溶菌酶LyAa在黑曲霉中的高效表达与酶学性质分析

该研究探讨了将嗜碱顶孢霉中的GH25溶菌酶基因进行密码子优化后,构建包含糖化酶信号肽的溶菌酶单拷贝和双拷贝表达载体并均由启动子PnaⅡ控制表达,利用双拷贝表达载体和CRISPR/Cas9基因编辑工具,使用PEG介导法转化无孢黑曲霉宿主HL-1,获得高酶活力的溶菌酶表达菌株。重组菌株LyAa-C的溶菌酶活力达到2 291.37 U/mL,是仅使用双拷贝表达载体的LyAa-F菌株酶活力（869.74 U/mL）的2.63倍,是仅使用传统单拷贝表达载体的LyAa-T菌株酶活力（358.41 U/mL）的6.39倍。通过6×His标签使用镍柱亲和层析成功纯化了重组溶菌酶LyAa,并对其酶学性质进行了分析。溶菌酶LyAa蛋白大小约为25.0 ku,最适pH值为4.0,最适温度为30 ℃,并显示出良好的胃蛋白酶稳定性。综上,该研究基于双拷贝载体和CRISPR技术成功优化和提高了溶菌酶在黑曲霉中的表达。     

次氯酸钠、二氧化氯处理水厂排泥水试验研究

以南方地区某水厂排泥水为处理对象,分别用次氯酸钠、二氧化氯进行了小试。结果表明,次氯酸钠、二氧化氯对排泥水中的细菌、藻类有一定的去除效果,达到同期原水水平,但对水中剑水蚤的灭活效果不显著;同时,水中UV254出现明显的上升。     

降解核苷作用乳酸菌的筛选及其潜在降尿酸功能

为得到具有较高降血尿酸活性的特殊乳酸菌,首先基于高效液相色谱法筛选出具有降解肌苷和鸟苷等核苷类物质的乳酸菌,其中菌株LB1lac20具有最高的肌苷降解率（91.19%）和鸟苷降解率（89.67%）。基于16S rDNA序列进行BLAST比对,菌株LB1lac20被鉴定为短乳杆菌（Lactobacillus brevis）。为进一步分析菌株LB1lac20的潜在降尿酸作用,采用尿酸生成法建立体外模型,分析菌株LB1lac20对黄嘌呤氧化酶的抑制作用效果。结果表明菌株LB1lac20活菌悬液和胞内提取物最终对黄嘌呤氧化酶的抑制率分别达到了21.27%和19.60%（P＜0.05）。综上,本研究成功筛选出1 株具有高效核苷降解能力的短乳杆菌LB1lac20,并对黄嘌呤氧化酶具有明显的抑制作用,可以在不同方面发挥其潜在的降尿酸能力。本研究筛选获得的菌株可以作为一种潜在的降尿酸天然来源,为开发预防和治疗高尿酸血症药物提供理论基础和菌种资源。     

胶质芽孢杆菌葡萄糖磷酸变位酶基因的克隆、表达与酶学性质研究

胶质芽孢杆菌所产胞外多糖作为絮凝剂在食品工业废水处理方面比传统的工业絮凝剂具有更好应用效果而引起了广泛的关注。葡萄糖磷酸变位酶(PGM,EC5.4.2.2)能将葡萄糖-6-磷酸转变成葡萄糖-1-磷酸而被认为是多糖合成路径上的关键酶之一。本研究克隆获得来源于自胶质芽孢杆菌GIM1.16编码PGM的基因pgm。序列分析表明,该基因包含一个1710bp的读码框。在大肠杆菌中表达了pgm基因并纯化了重组蛋白,SDS-PAGE电泳结果显示重组的PGM分子量约为63kDa。重组的PGM最适反应温度为40℃,但当反应温度超过55℃时,PGM基本丧失活性,PGM在酸性(pH4~6)及碱性溶液(pH8.5~10)中均表现出低活性,其最适合反应pH值为7.5。PGM对底物葡萄糖-1-磷酸的Kcat和Km值分别为684min-1和0.24mM-1。本研究为胶质芽孢杆菌菌株的基因工程改造和代谢工程研究奠定了坚实基础。     

同位素稀释GC-MS/MS法测定火锅添加剂中3种氯丙醇

采用同位素内标法,建立气相色谱-三重串联四极杆质谱测定火锅添加剂产品中3种氯丙醇的分析方法。样品加入氯丙醇的同位素内标,采用改良层析柱法(玻璃注射器-真空抽气系统)进行净化,正己烷-乙醚(1:1,V/V)进行提取,固相萃取法浓缩和富集,三氟乙酸酐衍生,以HP-5 ms毛细管柱分离,串联四级杆质谱多反应监测模式检测,内标法定量。结果表明:采用本文的优化条件,用2种同位素内标(1,3-二氯-2-丙醇-d5和3-氯-1,2-丙二醇-d5)校正,可准确测定火锅添加剂产品中3种氯丙醇含量。在50~1000μg/L的范围内,方法线性良好,相关系数均可达0.999以上,方法回收率在82.5~104.0%之间,RSD小于5%。本方法灵敏、定量准确、衍生化试剂价廉易得,适用于火锅添加剂中3种氯丙醇的测定。     

食品中丙烯酰胺抑制策略的研究进展

丙烯酰胺（acrylamide，AM）是富含碳水化合物的食品发生美拉德反应而产生的一种有毒副产物，对人体的神经系统、免疫系统和遗传物质都有一定的毒性，此外还有潜在的致癌性。因此，检测以及控制食品中的AM含量至关重要。本文结合当前对AM的研究进展从加工食品生产的3 个主要阶段——农业生产阶段、预处理阶段和加工阶段阐述了多种AM抑制策略，并基于具体的抑制机理系统归纳了AM的控制措施，为抑制食品中AM的合成提供新思路。     

基于对抗生成网络的中国山水画自动生成模型

中国山水画是以山川自然景观为主要描写对象的画,它是中国画的重要画科。当前深度学习模型在图像分类、对象识别、图像风格转换和图像生成等领域都取得了巨大的成功。提出一个基于深度对抗生成网络的中国山水画自动生成模型,以网络上公开的中国山水画图像为训练集,设计适当深度的网络和损失函数,通过生成器和判别器的对抗训练,得到图像生成器。通过与真实的山水画进行比较,本模型能够生成具有接近中国山水画风格的图像。     

微电网能量管理和控制简述

首先介绍了微电网的概念和微电网的基本结构以及运行方式。其次,给出了微电网能量管理系统的定义,分析了其与传统大电网的不同,并提出了其3种控制结构。在分析比较3种控制结构的优缺点之后,介绍了微电网能量优化调度的模型和算法以及能量管理的频率和电压控制策略。最后,提出了今后微电网能量管理系统可能采用的方法和频率电压控制的研究方向。     

基于工作负荷均衡的车辆拯救设施选址

交通事故车辆的拯救设施选址是车辆拯救服务的重要问题,选址不当易造成车辆拯救行业服务效率低下、市场行业的不规范、利益不均等一系列问题。针对这类问题,分析了俱乐部和政府引导两种服务模式下的拯救设施选址特点,并提出了针对车辆拯救的工作负荷概念。在不确定性救援路径行程时间条件下,建立以负荷均衡为目标的车辆拯救设施选址模型,以提高设施站点的运营效率和实现车辆拯救企业间的利益平衡。采用三种染色体形式的混合编码和随机模拟方法,设计基于遗传优化的求解算法。最后,通过仿真实例验证了算法的有效性。     

面向多源采购的多级供应链优化配置方法

研究多源采购策略下的多级供应链优化配置问题。针对供应链各级备选供应商数量不确定、且可能大于2个这种问题研究较少的多源采购问题,引入供应商采购比例调控因子（SPCF）并提出基于ANP和TOPSIS的SPCF计算方法,同时以服务时间和实际采购比例为两个主要的决策变量,建立多阶段供应链优化配置模型。提出基于混合编码的改进遗传算法,并对模型求解。最终通过实例验证模型和算法的有效性,并对SPCF进行敏感性分析,得到重要的管理学启示。