突变芳香基硫酸酯酶改性琼脂的工艺优化及其性能表征

目的:明确食鹿角菜交替假单胞菌突变芳香基硫酸酯酶K253Q改性琼脂的制备工艺,表征酶法改性琼脂的性能特征。方法:以硫酸根脱除率为评价指标,考察反应时间、加酶量、温度、pH对突变芳香基硫酸酯酶K253Q处理琼脂的影响,并对理化性质和结构进行表征。结果:以4 g琼脂为原料,确定最佳工艺条件为:反应时间6 h,加酶量80 U,反应温度50℃,初始pH7.0。另外,以100 g琼脂为原料进行放大实验,在最佳工艺条件下,硫酸根脱除率达到50.1%。在此条件下,K253Q处理后琼脂的凝胶强度、3,6-内醚半乳糖含量、白度和透明度均有显著提高,而灰分和粘度值显著降低（P<0.05）。扫描电镜分析显示,K253Q处理琼脂的微观结构表面突起之间连接更加紧密,表面更光滑。结论:K253Q处理琼脂后提高了琼脂的品质,琼脂硫酸根含量降低,凝胶强度、3,6-内醚半乳糖含量、白度和透明度提高,灰分降低。     

海带生长初期与成体期食品原料学特性

海带是重要的海洋生物资源及食品原料。但目前人们主要以成体海带作为食品原料,对不同生长期海带的食品原料学特性缺乏系统研究。为探明生长初期海带（以下称为海带苗）与成体海带的食品原料学特性,本实验对其主要营养成分、氨基酸组成、矿物质元素、脂肪酸、呈味游离氨基酸和烹饪质构特性进行分析。结果表明,海带苗的灰分、粗蛋白和粗脂肪含量高于成体海带。海带苗和成体海带必需氨基酸与总氨基酸的比值分别为0.36和0.34,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值分别为0.57和0.53。海带苗与成体海带钾元素的营养素参考值（nutrient reference value,NRV）分别为70.40%和41.25%,铁元素的NRV分别为54.60%和16.00%。海带苗的棕榈酸、豆蔻酸和反油酸含量高于成体海带。海带苗与成体海带的鲜味氨基酸滋味活性值（taste activity value,TAV）分别为3.46和0.64,甜味氨基酸TAV分别为0.27和0.80,苦味氨基酸TAV分别0.26和0.00。热烫后海带苗硬度、黏性、咀嚼性、胶着性、黏聚性和回复性小于热烫后的成体海带,而二者的弹性基本相当。综上,海带苗比成体海带具有更高的蛋白质营养效价、矿质元素含量、反油酸含量以及更好的滋味及质构特征。本研究可为海带在现代食品工业中的高值化利用提供食品原料特性数据,对于现代食品工业及海带产业发展具有一定的参考价值。     

响应面法优化纤维素酶辅助从泡叶藻中提取泡叶藻聚糖的工艺

通过单因素实验研究纤维素酶辅助提取泡叶藻聚糖时液料比、酶添加量、酶解温度、酶解时间等关键因素对泡叶藻聚糖提取率的影响,并进一步采用Box-Behnken实验设计和响应面分析法优化其工艺参数. 结果表明,纤维素酶辅助提取泡叶藻聚糖的优化工艺条件为液料比30 mL/g、酶浓度200 IU/mL、酶解时间2.0 h、酶解温度50℃,该条件下多糖提取率为14.65%?0.73%,与模型预测值14.75%非常接近,采用响应面法对泡叶藻聚糖提取条件进行优化合理可行.     

直投式酵母菌发酵对江蓠腥味及膳食纤维性质的影响

海藻是重要的海洋生物资源,富含多种生物学功能的膳食纤维。传统工艺制备的海藻膳食纤维具有较强的腥味,影响其在食品中的应用。以江蓠为原料,研究直投式酵母菌发酵对江蓠腥味及其膳食纤维性质的影响。研究表明,优化得到酵母菌直投式发酵剂发酵脱腥的温度为25 ℃、活化菌液稀释倍数为4、江蓠与稀释菌液比例为1∶20（g/mL）、发酵时间为4 h。发酵后,江蓠样品的腥味强度评分由2.28 上升至9.67,腥味成分中的正己醛、1-辛烯-3-醇、（Z）-4-癸烯醛、（Z）,（Z）-2,4-癸二烯醛含量明显下降。发酵前后,江蓠膳食纤维的持水性分别为29.20、30.50g/g、持油性分别为5.73、6.09 g/g、白度分别为1.86%和1.77%、凝胶强度分别为355、463 N·mm。综上,江蓠进行直投酵母菌发酵后,能较好地降低其腥味,且对江蓠膳食纤维的性质影响较小。     

常见类胡萝卜素对HepG2细胞紫外氧化损伤的影响

该文研究常见类胡萝卜素对HepG2 细胞紫外氧化损伤的影响。通过HepG2 细胞毒性试验、紫外线A（ultraviolet A,UVA）辐照试验、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量测定和总抗氧化能力（total antioxidant capacity,TAOC）分析等,研究常见类胡萝卜素（法夫酵母类胡萝卜素提取物、虾青素、β-胡萝卜素和海胆酮）对HepG2 细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,虾青素、β-胡萝卜素和海胆酮均能提高UVA 辐照损伤的HepG2 细胞的存活率、GSH 含量和T-AOC,其中虾青素对HepG2 细胞的活性氧（reactive oxygen species,ROS）损伤保护作用最强。但是,法夫酵母类胡萝卜素提取物对UVA 辐照HepG2 细胞的存活率、GSH 含量和T-AOC 均无促进作用。综上,法夫酵母类胡萝卜素提取物对癌细胞ROS 氧化损伤不具有保护作用,因此可能是更有效的癌症放疗和化疗辅助治疗保护剂。     

海带全粉对鱼丸品质的影响

为改善鱼丸品质,分析海带全粉添加量（0%、0.25%、0.50%、0.75%、1.00%、1.25%）对鱼丸的质构（texture profile analysis,TPA）、凝胶强度、白度、持水率、分子结构、抗氧化活性、胰脂肪酶抑制能力、感官等品质的影响。结果表明,0.25%海带全粉对鱼丸TPA 和凝胶强度的影响不显著（p＞0.05）,但能提升其持水率;随着海带全粉添加量增加至0.50%～1.25%,除了弹性变化不显著（p＞0.05）,鱼丸的凝胶强度、黏聚性、回复性和白度系数降低,硬度、咀嚼性和持水率提高（p＜0.05）。红外光谱分析得出海带全粉对鱼丸蛋白质结构没有影响。0.25%～0.75%海带全粉能够提高鱼丸的感官评分（p＜0.05）。添加高剂量海带全粉能显著提高鱼丸的抗氧化活性和鱼丸对胰脂肪酶活性的抑制作用（p＜0.05）。     

消除国产琼脂磷酸盐沉淀的工艺优化及设计

琼脂是配制微生物培养基的重要凝胶基质,目前国产琼脂在配制培养基时具有显著的磷酸盐沉淀现象,影响了菌落计算等微生物实验的准确性。为了消除磷酸盐沉淀,本实验以添加磷酸盐后琼脂浊度及透明度为评价指标,研究吸附法、掩蔽剂法和化学沉淀法对Sigma琼脂、国产琼脂条和国产琼脂粉的磷酸盐沉淀的消除效果,并对优化工艺进行设计及经济可行性分析。实验结果显示,吸附法、掩蔽剂法对三种琼脂的透明度和浊度都具有一定的影响,但产品的质量达不到微生物培养基配置的标准。磷酸二氢钾沉淀法处理Sigma琼脂和国产琼脂条,琼脂透明度提升至94%以上,磷酸盐处理浊度降至20NTU,符合微生物培养基所用的生化琼脂产品标准。对磷酸二氢钾沉淀法处理国产琼脂条的工艺进行设计,结果显示年产1000t国产消除磷酸盐沉淀的生化琼脂总投资利润率为64.01%,静态投资回收期为3.3年。本文结果显示磷酸二氢钾沉淀法处理国产琼脂条可以显著消除磷酸盐沉淀,生产的产品质量符合微生物培养基配置要求,且经济上具有可行性,为国产化去除琼脂磷酸盐沉淀、生产微生物培养基的琼脂产品提供了技术参考。     

基于酶活力模型和细胞模型分析红毛藻多糖降血脂活性

目的：对红毛藻（Bangia fusco-purpurea）中多糖组分进行分离纯化，分析多糖组分的体外降血脂活性，阐明红毛藻的降血脂活性功效机理，为红毛藻的精深加工和高值化应用提供科学依据。方法：采用热水提取-乙醇沉淀法从红毛藻中提取粗多糖；除去蛋白质后，通过Sephadex G75葡聚糖凝胶柱层析纯化后得到红毛藻多糖（B. fusco-purpurea polysaccharide，BFP）；采用DEAE-cellulose 52柱层析对BFP进一步分级纯化得到3 个多糖组分F1、F2和F3；通过酶动力学分析各组分对胰脂肪酶活性的影响；采用噻唑蓝法测定BFP组分F1、F2和F3对HepG2细胞和Caco-2细胞活力的影响；通过高血脂/高胆固醇HepG2细胞模型、油酸诱导Caco-2细胞模型分析BFP组分F1、F2和F3的体外降血脂活性。结果：酶动力学分析结果表明，BFP组分F3显著抑制了胰脂肪酶活性，且为可逆竞争性抑制；细胞模型结果表明，F1、F2和F3在质量浓度0～500 mg/mL范围内对所试细胞均无显著毒性作用；F1显著抑制Caco-2细胞对游离脂肪酸的吸收；F3对高血脂HepG2细胞模型中甘油三酯的合成和高胆固醇HepG2细胞模型中脂类的合成均有显著抑制作用。结论：BFP组分可有效抑制胰脂肪酶活性和细胞对游离脂肪酸的吸收、降低胆固醇和甘油三酯的合成，具有潜在的降血脂活性。     

琯溪蜜柚柚皮苷纯化鉴定及其对胰脂肪酶的抑制作用

为了探索琯溪蜜柚黄酮作为胰脂肪酶抑制剂的应用价值,本实验采用Sephadex LH-20葡聚糖柱层析、高效液相色谱-质谱联用、傅里叶变换红外光谱对琯溪蜜柚柚皮黄酮进行分离纯化及结构鉴定,并通过酶反应动力学和分子对接技术研究其对胰脂肪酶的抑制类型和分子间相互作用。高效液相色谱-质谱联用和傅里叶变换红外光谱分析结果表明,纯化后的琯溪蜜柚柚皮主要黄酮成分为柚皮苷;纯化鉴定的柚皮苷对胰脂肪酶半抑制浓度（half inhibitory concentration,IC50）为0.99 μg/mL,抑制类型为可逆非竞争型,抑制常数Ki＝0.58 μg/mL;该黄酮与胰脂肪酶的结合自由能为－30.14 kJ/mol,相互间的分子作用力包括范德华力、疏水相互作用、氢键、π键等,结合区域位于酶催化活性中心之外的位点。本研究表明琯溪蜜柚的主要黄酮成分柚皮苷对胰脂肪酶具有强烈的抑制作用,为利用琯溪蜜柚黄酮开发高效安全的胰脂肪酶抑制剂提供了理论依据。     

Fe3O4磁性纳米粒子固定化微泡菌褐藻胶裂解酶AlgL17的研究

本论文旨在优化微泡菌褐藻胶裂解酶AlgL17固定化条件,以期探索出高效的固定化条件。以单宁酸功能化的四氧化三铁磁性纳米粒子作为载体,对褐藻胶裂解酶AlgL17进行固定化条件优化。测定固定化酶的最适反应温度和最适反应pH,并对固定化酶进行傅里叶变换红外光谱(FTIR)和扫描电镜(SEM)检测。结果表明,褐藻胶裂解酶AlgL17最佳固定化条件为:加酶量2.7 U、载体量25 mg、固定时间5 h,固定化酶的最适反应条件为:温度35℃、pH8.5。FTIR和SEM结果显示,褐藻胶裂解酶AlgL17固定在载体表面。四氧化三铁磁性纳米粒子可以成功固定褐藻胶裂解酶AlgL17,固定化后的褐藻胶裂解酶具有工业应用的前景。