牛奶样品中志贺氏菌胶体金免疫试纸条检测方法的建立

通过用超声波破碎的宋内氏志贺氏菌和福氏志贺氏菌的菌体碎片为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得4株能稳定分泌抗志贺氏菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取其中一株制备单抗,并用胶体金标记。同时抗志贺氏菌的兔多抗和驴抗鼠抗体(二抗)分别喷涂于硝酸纤维素膜作为检测线(T线)和质控线(C线),研制了志贺氏菌胶体金快速检测试纸条。结果显示试纸条的灵敏度为105mL-1,并只与两株志贺氏菌有阳性反应外,而与其它23株常见的细菌无交叉反应。同时在检测添加有阪崎肠杆菌和长双歧杆菌的牛奶样品中,结果显示试纸条的灵敏度为106mL-1。志贺氏菌免疫胶体金试纸条的建立,为加强食品中志贺氏菌的检测工作,建立一种快速、简便的筛查方法具有重要的意义。     

覆盆子不同多酚组成及抗氧化、抗糖尿病活性

为阐明覆盆子不同形态多酚抗氧化和抗糖尿病活性差异,采用不同溶剂和方法提取覆盆子中的水溶、醇溶、游离和结合多酚,比较不同提取物的总酚、总黄酮和可水解单宁含量差异,测定其自由基清除能力、α-葡萄糖苷酶抑制和抗糖基化能力,并采用质谱技术测定活性最佳样品的主要化学成分。结果表明：覆盆子醇溶性多酚提取物的总酚和可水解单宁含量最高,分别为414.95、182.47 μg/mg（以每毫克提取物中所含没食子酸当量表示）,同时具有最高的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除能力、α-葡萄糖苷酶活性抑制能力,半抑制浓度分别为40.68、23.90 μg/mL和1.65 μg/mL。结合多酚提取物的总黄酮含量和抗糖基化能力最强。共从醇溶性多酚中初步鉴定出31 个化合物,单宁类和黄酮类化合物为其主要活性成分。因此,提取游离多酚和水溶性成分后的覆盆子残渣具有进一步利用、开发高活性抗氧化和抗糖尿病活性成分的应用价值。     

巴西坚果过敏原Ber e 1的分离纯化及表征鉴定

以巴西坚果仁为原料,通过粉碎、脱脂、浸提、阴离子交换层析纯化过敏原蛋白Ber e 1;利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、液相色谱-串联质谱联用、Western blot等方法对其进行鉴定,并通过圆二光谱仪和紫外分光光度计表征其二、三级结构。结果表明：纯化获得的巴西坚果过敏原Ber e 1,单轮制备量可达20 mg以上,且纯度大于95%,其蛋白质高级结构未被破坏,能够被巴西坚果过敏患者的血清准确识别。该纯化技术路线简单、对设备要求低且高效,为巴西坚果过敏原Ber e 1的相关研究奠定了一定的基础。     

大黄酸对α-淀粉酶的抑制机理分析及分子模拟

本文应用紫外、荧光、圆二色谱和分子模拟等手段,分析测定了大黄酸对α-淀粉酶的抑制作用、抑制类型和抑制动力学常数,探讨了大黄酸对α-淀粉酶二级结构的影响,并通过分子模拟软件对大黄酸和α-淀粉酶进行分子对接。结果表明,大黄酸是一种可逆的竞争型α-淀粉酶抑制剂,其半抑制率IC50为0.43±0.02 m M,抑制常数Ki为0.35±0.03 m M;进一步的圆二色谱分析表明,大黄酸能使α-淀粉酶二级结构含量的变化(α-螺旋含量由12.22%逐渐增加到22.72%,β-折叠含量由43.24%逐渐降低到36.43%),这意味着大黄酸能够诱导α-淀粉酶的构象发生部分改变;螯合钙离子实验证实了大黄酸能够螯合活性中心的钙离子;分子模拟结果也表明,大黄酸能够优先结合到α-淀粉酶的活性中心,并与催化基团TRP59和TYR62发生相互作用,形成氢键和π-π效应,进而与淀粉竞争活性中心,从而降低了α-淀粉酶的催化活性。     

腰果过敏研究进展

腰果过敏是一种严重的树坚果过敏。近年来,随着腰果消费量迅速增长,腰果过敏发生率随之呈上升趋势,腰果正在成为一种重要的食物过敏原。少量的过敏原可导致严重的过敏反应,甚至危及性命。然而,目前腰果过敏显然是一个被严重低估的健康问题,尤其是对儿童。因此,社会迫切需要给予腰果过敏足够的重视,并有必要向公众广泛宣传腰果过敏的严重性。本文就腰果过敏的流行病学、过敏原成分、临床特点、诊断以及预防治疗等方面进行系统综述,旨在为腰果过敏的社会认识和深入研究提供科学信息。     

亚临界水条件下葡萄糖-天冬酰胺反应产物的分析及其抗氧化活性

以葡萄糖-天冬酰胺为美拉德反应(Maillard reaction,MR)模型,在亚临界水不同处理时间、温度条件下发生反应,研究产物中类黑精、丙烯酰胺的生成量和产物抗氧化活性及其相关性。结果表明:120、140℃处理时,类黑精生成量及产物抗氧化活性均随处理时间的延长而增加,180℃长时间热处理类黑精生成量及抗氧化活性均有略微降低的趋势;120℃短时间(≤40 min)热处理无丙烯酰胺生成,140、160℃处理时,丙烯酰胺的生成量随处理时间的延长而增加,然而180℃处理时,丙烯酰胺的生成量随处理时间的延长而减少。类黑精生成量同产物的抗氧化活性有很好的相关性(相关系数R20.94),而丙烯酰胺的生成量同类黑精生成量和产物抗氧化活性的相关性稍差。     

多糖对免疫系统调控的研究进展

多糖是一类重要的生物信息大分子,广泛存在于动植物和微生物体内。目前,多糖对机体免疫系统的调控作用已获得学术界的普遍认可。多糖对免疫系统的调控机制主要是与免疫细胞表面的模式识别受体如甘露糖受体、Toll样受体、Dectin-1、清道夫受体、补体受体等结合,激活免疫细胞,通过促进单核巨噬细胞的吞噬功能、调控淋巴细胞的增殖和转化、增强对补体系统的活化、诱导细胞因子分泌等实现对机体免疫系统功能的调控。此外多糖对神经-内分泌-免疫系统网络的平衡调控也是其发挥免疫调控作用的重要途径。多糖的生物学活性及其免疫调控作用机制一直以来是国内外科研工作者研究的重要课题。本文主要对近年来国内外对多糖基于免疫系统的免疫调控作用及其机制的研究进行综述。     

游离脂肪酸在几种常见食品风味形成中的作用

游离脂肪酸在许多食品的风味形成中起着十分重要的作用,一方面是直接作为风味化合物起作用;另一方面游离脂肪酸作为风味前体物,对食品特有风味的形成做出贡献。但是,在不同的食品风味形成的过程中,游离脂肪酸的作用是不同的。文章综合论述了它在腊肉、香肠、火腿、奶酪、茶叶及啤酒等常见食品的风味形成过程中的作用。      

食物过敏原标准物质的研究进展

食物过敏原标准物质是解决食物过敏问题的关键实验材料之一。在食物过敏原标准化方面,鸡蛋、牛奶和花生过敏原的分离纯化、结构和免疫学性质表征方面取得了良好的效果,为研发单个过敏原蛋白标准物质提供了支撑。在美国国家标准与技术研究院(NIST)颁布的8种过敏性食物标准物质中,只有RM8445用于检测食物过敏原;由欧盟资助的两大项目中,EuroPrevall项目主要构建了一个食物过敏原信息的数据库,而CREATE项目则首次证实重组花粉过敏原rBetv1可作为天然花粉过敏原Betv1的候选标准物质,为开发重组食物过敏原标准物质提供了一种可借鉴的策略。总之,研发食物过敏原致敏性蛋白标准物质是一项重要的任务,极具挑战性。      

抗赭曲霉毒素A五价纳米抗体的表达及分析

利用霍乱毒素B亚基(B subunit of Cholera toxin,CTB)能自组装形成五元环状结构,将霍乱毒素B亚基与纳米抗体(VHH28)进行融合从而达到纳米抗体多聚化的目的。将重组载体pET25b(+)-CTB-VHH28转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,对诱导剂浓度、诱导温度、诱导时间进行优化,SDS-PAGE凝胶电泳分析融合蛋白表达情况。结果显示CTB-VHH28为可溶表达,其中单体分子量大小约30 kDa,五聚体分子量大小约150 kDa,均与预测的分子量大小一致;确定了其最优表达条件为:IPTG浓度为0.05 mmol/L,诱导温度为16℃,诱导时间为10 h。经过镍柱纯化后成功得到了纯度较高的五价纳米抗体,表达量为20 mg/L。对其活性进行测定,结果表明CTB-VHH28能与赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)特异性结合,在2.5%甲醇条件下,间接竞争ELISA半抑制浓度(IC₅₀)为0.38 ng/mL。热稳定性及甲醇耐受性结果显示,CTB-VHH28在25~55℃具有良好的热稳定性,反应体系中甲醇浓度低于20%时,竞争抑制率变化不大,具有较好的甲醇耐受性。结论:本研究所制备的五价纳米抗体可以用于OTA检测。