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诺氟沙星单克隆抗体的制备及初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
采用优化的碳二亚胺法制备诺氟沙星(NOR)人工抗原,紫外扫描和红外光谱图表明人工抗原偶联成功。采用细胞融合技术筛选抗NOR单克隆抗体(NORmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备NORmAb,建立间接竞争ELISA(icELISA)标准曲线。结果表明,筛选的3株杂交瘤细胞分泌的抗体为IgG1亚型,具k轻链;建立的icELISA标准曲线在PBS中的的线性检测范围为0.04~43.6ng/mL,IC50值为0.62ng/mL,检测限(LOD)为0.02ng/mL;抗体与环丙沙星(87.2%)、培氟沙星(76.9%)、依诺沙星(66.8%)、恩诺沙星(48.6%)和洛美沙星(36.6%)有较高的交叉反应率;禽肉基质中NOR添加回收率满足检测要求。 相似文献
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目的:对从水开菲尔粒中分离得到1 株能产生抑菌物质的菌株QF01进行菌种鉴定,并对其产细菌素进行实验、鉴定和基因序列分析。方法:通过牛津杯法测定抑菌能力,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增16S rDNA和细菌素相关基因并测序,利用ProParam tool、TMHMM 2.0、InterProScan、SOPM和SWISS-MODEL在线软件对基因编码产物进行分析。结果:该菌株产的细菌素对大肠杆菌(Escherichia coli JM109)有明显的抑制作用,通过16S rDNA序列分析初步确定该菌株属于植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。该菌株含有plnD、plnEF、plnV、plnR四种基因,其中plnV基因编码产物有跨膜螺旋结构,其结构存在信号肽特征。此外,从三级结构的模型预测得到4?种基因的编码产物均存在α-螺旋、β-转角、伸展链和无规则卷曲。结论:从水开菲尔粒分离得到的L. plantarum QF01菌株,含有plnD、plnEF、plnV、plnR细菌素基因,对大肠杆菌有很好的抑制作用。 相似文献
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本文在pH6.5磷酸盐缓冲溶液中研究了热变性前后牛乳铁蛋白(bovine lactoferrin,LF)和α-乳白蛋白(α-lactalbumin,ALA)之间的自组装行为。采用ζ-电位、浊度法、动态光散射、光学显微镜、荧光光谱和红外色谱等方法进行表征。结果表明,与天然LF和ALA自组装复合物相比,热变性LF和ALA自组装复合物的ζ-电位较低。天然LF与ALA可以自组装可形成纳米颗粒,粒径最大为(35.24±0.82) nm;经过热变性的LF与ALA自组装形成超分子结构,通过调整ALA浓度,可以得到亚微米和微米颗粒,颗粒粒径最大为(4.11±0.14) μm。天然LF与ALA的复合物均为球状聚集体,分布均一;而热变性LF与ALA的复合物则为网状聚集体,分布不均一。ALA的添加增强了LF中色氨酸残基的疏水性。LF中的C=O和C-N基团均参与了与ALA25 ℃的相互作用。本研究为构建新型双蛋白自组装体及理解双蛋白组装机制提供了理论依据。 相似文献
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气相色谱法同时测定多糖中的中性糖、糖醛酸、氨基糖和唾液酸 总被引:2,自引:0,他引:2
采用甲醇解和硅烷衍生化,用气相色谱法同时测定样品中的中性糖、糖醛酸、N-乙酰氨基糖和唾液酸,取得了很好的效果。3种标准单糖混合物(包含阿拉伯糖、鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、N-乙酰半乳糖、N-乙酰葡萄糖、5-乙酰唾液酸)和2种多糖样品(豆腐渣多糖DFP、鸡腿菇多糖F32)用1 mol/L盐酸甲醇在85℃反应18~24 h,碳酸银中和,加入乙酸酐室温暗处反应24 h,使氨基糖重新引入N-乙酰基,除银盐,干燥,加入硅烷化试剂[V(吡啶)∶V(六甲基二硅氨烷)∶V(三甲基氯硅烷)=5∶1∶1),室温放置30 min,最后用气相色谱进行分析。 相似文献
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