6种克罗诺杆菌精准鉴定及标准物质的制备研究

目的 制备具有我国食源性特点的6种克罗诺杆菌检验用标准物质.方法 通过生化、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)及二代高通量全基因组测序技术...     

超高效液相色谱-串联质谱法测定功能饮料中的牛磺酸和赖氨酸

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱方法测定功能饮料中牛磺酸和赖氨酸的分析方法。方法 采用衍生化的方法,将稀释之后的饮料样品中的牛磺酸和赖氨酸与苯甲氧羰酰琥珀酰亚胺在碱性条件下进行反应,之后应用超高效液相色谱-串联质谱测定衍生化后的化合物的含量。结果 牛磺酸和赖氨酸分别衍生之后的化合物在1-200 ng/mL的浓度范围内线性良好,牛磺酸的检出限为20 pg/mL,定量限为50 pg/mL,赖氨酸的检出限为100 pg/mL,定量限为250 pg/mL。两种物质在低、中、高三个浓度的加标回收率均在90-110%之间,相对标准偏差(RSD)均小于10%。结论 该方法样品前处理非常简单,衍生化反应步骤简便,灵敏度高,重复性好,可用于快速准确的测定饮料中的牛磺酸和赖氨酸的含量。     

食品检测用副溶血性弧菌标准物质的制备和评价

该研究制备并检测了不含基质的副溶血性弧菌标准物质。用质谱、生化、16S RNA基因序列测定3种方法对菌株CMCC20030分别确认种属。先采用冷冻干燥技术制备800个样品[103 CFU/样品(20 μL)]。然后随机抽取20个样品进行均匀性检验;再将样品存放25、37 ℃分别在1、3、5、7 d取出进行运输稳定性检验,将样品存放4 ℃分别于7、14、28 d进行短期保藏性检验,将样品存放-20 ℃分别于14、28、60 d的保藏稳定性检验。组织5家实验室对样品进行协同标定。最后用食品基质检测使用效果。菌株CMCC20030经3种方法均鉴定为副溶血性弧菌。均匀性检验中,F样品=1.930,小于FINV（0.05,19,20）。稳定性检验中,于-20 ℃保藏60 d、4 ℃保存28 d、25 ℃保藏7 d和37 ℃保藏3 d后,活菌含量103 CFU/样品。协同标定实验中,5家实验室结果均为103 CFU/样品。使用效果实验中,20种食品基质加入样品后均可以检出,本底对照均未检出。制备的不含基质的副溶血性弧菌样品满足标准物质要求,可依据不同目的灵活使用。     

超高压协同温度处理对绿色魏斯氏菌的失活动力学

为了建立超高压协同温度处理对绿色魏斯氏菌在低温烟熏火腿中的失活模型,采用40、45、50 ℃结合 200～500 MPa对接种108～109 CFU/mL绿色魏斯氏菌的烟熏火腿进行5、10、15、20、25、30 min的超高压处理,同 时做相同条件的离体实验进行对比。采用薄层平板计数,以时间为横坐标,亡菌数量级为纵坐标作失活曲线,选择 一级线性模型和非线性模型（Weibull和Logistic）进行模型的拟合,用模型的评价因子相关系数R2、准确因子Af和 均方差验证方程的拟合度。结果表明：经热压结合处理后,接种于烟熏火腿中的绿色魏斯氏菌比相同条件下离体状 态的绿色魏斯氏菌的失活更缓慢,可能因为火腿基质中存在一些大分子物质（如蛋白质、脂肪等）对菌体的保护作 用。Logistic方程最适合描述绿色魏斯氏菌在两种状态下的失活情况,为预测绿色魏斯氏菌在烟熏火腿中的失活提 供了理论依据。     

美国保健食品监管及标准现状

美国保健食品又称为膳食补充剂,是指以维生素、矿物质、氨基酸、草药(或其他草本植物)或以上成分经浓缩、配方、提取或混合形成的产品,主要由美国食品和药物管理局(Food and Drug Administration, FDA)负责监管。美国保健食品与我国的保健食品在产品类别、原料及形态等方面具有一定的相似性,因此美国保健食品目前的监管和标准现状对于我国保健食品有相当的借鉴意义。本文以美国保健食品(膳食补充剂)相关监管法规、产品标准作为研究对象,重点分析了美国保健食品在范畴、产品、原料、功能声称、标签、生产经营等方面的规定。同时介绍和分析美国膳食补充剂药典(dietary supplement compendium, DSC)的主要内容,为完善我国保健食品的监管体系、理顺监管职责、提升标准水平提供了技术依据。     

高效液相色谱-质谱法测定畜肉中的卡拉胶

建立测定畜肉中卡拉胶的高效液相色谱-质谱法。生鲜肉样品用1 mol/L盐酸处理,其中的卡拉胶降解生成[A-G4S]－等特征性寡糖片段,采用高效液相色谱-三重四极杆质谱进行定性和定量测定。可选择高分辨质谱用于确证。结果表明,对于正常畜肉样品不出现假阳性,对于标识添加卡拉胶的调理牛排等阳性样品均能有效识别。对于m/z 403＞241离子对,检出限为20 mg/kg（卡拉胶/肉）,线性范围为0.1～0.4 g/kg,线性相关系数在0.99以上,相对回收率为90%～120%。该方法前处理简便、检测指标明确、灵敏度高,可作为检测添加卡拉胶畜肉的有效手段。     

食品快速检测方法在国内外的应用与管理比较

食品快速检测因其简便、价格低廉等特点广泛用于食品的快速筛查和现场检测,是基层食品安全监管的技术支撑。本研究整理了食品快速检测方法的发布情况,对比分析了食品快速检测方法在国内外食品安全监管中的应用现状与管理模式,并对现阶段存在的主要问题进行了深入剖析,并提出建议。     

食品产地溯源技术及结合化学计量学应用进展

近年来,随着消费者对食品质量与安全问题的日益关注,以及对地理标志性商品溯源意识的提高,逐渐使人们对原产地高质量食品的需求增加,对此本文总结了近年来国内外食品地理来源掺假问题的现状和世界各地区对此问题的监管态度。然而由于利益驱动,食品领域的欺诈行为屡屡发生,各监管部门亟需有效、客观且快速的手段对地理标志性食品的真实性进行甄别,为满足这一需求,本文进一步阐述了化学计量学在食品产地溯源研究中的应用和具体实现方法,综述了常用于食品产地溯源研究的理化分析方法,包括以近红外光谱为代表的光谱法、同位素比例质谱、多元素分析、高效液相色谱-质谱法和气相色谱-质谱法等技术。此外,本文还讨论了各种分析方法的优缺点和其面临的挑战,以及不同数据模型的特点和适用范围,为初涉该领域的研究者提供思路,具有一定的参考价值。最后展望了食品产地溯源技术在未来的研究重点和发展趋势。     

食源性致病菌快速检测方法的探索研究

目的探讨传统细菌培养法及荧光定量PCR检测两种检测方法在食源性致病菌上的检出效果。方法对2015年采集的7类食品共600例样品采用传统细菌培养法及增菌后的增菌液荧光定量PCR检测,对检测结果进行分析比较。结果被检食品存在食源性致病菌污染,600例样品共检测出35株致病菌,食品致病菌的总检出率为5.83%,其中副溶血性弧菌与金黄色葡萄球菌检出率最高,达到15%。蜡样芽胞杆菌检出率较高,达到10.00%。传统细菌培养法致病菌阳性检出率为2.67%,荧光定量PCR检测致病菌阳性检出率为3.17%,两种检测方法下的检出率差异没有明显差异(X~2=1.882,P0.05)。结论检测中将传统细菌培养法同荧光定量PCR检测这两种检测方法结合起来,不仅提高了食源性致病菌检出率,也可缩短检测时间,提高检出率。后续研究将继续加大样本量并覆盖更多食品种类。     

食品中沙门氏菌快速检测技术研究进展

沙门氏菌的检验在食品微生物检验中具有十分重要的意义。本文主要针对基于免疫学的快速检测方法-酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、基于分子生物学的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)和基于蛋白质的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)在食品中沙门氏菌快速检测的应用进行了分析与比较。基于3种不同原理的检测方法各有其优缺点,ELISA方法成本低,操作简单但检出限高;PCR方法成本较高,但检测快速、灵敏度高且检出限低;MALDI-TOF MS检出限低但需要完善的细菌库进行比对。因此建议将含内控的荧光定量PCR与LAMP法作为食品中检测沙门氏菌的主要方法。