血红蛋白类红细胞代用品理化性质的色谱分析

目的 建立血红蛋白类红细胞代用品的色谱分析方法。方法 通过高效液相系统与二极管矩阵检测器、多角度激光散射检测器和蒸发光散射检测器进行组合,检测聚乙二醇(PEG)化牛血红蛋白(PEG-bHb)的色谱纯度、相对分子质量分布和磷脂含量。结果 PEG-bHb为多位点不均一修饰的混合物,数均相对分子质量为1.211×10~5,重均相对分子质量为1.347×10~5,残余磷脂含量低于1μg/ml。结论 色谱分析方法是进行血红蛋白类红细胞代用品理化性质分析的适宜方法。     

膨胀床吸附高效纯化牛血红蛋白

探索了将膨胀床吸附层析应用于动物血液蛋白质的提取,尝试了直接从牛血红细胞破碎液中纯化血红蛋白.对该过程采用的吸附介质及pH值、离子强度、温度、洗脱条件等因素对高铁血红蛋白生成、产品纯度以及回收率等的影响进行探索.选择了最佳吸附介质Streamline SP,确定了优化的吸附条件为：吸附过程选用离子强度为10mmol•L^-1的磷酸盐缓冲系统,进料线流速3.3cm•min^-1,进料pH值6.6,改变缓冲液pH值为7.2进行洗脱,操作温度4℃.该技术省去了离心去除碎片步骤,有效地控制了纯化过程中无载氧能力的高铁血红蛋白的生成,动态吸附容量达到70～75mg•ml^-1,只经一步操作产品纯度达电泳纯,高铁血红蛋白含量仅为5.4％.与现有的膜过滤-层析纯化方法相比,膨胀床吸附法操作时间短,提取收率高,产品活性损失小,是一种简捷、高效、适合工业放大的天然血红蛋白制备方法.     

牛血红蛋白催化罗丹明6G褪色光度法测定过氧化氢

基于牛血红蛋白(Hb)具有模拟过氧化氢酶的催化特性,建立了一种催化褪色光度法测定H2O2的新方法.研究了pH值、KI、Hb、罗丹明6G用量及常见离子等因素对体系的影响.在526nm处,H2O2的浓度在9.72×10-7～1.94×10-5mol/L范围内与吸光度降低值呈良好的线性关系,相关系数为0.9923,方法的检出...     

形象逼真 神态活跃——工艺美术中牛的造型艺术

在工艺美术作品中，牛是重要的创作题材。牛的绘画起源是动物图腾崇拜。景德镇陶瓷中牛的雕塑造型和瓷画上的艺术装饰体现了牛的忠厚、诚恳和无私奉献精神，显示出生动的形态，给人们以深刻的启示。     

应用ELISA竞争法检测疫苗制品中残余的牛血清白蛋白

目的 应用ELISA 竞争（cELISA）法检测残余牛血清白蛋白（ESA）。方法 以BSA免疫家兔，获得高滴度的抗BSA血清；以BSA包被酶标板作为固相抗原，以梯度稀释的BSA为游离抗原，二者竞争结合抗体，以游离抗原浓度对数作为横坐标，相应吸收值为纵坐标作标准曲线，由对应样品的吸收值，可以求得样品中BSA含量。结果 当检测200、50、20和5ng/ml样品时，其试验内变异系数分别为4．5％、7．8％、5．8％和 14％，试验间变异系数分别为3．4％、8．8％、3.3％和30％。本试验还证明人血清白蛋白与牛血清白蛋白的交叉反应较低。结论cELISA可初步用于疫苗中残余BSA含量的检测。     

牛Ⅱ型链球菌van B2蛋白的原核表达及纯化

目的原核表达并纯化牛Ⅱ型链球菌(Streptococcus bovis biotypeⅡ)van B2蛋白。方法采用PCR法从牛Ⅱ型链球菌基因组DNA中扩增van B2基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-van B2,转化大肠杆菌Rossata(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经Ni柱亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE及Westernblot分析。结果 PCR扩增获得597 bp的van B2基因片段;重组表达质粒pET-28a-van B2经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组van B2蛋白相对分子质量约为29 000,主要以可溶性形式表达;纯化的重组蛋白纯度为70%,可被小鼠抗牛链球菌血清Ⅱ型多克隆抗体特异性识别。结论原核表达并纯化了牛Ⅱ型链球菌van B2蛋白,为van B2基因的耐药性研究奠定了物质基础。     

易更新磁性碳纳米管修饰电极对白蛋白的测定

自制了更新方便的磁性碳纳米管修饰电极,考察了该磁性电极在H2SO4-Kcl介质中的还原性以及峰电流的影响因素并成功用于牛白蛋白的测定。实验结果表明,电极反应受吸附控制;在-0．45V条件下,牛白蛋白在4-150pg·mL-1范围内与峰电流成反比,检出限为1．2pg·mL-1,并对反应机理进行探讨,电极反应受吸附控制,电极反应常数和电子转移常数分别为4．6s-1和0．19。     

零流电位法研究孔雀石绿与牛血清白蛋白相互作用的结合参数

用一种新的电化学方法一零流电位法（zelocurrentpotentiometry）研究了铅笔芯电极表面的孔雀石绿膜与牛血清白蛋白（BSA）相互作用。在浓度为4×10^-7～4×10^-8mol·L^-1的牛血清白蛋白溶液中,孔雀石绿的零流电位值Ezcp与牛血清白蛋白浓度的对数细[BsA]符合下列线性关系：Escp（V）=O．1424＋0．012log[BSA]（R=0．992,n=5）。由此计算出孔雀石绿与牛血清白蛋白的表观结合常数β为（2．5±1）×10^4L·mol^-1,结合比m为0．8±O．2。     

以草甘膦,马拉·毒死蜱为模型研究有机磷农药与牛血清白蛋白的相互作用

利用了荧光发射光谱,同步荧光光谱,紫外吸收光谱进行了检测,研究有机磷农药(草甘膦和马拉硫磷)与牛血清白蛋白的相互作用,实验结果表明了有机磷农药对牛血清白蛋白有着明显的荧光猝灭作用,且方式为静态猝灭(BSA荧光分子与猝灭剂有机磷农药之间通过弱的结合生成复合物,该复合物会使得荧光完全猝灭的现象)为主。通过实验得出有机磷与牛血清白蛋白的结合位点数(n),与结合常数(K0)。     

灭能与未灭能新生牛血清培养细胞效果的比较

目的比较灭能与未灭能新生牛血清培养Vero细胞和MRC-5细胞的效果,为细胞培养的相关研究和生产提供参考。方法分别采用照射剂量为8和16 k Gy的60Coγ-射线及56℃30 min加热灭能新生牛血清,用两种方式灭能的血清及未灭能的新生牛血清培养Vero细胞和MRC-5细胞,显微镜观察细胞的生长情况,计数并计算细胞倍增时间及存活时间。结果未灭能新生牛血清培养的两种细胞增殖更多更快速;热灭能的新生牛血清培养的两种细胞的增殖速度和数量明显低于γ-射线照射灭能及未灭能血清培养的细胞。结论未灭能的新生牛血清比灭能后的血清培养Vero细胞和MRC-5细胞的效果好,其促细胞生长增殖效果最佳。