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We report a novel and straightforward fluorescence recovery assay which enables the detection of protein-DNA interactions and simultaneously determines relative binding affinities of sequence-specific DNA-binding proteins for a variety of DNA sequences in a multiplexed format. The detection of protein-DNA binding is accomplished by monitoring fluorescence recovery during exonuclease digestion of DNA sequences that are modified with fluorophore-quencher pairs. Retardation of fluorescence recovery occurs with binding of the protein to the putative DNA binding element, which arrests exonuclease digestion. The assay detects protein-DNA binding in a homogeneous solution simply, quickly, and reliably without using radioisotopes. Multiplexing is possible by labeling different DNA sequences with spectrally distinct dyes, allowing simultaneous analysis of experimental and control binding reactions in the same mixture. 相似文献
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Bian Xiufang Wang Weimin Yuan Shujuan Qin Jingyu 《Science and Technology of Advanced Materials》2013,14(1):19-23
The structure factor and the coordination numbers of liquid Al–Si alloys with different Si content have been measured by a high temperature X-ray diffractometer. Radial distribution functions (RDFs), the nearest atomic distance and the coordination numbers of eutectic Al–Si alloys before and after being modified with Sr and Sb were studied. The RDFs of the liquid alloy were decomposed by five Gaussian peaks. The results show that a Si–Si covalent bond exists in the liquid of eutectic and hyper-eutectic alloys. Sr in the liquid Al–Si has a capability to weaken the covalent bonds of Si–Si, suppressing the nucleation of the eutectic silicon phase. On the other hand, Sb in the liquid Al–Si increases the order degree of Si atoms, decreasing the supercooling degree of the nucleation and promoting the nucleation of eutectic silicon. 相似文献
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摘 要:目的 建立蔬菜农药多残留的筛查方法。方法 使用国家标准方法规定的QuEChERS法净化蔬菜样品,结合静电场轨道阱高分辨质谱法(orbitrap high resolution mass spectrometry)开展809种农药的快速非靶向筛查。结果 62种阳性农药的筛查限(screening detection limit, SDL)为0.005~0.010 mg/kg,定量限(limits of quantitation, LOQ)为0.01 mg/kg,线性范围为0.01~0.20 mg/kg,线性相关系数(r2)为0.9917~0.9997,日内精密度为2.77%~6.98% (n=5),日间精密度为4.82%~10.8% (n=5)。200批次样品共检出62种农药,不合格样品28批次,不合格率为14.0%。豇豆的不合格情况比较突出,不合格样品22批次,主要的不合格项是灭蝇胺和噻虫胺。结论 方法快速、准确、分析通量高,在无标准品的情况下实现了蔬菜中809种农药的非靶向快速筛查,可为蔬菜农药残留风险监测和质量控制提供支撑。 相似文献
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目的:建立反相液相色谱法测定复方泰妙菌素注射液中泰妙菌素、磺胺嘧啶钠的含量的方法。方法:采用Shim—packCLC—ODS柱(150mm×6mm,5μm),流动相为80%乙腈-0.7%磷酸氢二铵(体积比为0.3:0.7)并用氨试液调节pH至8.0±0.1。流速为1.0mL/min,检测波长为208nm,柱温为40℃。结果:在此色谱条件下两者能完全分离,泰妙菌素在5-40μg/mL和磺胺嘧啶钠在10—80μg/mL的范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系,回归方程和相关系数分别为:A=47205.9p+2003.72,R=0.9999;A=77050p+5514.75,R=0.9999。泰妙菌素和磺胺嘧啶钠的平均回8:4分别为99.99%、99.7%;RSD分别为0.70%、0.95%。结论:方法简便、快速、准确,可用作复方泰妙菌素注射液的含量测定。 相似文献
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