谷氨酸棒杆菌的氨基酸输送系统的存在、功能及其在氨基酸生产上的重要性

主要介绍了谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)中各种氨基酸输送系统及其基因、底物、特性和在氨基酸生产上的应用.     

谷氨酸发酵液预处理方法的研究

本文对用壳聚糖絮凝谷氨酸发酵液进行了研究，讨论了ｐＨ值，絮凝剂浓度，温度和搅拌时间对絮凝效果的影响，其最佳结果是：壳聚糖用量度１００ｐｐｍ，ｐＨ５—６，３０—６０℃，搅拌１５ｍｉｎ。     

聚氨基酸类水凝胶的研究进展

聚氨基酸具有类似于蛋白质的酰胺键结构,是一种生物相容性好且可降解的高分子材料。目前研究最多的聚氨基酸主要有酸性聚氨基酸(聚谷氨酸、聚天冬氨酸)和碱性氨基酸(聚赖氨酸)。从单组份聚氨基酸类水凝胶、复合聚氨基酸类水凝胶以及聚氨基酸类水凝胶的应用三个方面对聚氨基酸类水凝胶作了简要综述。     

黏度法测定γ-聚谷氨酸含量

采用乌氏黏度计测定了不同浓度下γ-聚谷氨酸稀溶液的黏度,由哈金斯(Huggins)方程和克拉默(Kraemer)方程结合外推法求得室温下γ-聚谷氨酸在中性水溶液中的特性黏度[η]为7.830 L/g,并推导出由溶液的相对黏度ηr与增比黏度ηsp计算γ-聚谷氨酸溶液浓度的公式。依据溶液黏度与浓度的关系,可以简便、快速、准确地估算出γ-聚谷氨酸的浓度。     

巨大芽孢杆菌谷氨酸脱羧酶的表达及其酶活性研究

谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)能够催化L-谷氨酸(盐)脱羧反应生成γ-氨基丁酸,它是微生物发酵法生产γ-氨基丁酸的关键酶,具有很高的工业应用价值。本文将来源于巨大芽孢杆菌的谷氨酸脱羧酶(Bm Gad)经克隆至表达载体pET21b后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,并采用亲和层析的方法将该酶纯化后,用比色法测定该酶的酶活性。结果表明,BmGad克隆表达后,采用SDS-PAGE分析可知其相对分子质量约为5.3×10~4 Da。重组蛋白经亲和纯化后,该酶的最适温度为50℃,酶活性达到153U/mg;最适p H为5,酶活性为151 U/mg,在偏中性环境中比较稳定,适合于工业化生产的应用。     

代谢工程改造Corynebacterium glutamicum生产L-苹果酸

以提高L-苹果酸的产量为目标,采用一次交换两次同源重组的方法,利用反向筛选标记,在敲除了丙酮酸醌氧化还原酶编码基因(pqo),丙酮酸脱氢酶编码基因(pdh)和乳酸脱氢酶编码基因(lldh)的C.glutamicumΔpqoΔpdhΔlldh(C.glutamicumΔPPL)基础上,无痕敲除了L-苹果酸积累支流代谢途径的2个关键酶基因:苹果酸醌氧化还原酶编码基因(mqo)和苹果酸酶编码基因(male),同时敲入了苹果酸分泌转运蛋白基因(transb),获得了产L-苹果酸的工程菌株;采用高效液相色谱法检测了工程菌株C.glutamicumΔPPLΔmqo::transbΔmale的发酵产物。实验结果表明:C.glutamicum ATCC 13032发酵后不积累L-苹果酸,而工程菌C.glutamicumΔPPLΔmqo::transbΔmale发酵48 h,积累了12.8 g/L的L-苹果酸,工程菌的糖酸转化率为33.18%,为利用C.glutamicum ATCC 13032发酵生产L-苹果酸提供了基础遗传资源。     

谷氨酸生产菌具有哪些主要特证？

现有谷氨酸生产菌主要有下列特征：（1）细胞形态棒状、椭圆、短杆,都是极为相似的棒杆菌、短杆菌和小杆菌;（2）革兰氏阳性,无芽孢,不运动;     

谷氨酸棒状杆菌成分分析及其酸水解条件研究

对废弃的谷氨酸棒状杆菌成分进行分析,评估其作为培养基用有机氮添加物质的可能性。测定结果表明:谷氨酸棒状杆菌中粗蛋白含量74%,核酸含量6.53%,粗脂肪含量11.36%,灰分含量2.78%,营养成分比较丰富,具有较高的开发利用价值。通过正交实验得到酸水解谷氨酸棒状杆菌的最佳条件为:pH 0.5、水解温度115℃、菌体浓度15 g/100 mL、水解时间20 h。在上述条件下菌体蛋白水解度(DH)达到88.37%。     

谷氨酸棒杆菌argB基因的克隆及其在大肠杆菌中表达的初步研究

根据GenBank报道的谷氨酸棒杆菌ATCC 13032序列，设计并合成一对引物，利用温度梯度PCR仪，获得了argB基因全长。将其克隆到pGEM-T-Easy载体中，经测序鉴定后定向克隆至表达载体pGEX-4T-1中，构建了pGEX-argB表达质粒。     

谷氨酸发酵分批补料动力学模型的构建

根据已建立的谷氨酸发酵数学模型,应用MATLAB软件对模型进行最优参数估计和非线性曲线拟合,得到的结果相对误差较小,全局收敛性最小。通过与实际发酵过程比较,较好地反映了谷氨酸生物素缺陷型菌株GDK-9的分批补料发酵过程。