复合保护剂对透明质酸酶的稳定性研究

以球形节杆菌(Arthrobacter globiformis)A152发酵生产的透明质酸酶(HAase)的酶活力为衡量指标,通过研究糖类、醇类、生物大分子和金属离子等保护剂对提高透明质酸酶热稳定性的作用,考察添加复合保护剂对透明质酸酶热稳定性和储存稳定性的影响。结果表明,山梨糖醇、蔗糖和可溶性淀粉作为保护剂,可提高HAase酶的热稳定性。通过单因素和正交实验优化后得到了效果最佳的复合保护剂配方,即山梨醇7.5%、蔗糖10%、可溶性淀粉0.2%。优化后添加保护剂的HAase在42℃保温2 h后,其酶活保留率为88.68%,较对照提高了64.18%,在37℃,通过添加复合保护剂,其半衰期提高了48%。在4℃储藏90 d,添加复合保护剂和防腐剂(0.1%的山梨酸钾和0.05%的苯甲酸钠)的HAase酶活保留率高达85.52%。     

海洋细菌Sphingomonas sp. Q2产琼胶酶发酵条件优化、酶学性质及降解产物研究

本研究旨在对从江蓠中筛选获得的Sphingomonas sp. Q2菌株产琼胶酶能力条件进行优化并对其酶学性质及降解产物进行研究。通过响应面法对发酵条件进行优化,采用硫酸铵沉淀、离子交换层析和凝胶层析等方法对发酵所得酶液进行纯化并对纯化后的酶液进行酶学性质研究。发酵优化结果表明该菌株产琼胶酶的最佳培养基组成为：琼脂4.42 g/L、磷酸氢二钾1.30 g/L、氯化钠10.51 g/L。优化后的酶活力为1085.71 U/mL,较优化前提高了1.58倍。纯化后的琼胶酶比活为112048.82 U/mg,纯化倍数为7倍,回收率为48.04%。酶学性质结果表明该酶最适反应温度为40℃,最适pH为6.5,且在最适温度下保存8 h,酶活仍保持在90%以上。MS和¹³C-NMR结果表明,该琼胶酶的降解产物主要为新琼四糖。该琼胶酶具有良好的热稳定性及较高的酶活力,为琼胶寡糖的开发制备提供了基础。     

贝莱斯芽孢杆菌1-3产表面活性素的纯化、鉴定及表征

从口腔离体牙样品中筛选得到1株具有抑菌作用的贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）1-3。通过硫酸铵沉淀、分子筛层析、薄层层析和基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱检测,确定具有抑菌活性的物质是含有14～16个C的环状脂肽Surfactin,其分子质量分别为1 030.642、1 044.660 Da和1 058.677 Da。通过对分离纯化Surfactin的特征研究,结果表明其具有表面活性剂的功能,对食品加工、医疗卫生、畜禽养殖中常见的病原菌具有抑制作用,其中对单核细胞性李斯特菌（Listeria monocytogenes）ATCC 19115的最小抑菌浓度可达4 μg/mL。Surfactin对小鼠红细胞在有效抑菌浓度范围内未显示溶血性,且具有良好的热稳定性（20～100℃）和广泛的pH值（2.0～10.0）适应性,表明其在食品加工、医疗卫生和畜牧养殖中具有良好的应用潜能。     

基于近红外光谱的条斑紫菜菌落总数快速检测技术

为了探究快速、无损地检测条斑紫菜质量的可行性,本研究开发了一种基于近红外光谱技术的条斑紫菜微生物污染程度的定量分析方法。首先对来自不同海域的紫菜样本的菌落总数进行了测定,然后采集了155组样本的原始光谱信息和菌落总数信息。用标准正态变量变换（SNV）、多元散射校正（MSC）、二阶导数（Second-order derivative）等方法对光谱数据进行预处理。在完成最佳预处理方法筛选后,建立了基于光谱信息的非线性拟合（MLR）、支撑向量回归（SVR）、人工神经网络（ANN）、卷积神经网络（CNN）菌落总数预测模型。结果表明,标准正态变量变换与二阶导数的组合预处理效果最优,基于全波段下深度学习模型CNN预测效果最好（r值为0.940）。由此说明,CNN作为一种深度学习模型,可以实现针对条斑紫菜微生物品质的快速评价。     

产胆固醇酯酶毕赤酵母发酵条件优化及酶学性质研究

为实现胆固醇酯酶的高效发酵,以成功表达的毕赤酵母工程菌株P.pastoris X-33为研究对象,通过单因素和正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明:最适培养基组成为:酵母浸粉含量1.0%、蛋白胨浓度1.5%、甘油含量1.0%、KH₂PO₄ 1.18%、K₂HPO₄ 0.3%、生物素4×10-5%、YNB 1.34%;在初始pH7.0,30 ℃发酵96 h条件下,酶活力可达11.21 U/mL,较于优化前提高了3.65倍。酶学性质结果显示,该酶最适pH和最适反应温度分别为8.0和50 ℃,Zn2+对酶有较强的抑制性。该胆固醇酯酶酶学性质较为稳定,可为今后的规模化应用提供技术基础。     

一种含有牡蛎肽保健酒的功能评价

以牡蛎肽为主要原料,辅以枸杞、黄芪、杜仲和西洋参,研制出一种含有牡蛎肽的保健酒,并对其保健功能进行评价。缓解体力疲劳功能评价结果表明,该保健酒低剂量组能显著延长小鼠负重游泳时间（P＜0.05）,低剂量组和中剂量组均能显著降低运动后血清尿素氮含量（P＜0.05）,增加小鼠肝糖原储备（P＜0.05）。增强免疫力功能评价结果表明,该保健酒对小鼠的体质量、脾脏指数及肝脏指数均无显著影响（P＞0.05）。低剂量和中剂量组的保健酒均能显著提高小鼠脾淋巴细胞的转化率和半数溶血值（HC50）（P＜0.05）,并对小鼠腹腔单核巨噬细胞功能有显著提高的作用（P＜0.05）。根据评价标准,判定该保健酒具有缓解体力疲劳和增强免疫力的作用。     

章鱼内脏鱼油的提取及品质分析

对章鱼内脏的基本营养成分、脂质组成及脂肪酸组成进行分析,比较不同提取方法对油脂提取率的影响,确定了酶解法与溶剂提取法结合的提取方法。采用单因素试验和正交试验优化酶解工艺条件,确定最优酶解工艺条件为采用中性蛋白酶进行酶解、酶解温度50℃、料液比1∶0. 5、加酶量3 500 U/g、酶解时间4 h,在此条件下油脂提取率为74. 81%。通过脱胶、脱酸、脱胆固醇、脱色、脱臭得到精制章鱼内脏鱼油,精制章鱼内脏鱼油的理化指标基本达到SC/T 3502—2016精制鱼油二级标准,油脂脂肪酸组成未发生改变,鱼油中多不饱和脂肪酸含量为50. 51%,EPA、DHA含量达37. 30%。章鱼内脏鱼油具有较高的应用价值和开发前景。     

响应面法优化鲣鱼肽的复合酶酶解工艺及氨基酸评价

为实现鲣鱼高值化利用,对鱼肉酶解工艺进行优化,分析鲣鱼氨基酸组成特性。以水解度为指标,在单因素实验基础上,通过Box-Behnken响应面分析法对鲣鱼酶解的加酶量、料液比、酶解温度、酶解pH及酶解时间进行优化。结果显示,最佳酶解条件为:加酶量5000 U/g、料液比1:4（V/V）、酶解温度49.17℃、酶解pH6.6、酶解时间5 h,水解度的理论最大值为23.74%,实际值为23.15%±0.22%,与响应面预测值拟合较好;鲣鱼肽必需氨基酸和鲜味氨基酸含量丰富,与FAO/WHO建议的必需氨基酸模式基本一致,具有良好的营养价值和鲜美风味,是一种极具开发潜力的优质海洋蛋白肽资源。     

紫贻贝酶解工艺及抗炎活性研究

目的：结合抗炎指标对紫贻贝酶解工艺进行筛选,确定最佳制备工艺。方法：采用脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症模型评价抗炎作用。以酶解得率和NO抑制率为指标,从菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰酶和中性蛋白酶6种蛋白酶中筛选出最佳蛋白酶和超滤组分,并通过正交试验优选最佳试验方案。结果：紫贻贝经胰酶酶解得到的分子质量小于5ku的组分抗炎效果最佳。最佳工艺条件为料液比为1:15(w:V)、加酶量为1.5%、酶解时间3 h,在此条件下的酶解得率为13.54%(以鲜品计),NO抑制率为99.17%。结论：紫贻贝酶解物具有明显的抗炎作用,制备工艺合理可行,适合工业化生产。     

不同海域野生海参体壁营养成分的比较分析

探究不同海域野生海参的营养功能成分,为野生海参的综合开发利用提供参考,本文对糙刺参、黄玉参、土耳其米刺参以及冰岛红参等四种海参体壁中基本营养成分、氨基酸组成、脂肪酸组成、矿物质含量等进行检测、分析和评价。结果表明,四种海参的共同点为高蛋白、低脂肪。其中,土耳其米刺参蛋白含量最高,脂肪含量最低;黄玉参的海参多糖和灰分含量均最高;冰岛红参的海参皂苷含量最高。四种海参均含有17种氨基酸,且鲜味氨基酸与药效氨基酸含量丰富;必需氨基酸含量占比13.78%～20.27%,其中冰岛红参的必需氨基酸含量最高。根据氨基酸评分（AAS）和化学评分（CS）,四种海参的第一限制性氨基酸均为赖氨酸。四种海参的SFA占总脂肪酸的质量分数在23.84%～36.24%之间,均以棕榈酸（C16:0）和硬脂酸（C18:0）为主;不饱和脂肪酸占比在56.39%～72.93%之间,其中冰岛红参含量最高。在四种海参的常量元素中,除土耳其米刺参以外,其余三种海参均以钙元素含量最高,微量元素中,含量最高的均是铁元素。通过比较分析表明：不同海域野生海参富含人体需要的多种营养,具有不同的食用价值和开发利用前景。