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Production by N-nitroso compounds of O6-alkylguanine (O6-alkylG) in DNA directs the misincorporation of thymine during DNA replication, leading to G:C to A:T transition mutations, despite the fact that DNA containing O6-alkylG:T base pairs is less stable than that containing O6-alkylG:C pairs. We have examined the kinetics of incorporation by Klenow fragment (KF) of Escherichia coli DNA polymerase I of thymine (T) and of cytosine (C) opposite O6-MeG in the template DNA strand. Both T and C were incorporated opposite O6-MeG much slower than nucleotides forming regular A:T or G:C base pairs. Using various concentrations of dTTP, dCTP, or their phosphorothioate (Sp)-dNTP alpha S analogues, or a mixture of dTTP and dCTP, the progress of incorporation of a single nucleotide in a single catalytic cycle of a preformed KF-DNA complex was measured (pre-steady-state kinetics). The results were consistent with the kinetic scheme (Kuchta, R. D., Benkovic, P., & Benkovic, S. J. (1988) Biochemistry 27, 6716-6725): (1) binding of dNTP to polymerase-DNA; (2) conformational change in polymerase; (3) formation of phosphodiester between the dNTP and the 3'-OH of the primer; (4) conformational change of polymerase; (5) release of pyrophosphate. The results were analyzed mathematically to identify the steps at which the rate constants differ significantly between the incorporation of T and C. The only significant difference was the 5-fold difference in the rates of formation of the phosphodiester bond (for dTTP, kforward = 3.9 s-1 and kback = 1.9 s-1; for dCTP, kforward = 0.7 s-1 and kback = 0.9 s-1). These pre-steady-state progress curves were biphasic with a rapid initial burst followed by an apparently steady-state rise. Deconvolution of these curves gave direct evidence for the importance of the conformational change after polymerization by showing that the curves represented the sum of the rapid accumulation of the product of step 3 followed by the slow conversion of that to the product of step 5 (because of the rapidity of the release of pyrophosphate there was no significant accumulation of the product of step 4). The equilibrium constants for each step suggest that the greatest change in the Gibbs free energy occurs at the conformational change after polymerization and that while the formation of the phosphodiester bond to T is slightly exothermic, that to C is slightly endothermic.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS) 相似文献
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本文对采用区内C/I平衡的多区蜂窝CDMA系统下行链路的性能进行分析,给出两种区内C/I平衡算法并比较它们的性能,考虑呈对数正态分布的阴影和R^-4规律的路径损失的综合影响,采用与传统不同的小区平均中断概率来评价系统的性能。 相似文献
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Freelance 2000 DCS在轴流机上的应用 总被引:1,自引:1,他引:0
简要介绍了Freelance 2000 DCS的功能特点以及轴流机的控制要求.结合轴流机的控制特点,用Freelance 2000 DCS对原模拟电子系统进行改造,实现并改进了轴流机流量-静叶位置调节、防喘振控制、逻辑控制、状态监测、信息管理等功能。改造后的系统可靠性高、技术先进、信息管理功能强,其设计思想和方法均可供石化企业大型压缩机控制系统的设计和改造借鉴。 相似文献
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锗γ能谱测量中的符合相加修正 总被引:4,自引:1,他引:3
本文介绍了锗γ能谱测量中符合相加修正的原理和方法,给出了修正公式。分别计算了不同几何条件下两个锗探测器对一些放射性核素的符合相加修正因子,估计了符合相加修正因子对活度测量结果的误差贡献。 相似文献
116.
对国产加氢裂化热高分油管线的弯头开裂原因进行了分析 ,对预防连多硫酸腐蚀提出了相应的防范措施 :选用碳含量 <0 .0 3 %并含有稳定化元素Ti、Nb的奥氏体不锈钢或双相钢 ;控制焊缝硬度不大于HB2 0 0并焊后热处理 ;12CrMo和 15CrMo耐应力腐蚀性能好 ;设备停运后马上进行清洗并用碱液中和 相似文献
117.
丰气斜101试井资料在产能评价中的应用 总被引:2,自引:2,他引:0
通过对丰气斜101井试井资料的综合分析,得到了渗透率、流动系数、产能系数等油藏特征参数,计算了无阻流量、储量,绘制了井的IPR曲线,对其自然产能、井底污染情况作了详细描述,得出该区块井为一小型气藏的结论。 相似文献
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David Hui 《International Journal of Mechanical Sciences》1985,27(6):397-408
This paper deals with the effects of initial geometric imperfections and in-plane boundary conditions on the large-amplitude vibration behavior of angle- and cross-ply rectangular thin plates. It is found that the presence of imperfection amplitudes of the order of only half the total laminated-plate thickness may significantly raise the vibration frequencies and change the large-amplitude vibration behavior from the well-known hard-spring to soft-spring behavior. The effects of fibre angles and bending-stretching coupling for angle-ply plates and Young's moduli ratios and number of layers for antisymmetric cross-ply plates are examined. 相似文献
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