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991.
白细胞介素-10基因多拷贝表达盒的构建及在毕赤酵母中的表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的构建白细胞介素-10(IL-10)基因多拷贝表达盒,提高IL-10在毕赤酵母中的表达水平。方法体外构建重组表达载体αIL-10/pAO815,BamHⅠ和BglⅡ双酶切获得目的基因表达盒(AOX-αIL-10),再连接到BglⅡ酶切位点处,依次构建多拷贝重组载体n(AOX-αIL-10)/pAO815。从质粒pPIC9K上用NdeⅠ和SalⅠ双酶切获得Kan抗性基因,重组到多拷贝表达载体n(AOX-αIL-10)/pAO815上。重组载体n(AOX-αIL-10)/pAO815电转化毕赤酵母,PCR筛选含有IL-10基因的酵母转化子,甲醇诱导表达,对表达量高的转化子再次经重组载体n(AOX-αIL-10)/pAO815-Kan电转化,高浓度G418抗性筛选二次酵母转化子,使用甲醇诱导表达。ELISA测定IL-10含量,MC/9细胞测定IL-10活性。结果所构建的8拷贝表达盒的重组载体8(AOX-αIL-10)/pAO815和4拷贝表达盒4(AOX-αIL-10)/pAO815-Kan,转化子分泌表达IL-10水平最高,为(8.25±1.65)mg/L,比活性为1.465×105U/mg。结论已成功构建了高拷贝表达盒,并提高了IL-10在毕赤酵母中的表达水平。 相似文献
992.
RT-PCR法检测庚型肝炎病毒C(GBV-C)RNA 总被引:2,自引:0,他引:2
应用RT-PCR法在非甲~非戊型肝炎患者血清及单采浆站供血员血浆中检测到GBV-CRNA,扩增产物经序列测定进一步确证,在30例非甲~非戊型肝炎患者中阳性率为6.6%;在600例单采浆供血者血浆中阳性率为0.33%。提示GBV-C可能不是非甲~非戊型肝炎的主要致病因子,可能存在GBV-C健康携带者。 相似文献
993.
994.
995.
AlON-TiN复相材料的合成及工艺优化 总被引:2,自引:0,他引:2
在对Ti—Al-O-N体系热力学分析的基础上合成了AlON—TiN复相材料,XRD,TEM分析与观测结果证实了热力学分析的可靠性。运用人工神经元网络(artificial neural networks,ANN)对合成AlON—TiN的工艺参数进行了训练,训练结果良好,神经网络的预测值和实测值一致;遗传算法(genetic algorithm,GA)寻优得到最佳工艺参数:烧结温度为1830℃,保温2.45h,TiN的含量为15%(质量分数)。对遗传算法寻优结果进行了单因素分析,随着TiN含量的增加,强度增加,而随烧结温度和保温时间的增加,强度先增加后减小。 相似文献
996.
997.
甲磺酸伊马替尼的合成 总被引:3,自引:0,他引:3
以4-甲基-3-硝基苯胺为起始原料,经过缩合、还原、环合等反应制得抗肿瘤药物甲磺酸伊马替尼。并分别讨论了采用无水碳酸钾代替二异丙基乙胺、水合肼和普通催化剂代替铂炭催化剂以及采用异戊醇作为溶剂的优点。最终反应总收率超过50%,用高效液相色谱分析产品纯度在99.5%以上。 相似文献
998.
制备了HDI(1,6-己二异氰酸酯)型聚酯聚氨酯/聚(甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸-β羟乙酯)(HDI-PU/P(MMA-HEMA))互穿网络胶粘剂,研究了接枝剂甲基丙烯酸-β羟乙酯(HEMA)用量对其形态、性能与分子结构的影响。结果表明,接枝剂HEMA可使分散相接枝到连续相中形成复合网络,从而改善其界面的相容性,提高其胶液粘度和初粘力,并可广泛作为制鞋工业用胶。 相似文献
999.
水、能源和粮食为可持续发展的基础性资源,如何从时空角度全面评价长江经济带水-能源-粮食系统的耦合协调发展是促进区域资源可持续发展的重要前提。以水、能源、粮食以及共生单元水能、水粮和能粮系统为单元,构建水-能源-粮食系统耦合协调评价指标体系,采用熵值法对各系统指标赋权,运用耦合协调度模型和空间自相关分析对2010—2019年长江经济带的水-能源-粮食系统协调发展和时空动态特征进行定量研究。结果表明:2010—2019年长江经济带水-能源-粮食系统综合评价指数整体呈缓慢增长趋势,其中水系统对水-能源-粮食系统综合评价指数贡献最大,年均贡献占比为21.57%;能源系统贡献最小,占比为11.95%; 2010—2019年长江经济带水-能源-粮食系统耦合协调水平呈先升后降趋势,其中四川省上升幅度为5.05%,重庆市下降幅度为2.83%,且存在显著的空间异质性,上游地区明显高于中下游地区。其中能源资源是水-能源-粮食系统耦合协调发展的短板;长江经济带水-能源-粮食系统耦合协调度表现出显著空间关联性,高-高集聚区集中在长江上游地区,下游地区主要以低-低集聚区为主。长江经济带内各省市应因地制宜地完善资源管理机制,推动长江经济带资源可持续发展。 相似文献
1000.