酶法分离制备γ-氨基丁酸和L-天冬氨酸

以L-谷氨酸(L-G lu)和L-天冬氨酸(L-Asp)两种混合酸性氨基酸〔m(L-G lu)∶m(L-Asp)=1∶1〕为原料,利用大肠杆菌菌体内脱羧酶对L-谷氨酸的专一脱羧作用,酶法分离制备了γ-氨基丁酸和L-天冬氨酸。考察了转化体系温度、pH等影响L-谷氨酸脱羧酶活力的主要因素,实验表明,最佳工艺条件为:温度35℃,转化体系pH=5.0,ρ(菌体)=6 g/L,ρ(Tween80)=0.15 g/L,菌龄16 h,ρ(底物)=60 g/L。L-谷氨酸脱羧酶在最适转化条件下比酶活高达15 036 U。1 g湿菌体可重复使用3次共转化L-谷氨酸和L-天冬氨酸混合物30 g,其中L-谷氨酸完全转化为γ-氨基丁酸。γ-氨基丁酸及L-天冬氨酸的总收率可分别达到理论收率的88%和90%。     

枯草芽孢杆菌Dg5041液体发酵生产γ-聚谷氨酸

以枯草芽孢杆菌Dg5041为生产菌,对其摇瓶发酵生产γ–聚谷氨酸(γ-PGA)的工艺进行研究,通过单因素实验和正交实验获得了该菌的优化培养条件。优化的培养基组成为:葡萄糖35 g/L,酵母膏10 g/L,谷氨酸钠40 g/L,MgSO41.0 g/L,K2HPO4 2.0 g/L,MnSO40.5 g/L,pH 7.0,250 mL锥形瓶装液量50 mL。菌种在37℃,120 r/min培养24 h加入5%NaCl后继续培养24 h,γ-PGA产量达到18.54 g/L。研究结果表明,枯草芽孢杆菌Dg5041是一株很有潜力的γ-PGA高产菌。     

基于实验设计的L-谷氨酸连续结晶过程优化

对于采用连续振荡挡板式结晶器进行β型L-谷氨酸的冷却结晶,提出一种基于实验设计的晶体产品尺寸分布预测模型和过程操作条件优化方法。将连续管式结晶器的振荡频率、2个区段的降温速率作为操作变量,设计一个包含3因素3水平的响应面实验方案。通过检测不同实验条件下的晶体产品弦长分布,构建一个基于双层基函数的晶体产品尺寸分布预测模型。然后引入一个关于目标晶体尺寸分布和产品收率的目标函数,并且利用上述预测模型,建立一个优化过程操作条件的方法。通过对β型L-谷氨酸冷却结晶过程的仿真和实验,验证了该方法的有效性和优点。     

镧谷氨酸咪唑配合物的合成、表征及荧光性质

在蒸馏水介质中通过La( ClO4)3·nH2O与L-谷氨酸以及咪唑合成了一个新三元配合物[La( C5H9NO4)3-( C3 H4 N2)](ClO4)3·3H2O.通过元素分析、摩尔电导、红外光谱、紫外光谱对配合物进行了表征,确定了其组成.通过TG-DTG测定进一步研究了配合物的配位行为及热稳定性.测定了配合物水...     

火焰原子吸收法间接测定调味品中的谷氨酸

用Ｃｕ３（ＰＯ４）２悬浮液同谷氨酸作用,生成溶于水的谷氨酸铜络合物,离心沉降未反应的铜盐,以原子吸收法测定上层清液中铜的信号,可间接测定谷氨酸的量。方法的线性范围为０～４００ｕｇ／ｍＬ,特征浓度为０．０４９ｕｇ／ｍＬ,检出限为０．０２２ｕｇ／ｍＬ。本方法应用于调品中谷氨酸的测定,相对标准念头为０．８％,回收率为９６．６％～１０２．１％之间。     

信号肽及发酵条件优化促进胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中分泌表达

胶原蛋白独特的三股螺旋结构,使其具有良好的力学性能和生物相容性,在生物医学材料等方面有广泛应用。利用微生物表达重组胶原蛋白,具有发酵周期短、成本低、便于遗传操作等优点,近些年发展迅速,但分泌带有三股螺旋结构的重组胶原蛋白仍是研究的难点。该研究以来源于化脓性链球菌的胶原蛋白V-B为对象,搭建了谷氨酸棒杆菌分泌表达重组胶原蛋白的平台。在重组胶原蛋白V-B前端引入6种不同信号肽(CspB、PorB、Cg1514、CgR0949、Cg2052或TorA),构建重组表达载体,并转入食品级表达宿主谷氨酸棒状杆菌Corynebacterium glutamicum ATCC 13032中,结果显示PorB信号肽介导的分泌效果最好。此外,对PorB信号肽介导的分泌表达进行培养基、起始诱导菌浓度、诱导时长、IPTG浓度、溶氧的优化,最终胶原域B在摇瓶水平产量达到30 mg/L,是优化前的3倍,并通过圆二色谱表征,验证其正确折叠为三股螺旋。该研究为重组胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中的高效分泌表达奠定了基础。     

影响谷氨酸发酵种子质量的主要因素有哪些？

谷氨酸发酵过程中影响种子质量的主要因素有：（1）培养基构成种子培养基要求含有丰富的氮源，足够的生物素，少量的碳源，以利菌体生长，如果糖份过多，菌体代谢活动旺盛，产生有机酸，使pH值降低，菌种容易衰老。     

谷氨酸发酵过程污染噬菌体的处理

发酵污染噬菌体，最佳处理方法是把发酵液压出发酵罐，配入2／3无机盐生物素按原量配入，进行重新灭菌，再接入种子，这种处理方法成功率100％，效果最佳。     

筛选谷氨酸产生菌应怎样采样

采样要注意针对性，要收集那些我们所要寻找的有可能存在的微生物样品。往往微生物的某些生理特征可以为样品的采集提供线索，谷氨酸产生菌一般都是好气性的腐生菌，根据现有的谷氨酸菌种筛选来源分析，从淀粉厂、酱油厂、食品厂以及动物园、植物园、森林田园等土壤或污泥中采集样品，找到所需要的微生物样品可能性较大。因为这些地方的土壤含有机质丰富，是微生物生长繁殖的良好环境。     

何谓温度敏感型突变株？利用温度敏感型突变株进行谷氨酸发酵时，影响产酸的关键是什么？

在正常培养温度下，菌体生长良好，当温度提高到一定程度时（如30℃提高到40％），停止生长，而只产酸，具有这种特性的菌株就称为温度敏感型突变株。谷氨酸温度敏感型突变株的位置是发生在决定与谷氨酸分泌有密切关系的细胞膜结构的基因上，发生碱基的转换或颠换，一个碱基为另一个碱基所置换，这样为基因所指导释出的酶，在高温下失活，导致细胞膜某些结构的改变。