个新的基因序列S1′。将该序列与7ZTS表达载体连接,构建重组原核表达质粒7ZTS-S1′,转化大肠杆菌JM109(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果S1′基因经PCR鉴定及测序证明与预期相符;重组表达质粒经双酶切鉴定证明构建正确;表达蛋白的相对分子质量约17400,表达量约占菌体总蛋白的8%,且具有良好的反应原性。结论已成功构建百日咳毒素S1亚基片段重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达了重组蛋白,为PT单抗及其检测试剂盒的研制奠定了基础。 相似文献
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目的在大肠杆菌中高效表达SARS核衣壳蛋白。方法将已合成的SARS-CoV N蛋白基因片段,克隆至pUC-18载体,与pET28质粒连接,转化大肠杆菌,进行SARS-CoV核衣壳融合蛋白表达。用SARS患者恢复期血清进行表达产物鉴定。用色谱方法进行表达产物的层析纯化。结果SARS病毒N基因在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量占总蛋白的30%以上;经三步纯化后纯度达90%以上。结论已获得了SARS核衣壳蛋白样品。 相似文献
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目的:经阴道超声和腹部超声对子宫内膜病变的诊断进行科学比较,探讨经阴道超声和腹部超声对子宫内膜病变诊断的价值及可靠性。方法:对2012年1月至2013年12月来我院治疗的子宫内膜病变患者,依据检查方式的不同分为经腹部超声检查组和经阴道超声检查组,将两组患者的临床资料进行对比分析。结果:经阴道超声检查子宫黏膜下肌瘤、子宫内膜息肉等疾病的诊断符合率要明显高于经腹部超声诊断的符合率,两组差异均有统计学意义(P0.05)。结论 :经阴道超声检查子宫内膜病变简便、无创、准确率较高,是临床筛查和监测子宫内膜病变的可靠方法能够为子宫内膜病变患者提供有价值的鉴别诊断信息,值得在临床治疗上推广应用[1]。 相似文献
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归纳了一套简单易行的半经验噪声预估方程,可分别预测轴流风机的旋转噪声、宽频噪声和总声功率,并以T-40-NO3 1/2改型轴流通风机噪声测量结果进行了验证。 相似文献
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