Quantitative imaging of green fluorescent protein in cultured cells: Comparison of microscopic techniques,use in fusion proteins and detection limits

To determine the application limits of green fluorescent protein (GFP) as a reporter gene or protein tag, we expressed GFP by itself and with fusion protein partners, and used three different imaging methods to identify GFP fluorescence. In conventional epifluorescence photomicroscopy, GFP expressed in cells could be distinguished as a bright green signal over a yellow-green autofluorescence background. In quantitative fluorescence microscopy, however, the GFP signal is contaminated by cellular autofluorescence. Improved separation of GFP signal from HeLa cell autofluorescence was achieved by the combination of confocal scanning laser microscopy using 488-nm excitation, a rapid cut-on dichroic mirror and a narrow-bandpass emission filter. Two-photon excitation of GFP fluorescence at the equivalent of ? 390 nm provided better absorption than did 488-nm excitation. This resulted in increased signal/background but also generated a different autofluorescence pattern and appeared to increase GFP photobleaching. Fluorescence spectra similar to those of GFP alone were observed when GFP was expressed as a fusion protein either with glutathione-S-transferase (GST) or with glucokinase. Furthermore, purified GST?GFP fusion protein displayed an extinction coefficient and quantum yield consistent with values previously reported for GFP alone. In HeLa cells, the cytoplasmic GFP concentration must be greater than ? 1 μM to allow quantifiable discrimination over autofluorescence. However, lower expression levels may be detectable if GFP is targeted to discrete subcellular compartments, such as the plasma membrane, organelles or nucleus.     

具有滞后非线性的汽车悬架系统中的混沌及控制

由于带有滞后非线性的汽车悬架系统中具有明显的非线性,这直接导致了系统存在分岔与混沌的可能性.为此分析了其在路面拟周期激励作用下发生受迫振动时的运动情况,揭示了该系统存在混沌现象,并利用比例微分控制器对其混沌行为进行了控制,数值模拟表明了该控制方法的有效性与可行性,可为汽车悬架系统的分析研究和优化设计提供理论依据.     

矩形脉冲激励红外热像无损检测技术探究

针对矩形脉冲激励红外热像无损检测技术的降温过程,本文通过合理的假设建立了被检物内热传导微分方程,求解出了热传导方程解析解,并通过实验验证了热传导微分方程及其解析解的合理性,为进一步研究降温过程矩形脉冲红外热像技术奠定了基础。此外,根据解析解研究了应用该技术过程中的热图处理方法,为该技术的实际运用提供了指导。     

ZASP玻璃荧光体的激发波长依赖性及Dy3＋掺杂的荧光色彩调谐

采用熔融法制备了锌铝锑磷酸盐(ZASP)玻璃荧光 体,研究了其荧光色彩对激发波长的依赖性和Dy³⁺掺杂的色彩调谐作用。短波紫外(U VC)和中波紫外(UVB)激发下,ZASP基质玻璃 呈现Sb³⁺的宽谱带发射,色彩位于蓝白光和蓝光区域。差异性光谱行为表明,玻璃中 存在异质 性的Sb³⁺发光中心,导致玻璃荧光对激发波长产生依赖行为。Dy³⁺引入ZASP玻 璃后,产生归属 于Dy³⁺的约484nm波长窄带发 射,其在UVC和UVB激发下的发光有效性相当程度上归因于Sb ³⁺到Dy³⁺的能量传递。Dy³⁺的暖色成分使ZASP玻璃荧光总体上从蓝白区 向白光区移动,同时 也对荧光的激发波长依赖趋势产生显著影响,丰富了荧光发射色彩的多样性,为高质量荧光 器件的研发提供了可能。     

褐煤中腐植酸活化实验研究

对5种不同组成的褐煤分别用NaOH、Na_2CO_3和KOH 3种固体碱进行腐植酸活化实验,并对比不同pH时的活化率。实验结果表明:用NaOH作活化剂时活化效果较好;控制反应pH10时,褐煤中腐植酸活化率95%;在此条件下,当褐煤中钙镁总质量分数小于2.5%时,腐植酸活化率不受原料影响。     

单轨车辆耦合动力学模型与振动响应特性

为了研究单轨车辆在设计车速范围内的振动响应特性,进而评价单轨车辆运行平稳性与舒适性能,分析了单轨车辆走行轮、导向轮、稳定轮和转向架中央牵引装置及车体间的拓扑关系,利用Hamilton方程构建了包含走行轮与轨道梁顶部,导向轮、稳定轮与轨道梁侧部等三向轮轨接触对的单轨车辆空间耦合系统动力学模型,并对单轨的PC轨道梁走行面及轨道梁左、右两侧部轨面的不平度进行了数值模拟。基于空间耦合动力学模型,以轨道不平度为激励源,设定车辆以某一恒定速度在直线轨道上运行,获取了单轨车辆的振动响应特性,并与实车测试结果对比分析,验证了单轨空间耦合动力学模型的正确性。在此基础之上,获取了单轨车辆不同设计车速下的振动响应特性,对单轨车辆的运行平稳性和舒适性进行了评价。结果表明,单轨车辆的舒适性能优良,运行平稳性能处于优秀等级。     

考虑岩土介质随机特性的工程场地地震动随机场分析

将随机结构正交展开理论和随机振动分析的虚拟激励原理运用于场地波动有限元分析,形成了一种可以考虑岩土介质随机特性对工程场地地震动相干函数影响的分析方法。实例分析表明,场地介质随机特性将在场地卓越频率附近显著降低迟滞相干函数值,在进行工程场地地震动随机场研究时应当考虑场地介质随机特性的影响。     

额定频率60 Hz异步电机在50 Hz电网中的性能变化

针对电机过热而不能正常运行的现象，利用电动机简化电路、电磁学、电机设计有关知识，分析60Hz、380／220V三相异步电机在50Hz、380／220V电网中电机的励磁、损耗、温升等的变化，以期电机正常工作。     

CFBC固硫灰地质聚合物强度性能研究

100%以CFBC(Circulating Fluidized Bed Combustion)固硫灰为胶凝材料,采用碱激发方法,选取水玻璃模数、激发剂含碱量、养护温度、养护时间和碱液陈化温度等为变量,系统研究了其对CFBC固硫灰地质聚合物砂浆试块强度性能的影响。结果表明当水玻璃模数为1,养护温度60℃,养护时间3 h,陈化温度为50℃时,砂浆块的抗压强度最高。     

一种新型电力系统稳定器模型研究

针对电力系统低频振荡问题,本文提出一种新型低频段抑制增强的电力系统稳定器模型。该模型基于发电机机械运动模型,转速变化量经微分环节相位超前,加速功率变化量相位超前Δω轴90°,解决了PSS2B相位补偿主要为超前环节而造成的低频段增益小于高频段的问题。RTDS试验证明,该模型能够增强低频段系统阻尼,提高低频段有功振荡的抑制效果。