超高效液相色谱-串联质谱法测定大豆中异黄酮素含量

目的 以染料木黄酮、大豆苷元和黄豆黄素的含量为指标,建立超高效液相色谱-串联质谱测定大豆中异黄酮素总量的方法。方法 样品用乙醇-水(3+1,V/V)提取,经过β-葡萄糖苷酶水解后,用Acquity UPLC?BEH C18柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm)分离,以甲醇和0.1%甲酸溶液(含5 mmol/L乙酸铵)作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾负离子模式(ESI-)电离,多反应监测模式进行检测。结果 染料木黄酮、大豆苷元在5.0～500μg/L范围内线性关系良好(r>0.995),方法的检出限分别为2.7、4.0 mg/kg,在300.0、600.0、1 200 mg/kg添加水平的平均回收率为89.4%～102.2%,相对标准偏差(n=6)为1.5%～4.6%;黄豆黄素在0.5～50.0μg/L范围内线性关系良好(r>0.995),方法的检出限为0.6 mg/kg,在30.0、60.0、120.0 mg/kg添加水平的平均回收率为85.7%～104.0%,相对标准偏差(n=6)为1.3%～2.8%。结论 该方法简单、灵敏、准确可靠,适用于大豆中异黄酮素含量的测定...     

Characterization of Soybean Kapi During Fermentation with Bacillus spp.

The changes in enzymatic activities, aroma profiles, color development, phenolic content (including isoflavones), and radical scavenging properties during fermentation to produce soybean kapi condiment using two isolates of Bacillus subtilis IS4 (IS4) and B. amyloliquefaciens RY1 (RY1) are reported. The activities of three hydrolytic enzymes (β-glucosidase, α-amylase, and protease) from both strains showed similar change patterns; the highest activities were observed during days 2–4 of fermentation. With respect to volatile compound formation, the common dominant volatile compounds found in both IS4 and RY1 fermented samples were aldehydes and N-containing compounds. However, IS4 also contained acids and esters as dominant compounds, while RY1 also contained alcohols as dominant compounds. Moreover, the change of Hunter color (increase in a*- and b*- value and decrease in L*-value) appeared to be coincidental with the development of browning and the increase in fluorescence intensity in all samples of IS4 and RY1. In addition, the fermented samples had significant increase (P<0.05) of phenolic content as well as DPPH radical scavenging activity, which was well correlated. Although the content of glucoside isoflavone (daidzin and genistin) and aglycone isoflavone (daidzein and genistein) increased in the early stage of fermentation and dramatically decreased thereafter in both strains, their derivatives may possess antioxidant activity. These results show the potential of the individual B. subtilis strains IS4 and B. amyloliquefaciens RY1 as functional starter cultures for the enrichment of the antioxidant and free-radical scavenging activity in soybean kapi.     

大豆异黄酮复合胶囊的毒理学安全评价

本研究依据食品安全性毒理学评价程序和方法对大豆异黄酮复合胶囊进行30 d大鼠喂养实验,各剂量组(166.7、333.3、666.7mg/kg.bw)对大鼠一般生理体症、行为、大便、皮毛等均未见异常。各剂量组体重、食物利用率、血液常规、脏器系数与对照组比较无显著性意义(P>0.05),血液生化指标(丙氨基酸氨基转移酶、总草转氨酶、尿素氮、肌酐、总蛋白、白蛋白、血糖、总胆固醇和甘油三酯)无显著性意义(P>0.05);各剂量组大鼠主要脏器病理检查结果大致相同,未见特殊病理改变。小鼠抗氧化试验各剂量组(67.0、133.0、200.0 mg/kg.bw)血清MDA含量(6.73±1.14、6.48±0.77、5.99±0.80 nmol/mL)显著低于老龄对照组(7.13±1.16nmol/mL),红细胞SOD活力(6.49±0.41、6.74±0.50、7.22±0.34×103Nu/mL)显著高于老龄对照组(6.29±0.88×103Nu/mL)。因此,在本实验条件下,大豆异黄酮复合胶囊是安全且具有抗氧化功效的。     

UV-B辐照下大豆发芽富集异黄酮品种筛选及发芽动力学

以天骄（TJ）、苏青1号（SQ1）、苏青3号（SQ3）和95-优1（95Y1）4 个品种的大豆为原材料,在中波紫外光（ultraviolet radiation B,UV-B）辐照条件下,进行发芽实验,以发芽5 d后大豆异黄酮含量及其关键酶活力为主要指标,并综合分析生理生化指标,筛选出富集大豆异黄酮的最适合品种。结果表明：发芽的天骄大豆异黄酮含量、苯丙氨酸解氨酶（phenylalnine ammonialyase,PAL）和查耳酮合酶（chalcone synthase,CHS）活力最大,豆芽质量良好,发芽率、芽长、呼吸强度、游离氨基酸和还原糖含量都显著高于其余品种,故天骄大豆籽粒是发芽富集异黄酮的良好品种。以天骄为原料,对其进行发芽动力学实验。结果表明：随着发芽时间的延长,异黄酮含量显著增加,第7天为发芽前的3.02 倍,PAL活力显著上升,CHS活力先上升后下降。大豆中可溶性蛋白等大分子物质含量呈减少趋势,游离氨基酸等小分子物质含量逐渐增加。本实验筛选出天骄为UV-B辐照条件下富集大豆异黄酮的最适品种。     

大豆异黄酮对良性前列腺增生大鼠抗氧化作用的研究

目的：本研究探讨补充不同剂量大豆异黄酮对大鼠前列腺增生的影响,并初步探讨大豆异黄酮的抗氧化作用与抑制前列腺增生的关系。方法：应用丙酸睾酮诱导大鼠前列腺增生,观察正常对照组、模型组、低、中、高剂量大豆异黄酮组大鼠前列腺的湿重、前列腺指数、前列腺组织匀浆中TAOC、GSH、CAT、SOD等各项抗氧化指标和MDA水平的改变。结果：低、中、高剂量组大鼠前列腺湿重及前列腺指数均显著低于模型组(p＜0.05);与模型组相比,低中高剂量组的CAT、TAOC、SOD、GSH显著升高,而MDA显著降低(p＜0.05)。中剂量组效果最为明显。结论：大豆异黄酮可以显著抑制大鼠前列腺增生,明显提高大鼠的抗氧化能力。大豆异黄酮可能对预防和辅助治疗前列腺增生有一定的作用。     

萌芽-低温打浆技术制备高苷元类异黄酮豆乳粉

在传统湿法工艺技术制备豆乳粉的基础上,以萌芽大豆为原料,对热烫后的大豆进行低温打浆处理,提高豆乳粉苷元类异黄酮含量。在单因素试验基础上,采用响应面法对萌芽-低温打浆制备高苷元型异黄酮豆乳粉工艺进行优化,确定最优萌芽-低温打浆的工艺参数为萌芽温度25?℃、萌芽时间75?h、浆液pH?6.0、打浆温度57?℃、打浆时间3.5?h,响应值苷元类异黄酮含量有最优值,为6.43?mg/g。利用高效液相色谱测定豆乳粉中异黄酮种类及含量,结果发现萌芽-低温打浆可显著提高豆乳粉中总异黄酮含量及苷元类异黄酮含量（P＜0.05）,与传统湿法工艺相比,其异黄酮总含量及苷元类异黄酮含量分别增加了1.09?倍和9.37?倍。     

酱油渣中色素及大豆异黄酮的提取研究

应用乙醇溶液和超声波辅助的提取方法,从大豆原粒酱油渣中提取酱油色素,并利用乙酸乙酯萃取回收乙醇提取液中的大豆异黄酮。结果表明,酱油渣中色素的最佳提取工艺为乙醇体积分数65%、料液比1∶1.75（g∶mL）、提取时间24 h、超声波时间35 min。在该条件下,酱油渣色素得率为1.8 g/100 g;高效液相色谱法分析,大豆异黄酮得率约为37 mg/100 g。光谱分析表明,酱油渣色素在紫外和红外区间均有非常强的吸收峰。色素稳定性分析表明,酱油渣色素容易被过氧化氢氧化,而亚硫酸钠对其有一定的增色作用;蔗糖、苯甲酸钠、山梨酸钾和光照对酱油渣色素的稳定性影响较小,偏酸性和80 ℃以上的高温环境对酱油渣色素具有降解作用。     

超高效液相色谱法检测保健品中的大豆异黄酮各组分含量

目的建立超高效液相色谱法检测保健品中大豆异黄酮各组分含量的方法。方法利用超高效液相色谱仪,将供试品用80%甲醇溶解提取,用Waters XSELECT HSS T3色谱柱分离,以乙腈和1%磷酸溶液进行梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,用紫外检测器在波长260 nm对大豆异黄酮组分进行检测。结果大豆异黄酮各组分的在各自范围内线性关系良好。大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素、染料木素的相关系数均大于0.9999,平均回收率为97.2%~103.3%,相对标准偏差为0.4%~4.8%。结论该方法运行时间短、结果的重复性好。超高效液相色谱法更为快捷简单,溶剂使用量更少,能够提高检验准确性,降低检验成本。     

大豆异黄酮对青年雌性大鼠卵巢、子宫组织中Bcl-2 mRNA 和Bax mRNA 表达的影响

目的：通过动物实验研究,观察Bcl-2 mRNA 和Bax mRNA 在青年雌性大鼠卵巢和子宫组织中的表达情况,从细胞凋亡角度研究大豆异黄酮对青年雌性大鼠的抗衰老作用。方法：选用2 月龄青年雌性大鼠50 只,按体质量分成5 组,每组10 只,分别为对照组(基础饲料)、低剂量组(大豆异黄酮100mg/(kg bw·d))、中剂量组(大豆异黄酮200mg/(kg bw·d))、高剂量组(大豆异黄酮300mg/(kg bw·d))、雌激素组(己烯雌酚0.5mg/kg 饲料),实验周期7 周。采用原位杂交法检测各组大鼠卵巢和子宫组织中Bcl-2 mRNA 和Bax mRNA 的表达水平。结果：大豆异黄酮能够增强大鼠卵巢和子宫组织中Bcl-2 mRNA 的表达水平;而各剂量组大鼠卵巢和子宫组织中Bax mRNA水平呈下降趋势。结论：大豆异黄酮可以增强抗凋亡基因Bcl-2 mRNA,拮抗促凋亡基因Bax mRNA 的水平,推测这是大豆异黄酮对青年雌性大鼠发挥抗衰老作用的途径之一。     

固态发酵法制备大豆异黄酮苷元

研究了一种能分泌β-葡萄糖苷酶的黑曲霉作为菌种对大豆异黄酮粉进行发酵生产大豆异黄酮苷元的方法,通过单因素及正交试验确立了产β-葡萄糖苷酶的最优培养基配比和水解大豆异黄酮粉的最佳工艺条件,为实现大豆异黄酮苷元的产业化生产提供了参考.