基因组改组技术对L-乳酸产生菌耐热性的影响

采用紫外线与亚硝基胍(NTG)两种诱变方法获得用于基因组重组的出发菌株,应用灭活的多亲原生质体再融合获得活性融合子的方法,有效地提高了基因组改组后的筛选效率.采用低pH值平板和碳酸钙平板连续筛选的方法,筛选得到干酪乳杆菌改组菌株,具有较强耐酸性能,够在pH3.6 MRS平板上生长繁殖,产酸量为原始菌株的3.4倍,发酵温度提高到40℃,摇瓶发酵结果表明,改良菌株的代谢途径未发生变化.     

苯乳酸高产菌株的诱变育种

利用本实验室筛选得到的苯乳酸生产菌Lactobacillus plantarum P421进行高产菌株的诱变选育.通过紫外线诱变进行诱变育种,以产物耐受和抑菌圈相结合的筛选方法,获得了一株高产苯乳酸的优良突变菌株,其产量达到528mg/L,比出发菌株81mg/L提高了6.5倍,且遗传性质稳定.该诱变方法和筛选方法目的明确,易操作,对类似的诱变育种具有一定的借鉴意义.     

手性柱色谱法测定酸奶及乳酸饮料中的L-乳酸及D-乳酸

采用手性柱高效液相色谱法测定部分市售酸奶和乳酸饮料中L-乳酸和D-乳酸的质量浓度.结果表明,酸奶中L-乳酸质量浓度为25～100.00 g/L之间.D-乳酸质量浓度为0.00～2.00 g/L之间,绝大多数的酸奶中L一乳酸的质量分数超过98.00%,D-乳酸质量浓度较低;乳酸饮料中L-乳酸质量浓度在10.00～30.00g/L之间,D-乳酸质量浓度为1.00-3.00 g/L之间.     

苹-乳发酵管理是优质葡萄酒酿造工艺中极其重要的一环

过去，人们似乎有一种误解，认为苹-乳发酵的主要作用只是降解苹果酸，并最终降低葡萄酒的总酸度。事实上，苹果酸-乳酸发酵管理是优质葡萄酒酿造工艺这一大管理系统中必不可少的重要一环。研究表明，苹-乳发酵过程中，通常会产生众多的化合物，其中许多化合物对葡萄酒风味的复杂性有着重要的影响。此外，随着不断满足消费者对葡萄酒风味复杂多样性的这一酿酒趋势的日益明显，人们越来越清楚地认识到葡萄酒中乳酸菌所扮演角色的重要性。正是基于上述认识，对酿酒师来说，现在比以往任何时候都重要的一点是，如何通过苹-乳发酵的科学控制，对…     

苹果酸-乳酸发酵接种研究

本文以四个酿酒葡萄品种和酒类酒球菌(Oenococcus oeni)31DH为材料，进行了苹果酸-乳酸发酵(MLF)接种研究。结果表明，MLF应在酒精发酵结束后接种，接种量以10^7cfu／ml为宜，品种间MLF的速度受接种量的影响。适宜的接种环境条件为：温度18-21℃，pH不低于3．2，总SO2浓度不超过50mg／L。本文还对MLF接种时间的确定和接种量选择问题进行了探讨。     

鼠李糖乳杆菌乳酸发酵动力学的研究

鼠李糖乳杆菌是一类重要的L-乳酸生产菌,研究其发酵条件及其动力学对发酵工艺及其过程控制具有重要意义.本文针对鼠李糖乳杆菌1.549,通过摇瓶悬浮试验确定其最佳培养条件及发酵培养基组成.在此基础上,研究初始葡萄糖浓度和产物乳酸的积累对发酵过程的影响,建立发酵动力学模型.结果表明,鼠李糖乳杆菌1.549摇瓶发酵最佳培养条件:温度34℃,种龄8 h,接种量5%.由正交试验确定的摇瓶最佳发酵培养基组成:酪蛋白胨15 g/L,酵母膏4 g/L,葡萄糖50 g/L,柠檬酸二铵1 g/L,K2HPO4 2 g,L,乙酸钠2 g/L,MgSO4 0.3g/L,MnSO4·H2O 0.03 g/L,FeSO4·7H2O 0.03 g/L.鼠李糖乳杆菌利用葡萄糖L-乳酸发酵动力学模型结果与本试验结果吻合较好,其乳酸发酵机制属部分生长耦联型.动力学参数揭示,高浓度的初始葡萄糖底物和乳酸的积累对发酵的影响在于其对细胞生长的抑制.     

纤维素酶和米根霉同时糖化发酵纤维素为L-乳酸

研究了纤维素原料经机械粉碎、稀酸处理、氨处理、蒸爆水洗处理后 ,用里氏木霉所产纤维素酶和米根霉对其进行同时糖化发酵生产L 乳酸 ;并与稀酸处理物料分别酶解发酵进行了对比。结果表明 ,实验条件下 ,粉碎处理、稀酸处理、氨处理、蒸爆水洗处理物料的L 乳酸发酵产量分别为 13 4mg/mL、18 1mg/mL、15 5mg/mL和 19 6mg/mL ,与分别酶解发酵相比 ,同时糖化发酵过程周期短。     

米根霉F1-ATPase活性降低突变株的筛选研究

本实验采用同步辐射软X射线Nk诱变米根霉,获得一株新霉素抗性突变株NA-2,该菌株F1-ATPase活性降低86.82%,胞内ATP含量下降18.99%,最终菌体浓度为出发菌株的79.22%,发酵周期缩短了12h,葡萄糖平均消耗速度和L-乳酸生产强度分别高出25.17%和32.57%,平均葡萄糖消耗比速(qs)、L-乳酸生成比速(qp)和细胞比生长速率(μ)分别提高86.42%、128.13%和60.0%,但胞内能荷变化不明显。进一步研究发现,突变株糖酵解途径中关键酶磷酸果糖激酶(PEK)、丙酮酸激酶(PK)和磷酸甘油醛激酶(GAPDH)的活性较原始菌株提高了58.34%、23.53%和11.29%,乙醇脱氢酶(ADH)活性降低了32.11%,乳酸脱氢酶(LDH)活性提高了42.27%。结果表明,降低米根霉F1-ATPase活性有效地提高了糖酵解关键酶活性而加速葡萄糖代谢,提高了L-乳酸生产强度。     

乳酸的生产应用进展

介绍了乳酸及其下游产品的开发,乳酸、聚乳酸的合成工艺与应用前景。     

水/正己烷双相体系全细胞合成D-苯基丙酸的研究

利用前期筛选出的耐受苯基乳酸的突变菌株E. coli Z2016 (CCTCC保藏编号为M2016332),在水相和有机溶剂正己烷组成的双相体系中转化生产苯基乳酸。实验还研究了转化温度、摇床转速、底物浓度、湿菌体浓度和有机溶剂正己烷的体积分数对PLA产量的影响。当转化温度为40℃、摇床转速为300 r/min、底物浓度和耐受PLA突变菌株E. coli Z2016菌体浓度均为15 g/L、正己烷的体积分数为40%的时候,PLA的产量最大,为10. 9±0. 08 g/L/h。