嗜热乙醇杆菌中醇脱氢酶E的功能与调控

对嗜热乙醇杆菌中的醇脱氢酶E(alcohol dehydrogenase E, AdhE)进行了克隆、表达和鉴定,证明先前报道的醛脱氢酶其实是AdhE.对AdhE在乙醇代谢中的功能与调控进行了研究.通过分析测定AdhE的酶学性质、AdhE在嗜热乙醇杆菌的不同生长时期的表达情况以及AdhE高表达时嗜热乙醇杆菌产乙醇/乙酸的比率变化,证明了AdhE的主要生理功能是促使乙醇产生.分析了嗜热乙醇杆菌在山梨糖(强还原性碳源)、葡萄糖(氧化还原性居中的碳源)和葡糖醛酸(强氧化性碳源)诱导培养下的AdhE表达量,证明氧化还原力是AdhE的表达调控信号之一.     

调控辅因子水平减少酿酒酵母积累副产物乙醇

C4二元羧酸广泛用于食品、医药和化学等行业,市场潜在需求量巨大。酿酒酵母被认为是发酵生产C4二元羧酸的潜在最适微生物,却产生大量的乙醇,导致了碳流的损失。通过敲除硫胺素合成途径中的调控基因THI2,阻断了硫胺素的合成,使得副产物乙醇产量从5.27±0.23 g/L下降到0.53±0.12 g/L,但影响了葡萄糖消耗和菌体的生长。在此基础上,通过外源添加0.04μmol/L的硫胺素二磷酸,促进了葡萄糖的消耗和菌体生长;进一步通过外源添加1 000μg/L的NAD+,使得葡萄糖的消耗量和菌体的生长分别提高了48.6%和47.2%,而乙醇产量仅增加了0.56 g/L。通过调控辅因子水平(硫胺素和NAD+)可以有效减少副产物乙醇的积累,为解决利用酿酒酵母生产C4二元羧酸中副产物乙醇积累这一普遍性问题提供了一个新的策略。     

油茶籽油的水媒法罐组式逆流提取工艺优化及其品质分析

在茶皂素辅助水媒法提取油茶籽油研究的基础上,通过正交试验优化了水媒法罐组式逆流提取油茶籽油的工艺条件。同时,对比了水媒法罐组式逆流提取工艺、土榨法、溶剂浸出法、乙醇水提法、超临界萃取法所得油茶籽油的质量指标。结果表明,水媒法罐组式逆流提取油茶籽油的最佳工艺条件为:纯水提取,提取温度50℃,pH 10,料液比1∶3,单次提取时间30 min。在最佳工艺条件下,提油率为88. 25%,所得油茶籽油品质优良,富含多酚、角鲨烯等有益物质。水媒法罐组式逆流提取工艺安全环保,提取剂用量少,提取温度低,能够在保证油品质量的同时提高油茶籽油提取效率,在植物油提取工艺上具有应用和推广的潜力。     

电子束辐照降解玉米中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素

利用电子束辐照(electron beam irradiation,EBI)降解玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)和呕吐毒素(deoxynivalenol,DON),考察EBI对单一及混合毒素的降解效果,分析毒素降解及相互作用规律。结果表明,在0～10 k Gy范围内,随着剂量的增加,标准品溶液中单一毒素降解率升高,且毒素初始浓度越低,降解率越高。10k Gy时,1μg/m L的ZEN和DON降解率分别可达76. 04%和89. 31%。以EBI处理单一毒素为对照,DON与ZEN混合后同时经EBI处理,标准品和玉米浆中ZEN降解率均呈显著降低,DON降解率无明显趋势变化。14. 20%(质量分数)水分含量的玉米粉中混合毒素经EBI处理后,ZEN和DON降解率均低于单一毒素对照组;水分含量为19. 80%(质量分数)时,ZEN降解率低于对照组而DON高于对照组。该研究阐明了EBI同时降解玉米中ZEN和DON的效果,为EBI在粮食真菌毒素降解中的应用提供了理论参考。     

RP-HPLC法测定酒花中的黄腐酚

建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测酒花中黄腐酚含量的方法.选用色谱柱Zorbax Eclipse XDB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇和0.2%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱.枉温25℃,流速0.5mL/min,检测波长370nm.在此条件下,黄腐酚得到很好分离,在1.13～113mg/L范围内线性关系良好,R2=0.9992,外加标回收率在95.05%～104.03%之间,RSD=2.71%.该方法可以简便、准确地测定酒花中黄腐酚的含量.     

特异性亲和吸附法纯化冬小麦麸皮抗冻蛋白

抗冻蛋白是一种可以非依数性降低体系冰点的蛋白质,在生命体内具有非常重要的生理作用,广泛地应用于食品、医学和生物技术等领域.首先通过热重分析仪法和分配系数法研究证明冬小麦麸皮抗冻蛋白(TaAFP)具有较强的亲水性和亲冰性,进一步使用特异性亲和吸附法对其纯化,产率1.64%,获得电泳纯TaAFP.纯化过程中充分利用其自身较强的亲水和亲冰的特性.该方法具有步骤少、耗时较短等优点,比传统的色谱方法更加快捷高效,但是对纯化过程的控制要求严格.     

感应电场对连续流动蓝莓果泥理化特性的影响

采用非接触型感应电场(IEF)对蓝莓果泥进行连续加工,考察不同激励电压(100、150和250 V)、温度(65、75和85 ℃)下果泥阻抗和多酚氧化酶(PPO)活性随处理时间(9、18、27、30、36和45 min)的变化规律,并对比不同处理(鲜榨、常规热处理、IEF处理)后蓝莓果泥的色值、粒径分布、流变特性、风味和挥发性成分。结果表明,随着处理时间的增长和处理温度的升高,料液阻抗逐渐降低;250 V激励电压诱导形成的IEF对多酚氧化酶(PPO)的杀灭具有促进作用,经250 V、85 ℃和30 min的IEF处理后,蓝莓果泥 PPO活性完全丧失。IEF处理蓝莓果泥的L*和a*分别为30.37和6.42,显著高于鲜榨和常规热处理的果泥(P<0.05)。IEF处理的蓝莓果泥产品在粒径分布、黏度和风味上更接近鲜榨果泥。弱的感应电场/感应电流对蓝莓果泥中呈色物质、风味成分等具有一定的稳定作用,有利于减缓热处理导致的果泥颜色损失和风味变化。研究旨在为利用弱电效应实现果泥产品的高品质加工提供一定理论参考。     

冬小麦麸皮抗冻蛋白的筛选及其分离纯化

抗冻蛋白是一种可以非依数性降低体系冰点的蛋白质,在生命体内具有非常重要的生理作用.从多种谷物中筛选,发现冬小麦麸皮粗蛋白显示出抗冻活性.进一步依次采用硫酸铵沉淀、离子色谱、凝胶色谱以及HPLC等步骤将其分离纯化,最终获得色谱纯的冬小麦麸皮抗冻蛋白.该蛋白总纯化倍数为357倍,产率为1.60%.电泳分析确定该抗冻蛋白由单一亚基组成,分子质量为13 860 u.     

无醇杨梅果酒发酵工艺优化及其品质分析

利用单因素结合正交试验优化无醇杨梅果酒的发酵工艺,得出适宜的发酵条件为:发酵温度28℃,加渣量70 g/L,通氧发酵时间4 h。将无醇杨梅果酒与杨梅汁的香气成分进行对比分析,结果表明:无醇杨梅果酒的主要香气成分是酯类(30.31%)、高级醇类(19.39%)和烯萜类(31.22%)化合物,其中酯类和高级醇类的相对含量分别增加了165.41%和42.47%,烯萜类相对含量仅下降了35.04%。无醇杨梅果酒的有机酸主要是柠檬酸和L-苹果酸,占9种有机酸总量的96.96%。该发酵工艺获得的无醇杨梅果酒酒精度低(0.5%vol),花色苷含量达到155.1 mg/L,色泽呈紫红色,风味浓郁,较大程度地保持了杨梅原果清香。     

高产辅酶Q10类球红细菌的选育及发酵优化

辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ10)是一种淡黄色的脂溶性醌类,常见于动植物和微生物的细胞内膜中,是天然的抗氧化剂和细胞代谢激活剂。该研究以1株具有CoQ10生产能力的类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)为出发菌株,其在摇瓶水平上初始CoQ10产量为136.47 mg/L,通过常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma, ARTP)诱变和多孔板高通量筛选相结合的方法,确定了ARTP诱变处理的时间为120 s,致死率为90%。在孔板初筛阶段,从5 184株菌的突变菌库采用高通量筛选方法获得8株高产菌株,经过复筛得到1株CoQ10的高产突变菌株7p22,其摇瓶水平CoQ10产量达到158.44 mg/L,相比出发菌株提高了16.1%。验证其遗传稳定性后,进一步优化了碳源、前体物质、金属离子等,提高了辅酶Q10的产量。最后,在5 L发酵罐上对突变菌株进行培养条件的优化,CoQ10产量提高至1 640.6 mg/L。该研究所使用的结合筛选因子和Craven test检测法的高通量筛选方法可以实现简单、高效...