肉类及蔬菜食品中EHEC O157污染分布及分型研究

为深入了解肉类及蔬菜中肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC O157)的污染分布规律和遗传多样性,随机采集全国18个城市的食品样品,参考GB/T 4789.36-2008方法进行样品处理,并用rfbE/fliCH7双重PCR对菌株进行鉴定;分别采用单重PCR和ERIC-PCR对菌株进行毒力基因(eae、hlyA、stx1和stx2)检测和分子分型。结果表明,414份样品中检出18份EHEC O157阳性样品,总污染率4.35%,其中生鲜肉12份,速冻肉6份,蔬菜未检出;经过生化、血清鉴定和双重PCR检测,鉴定出52株EHEC O157,包括29株O157:H7,3株O157:NM(fliCH7+,无动力),2株O157:NM(fliCH7-,无动力)和18株O157:hund(未确定H型);毒力基因检测结果发现,52株菌株中有50株携带毒力基因,其中40株(76.92%)携带eae,31株(59.62%)携带hlyA,20株(38.46%)携带stx1,24株(46.15%)携带stx2。ERIC-PCR分型结果表明,在相似系数为0.80时,菌株可分为12个聚类簇,F型为其主要基因簇,分离株的基因型呈现多样性。     

抗氧化剂及其增效剂对荔枝、龙眼和芒果原果汁的抗氧化作用研究

以热带水果荔枝、龙眼、芒果为研究对象,选取叔丁基羟基茴香醚（BHA）、没食子酸丙酯（PG）、特丁基对苯二酚（TBHQ）、二丁基羟基甲苯（BHT）及茶多酚等作为抗氧化剂,柠檬酸、苹果酸、磷酸、葡萄糖酸钙、EDTA等作为抗氧化增效剂,进行单体和复合抗氧化剂抗氧化试验。结果表明：对龙眼果汁的抗氧化能力从大到小排列为：TBHQ〉BHT〉茶多酚〉PG〉BHA;各种增效剂均可明显增加TBHQ的抗氧化能力,对龙眼果汁的抗氧化能力从大到小排列为：TBHQ＋苹果酸＋EDTA〉TBHQ＋苹果酸〉TBHQ＋柠檬酸〉TBHQ＋EDTA〉TBHQ＋磷酸〉TBHQ＋葡萄糖酸钙;TBHQ加入柠檬酸及EDTA增效后对荔枝、芒果原果汁的抗氧化效果理想,VC保存率均达到85%以上。     

野生虫草无性型分离株分子鉴定及遗传多样性的研究

虫草具有较高的食用与药用价值,本文以19株野生虫草分离株为研究材料,利用ITS引物进行PCR扩增、测序,并从Genbank上下载虫草属相关序列,构建系统发育树,并对19株虫草无性型分离物进行ERIC-PCR扩增,同时还检测了上述无性分离物发酵液中虫草素的含量。系统发育分析表明在分子水平上19株虫草的无性型分离菌株,都为蛹虫草(Cordyceps militaris)。与高雄山虫草(C.takaomontana)、蝉花(C.cicadae)、古尼虫草(C.gunnii)以及冬虫夏草(C.sinensis)平均遗传距离分别为0.1269、0.1228、0.2251和0.2354,在遗传距离上,与高雄山虫草和蝉花较近,与冬虫夏草较远。ERIC-PCR相似系数在0.8水平上,可以将19个蛹虫草菌株分为3组,相似系数在0.9水平上19株蛹虫草菌种可以分为8组。对蛹虫草发酵液中虫草素含量检测发现,所有蛹虫草无性型分离物发酵液都含有虫草素,最高的可达到126.33 mg/L,为现有的蛹虫草生产菌株JD的119倍。     

复合防腐剂对几种常见畜禽鱼肉的防腐效果研究

乳酸链球菌素（Nisin）、山梨酸钾、双乙酸钠和乳酸钠是常用的食品防腐剂。本文对乳酸链球菌素、山梨酸钾、双乙酸钠和乳酸钠进行复配,并对各单体防腐剂和组成的复配型防腐剂应用于常见新鲜肉类的抑菌效果进行了研究。确定防腐效果最佳的复合防腐剂配方后,通过测定各单体防腐剂和最佳配方复配型防腐剂对常见肉类中菌落总数和挥发性盐基氮的抑制效果,评价其防腐效果。结果显示,与各单体防腐剂相比较,该最佳配方复配型防腐剂能够较明显减缓常见新鲜肉类猪肉、牛肉、鸡肉和鱼肉中菌落总数和挥发性盐基氮的增长,延长新鲜肉类的保质期。     

小麦粉中偶氮甲酰胺的高效液相色谱法快速测定

建立用高效液相色谱(HPLC)测定小麦粉中的偶氮甲酰胺的测定方法.样品经丙酮超声振荡提取,高效液相色谱分离,紫外检测器定性定量.试验优化样品提取方法和色谱条件,色谱柱为Kromasil C18,5 μm,4.6mmx250mm;流动相A为10 mmol/L H2sO4水溶液和甲醇,采用梯度洗脱,进样量5 μL;检测波长245 nm;流速0.8 mL/min.相时标准偏差小于7.6,回收率在85%～87%之间,检出限为1.0ms/kg远低于国家标准45ms/ks的限量规定.本方法简单快捷.已应用于小麦粉中ADA的快速测定.     

长梗木霉ANU_3-958菌株原生质体诱变选育

本研究是以在食品工业生产中有较广泛应用前景的纤维素酶的产生菌──长梗木霉ANU_3－958为出发菌株，探讨用溶壁酶对菌丝体进行破壁，提取原生质体再用秋水仙碱进行诱变处理，再生后经多次筛选，从中选育出三株酶活较高的菌株，提高最多的与出发菌株相比，FP酶活提高77．2％，酶活达237．6mg／g.h；CMC酶活提高17．5％，酶活达2457mg／g.h。并有高峰期提前，产孢子较少的优点。     

GC-MS测定4类食品接触材料中多环芳烃类化合物的溶出暴露水平

建立了食品接触材料中16种多环芳烃类化合物溶出暴露的气相色谱质谱联用(GC-MS)分析方法。样品以异辛烷为模拟物,按实际使用情况进行模拟浸泡实验,所得浸泡液用GC-MS进行分析。结果表明,食品接触材料中4种多环芳烃类化合物(萘、菲、荧蒽和芘)存在一定程度的溶出暴露水平,检出率分别为萘24.3%、菲77.1%、荧蒽48.6%、芘44.3%。其中部分食品用容器多环芳烃的溶出水平最高达33545 ng/kg(萘)、46296 ng/kg(菲)、17739 ng/kg(荧蒽)、15594 ng/kg(芘),并发现常规项目蒸发残渣(正己烷)的溶出与多环芳烃的溶出存在一定的正相关关系。萘、菲、荧蒽、芘等四项多环芳烃的方法平均回收率为76.5%~100.7%,相对标准偏差为1.0%~3.5%,本研究方法具有较好的准确度和精密度。     

稀土元素 La 和 Ce 对小球藻生长的影响

本文以普通小球藻（Chlorella vulgaris）作为受试藻种,研究了硝酸镧和硝酸铈对其生长的影响,旨在探讨稀土化合物用于小球藻培养的方法和效果。具体实验包括：在藻类培养基中添加不同浓度的稀土硝酸盐,定时取样测定培养物光密度,绘制生长曲线并计算比生长速率（μ）,测定细胞密度最大时的干物质含量、叶绿素含量、类胡萝卜素含量以及可溶性糖含量。通过实验得出：10-3~10-6 mM的稀土元素在培养早期能够促进小球藻的细胞增殖,但随着培养时间延长促进作用减弱,比生长速率与对照组的差异逐渐缩小;10-3 mM La可将叶绿素a和b的含量分别提高24.46%和28.51%,10-4mM的Ce可将其分别提高50.76%和38.92%;此外,10-3mM La或Ce可分别将胞内可溶性糖含量提高13.83%和34.88%。上述研究表明：在藻类培养基中添加一定浓度的La或Ce,可以加快小球藻细 胞的早期增殖速度,缩短获得最大生物量的培养时间,同时还可提高叶绿素、类胡萝卜素以及可溶性糖的含量,但是两种稀土元素的效应浓度范围略有差异。     

壳聚糖复合生物防腐剂的抑菌效果研究

本实验研究了以壳聚糖及其金属锌螯合物为主复配的五个生物防腐剂配方以及配方中的主要组分在不同pH条件下的抑菌效果。研究选定的五种指示菌是大肠杆菌(Escherichia coli)8099、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)ATCC6538、枯草杆菌黑色变种(Bacillus subtilis)ATCC9372、白色念珠菌(Candida albicans)ATCC10231和黑曲霉(Aspergillus niger ATCC16404),采用平板培养计数法检测了从加入不同种类的菌悬液至含抑菌剂和培养基的试管中培养0、4、24、48、72和96h的活菌残留数,以活菌残留数的对数值随时间变化的趋势表示抑菌效果。结果表明:配方A、B、D、E在p H6.0以下可以抑制五种指示菌。配方A～E和单组份壳聚糖金属锌螯合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆菌的抑制效果好,而对羟基苯甲酸乙酯主要对枯草芽胞杆菌和黑曲霉的抑制较好,对其余三种菌的抑制效果较差,所有配方对白色念珠菌的抑菌效果较其它四种指示菌的抑制效果差,这是由于实验的起始菌悬液浓度较高造成的,同一配方在起始菌悬液浓度和作用pH值均低的情况下抑菌效果好。     

不同来源异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI)和脱氧木酮糖磷酸合成酶(DXS)对重组大肠杆菌番茄红素产量的影响

为获得更多异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)和脱氧木酮糖磷酸合成酶(1-deoxyxylulose-5-phosphate synthase,DXS)相关功能基因资源,本研究选取来源于大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、粘细菌(Myxococcus stipitatus)、戈壁奇球菌(Deinococcus gobiensis)的4种IDI和DXS,分别克隆到表达载体,将其与含有合成番茄红素基因的pTrc99aEBI质粒共同在大肠杆菌中进行异源表达。结果表明,来源于粘细菌的IDI和DXS可以获得最高的番茄红素产量,分别达到了10.86、7.94 mg/g DCW。协同表达经过密码子优化的IDI、DXS,番茄红素产量达到了15.26 mg/g DCW。本研究通过比较不同来源的IDI和DXS,获得了新的基因资源。