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为了研究遗传密码子对表达调控的影响,利用PCR重叠延伸法,对萝卜抗真菌蛋白Rs-AFP2基因编码序列区的部分核苷酸进行沉默突变,构建突变体Rs-AFPm.序列分析表明,PCR产物全长240bp,有一个阅读框,编码的蛋白由29个氨基酸的信号肽和51个氨基酸的抗真菌蛋白组成.突变体与突变前的Rs-AFP2基因相比,在编码区第3号氨基酸Lys相差一个碱基(TTG→TTA),第5号氨基酸Gln相差一个碱基(CAG→CAA),第6号稀有密码子Arg相差两个碱基(CAG→CGA).重新合成引物,将切除信号肽的Rs-AFP2基因和Rs-AFPm基因与原核表达载体pET-21b(+)分别重组到大肠杆菌BL21菌株.IPTG诱导后,二者均得到了表达.软件分析显示,突变前pETAFPo表达产物占全菌蛋白的3%,突变后pETAFPm的表达产物占全菌蛋白含量的8%;表达蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经超声波破碎后,蛋白质复性,抑菌结果表明,pETAFPm表达产物的抑菌半径大于pETAFP2表达产物的抑菌半径.这些都说明改造后的Rs-AFPm基因与Rs-AFP2基因相比,已有效地提高表达量. 相似文献
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介绍了观音阁坝被埋水下6年越冬停浇面水平裂缝采用“粘贴T1密封胶及表面粘三元乙丙后锚固”的处理方案。结果表明,利用胶性材料处理运行中的重力坝迎水面裂缝,技术可靠,方法简单,经济合理。 相似文献
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"通信原理"课程教学改革探索 总被引:15,自引:4,他引:11
张水英 《电气电子教学学报》2003,25(5):12-14
针对我院省重点专业“电子信息工程”的必修主干专业基础课程。“通信原理”教学中存在的不利于培养和提高学生分析问题、解决问题的能力的因素,从课程的教学内容、教学手段等方面论述了课程改革的基本构想,并对课程的实践环节——设计性实验的改革进行了探讨。 相似文献
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郑宁 《浙江纺织服装职业技术学院学报》2003,2(2):6-7
本文在明确冷暖感、湿冷感、接触湿冷感等概念的基础上,分析了在冬季着装状态下,人体热量、水汽 散失的途径和人体产生冷感的原因。 相似文献
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阿勒泰地区渠道防渗常用的三种方法为:1.塑料薄膜防渗渠道。优点是防渗效果好,具有很强的不透水性且工程造价低,比较耐久,施工技术简单,适应性强。缺点是必须用保护层,如采用刚性材料,则提高工程造价,特别对离砂石产地较远的地区。更加困难;2.混凝土预制板渠道,其主要作用是抗冲,但最大的问题是防止冻胀破坏,所以在冻胀性基土上修建混凝土预制板防渗渠道必须注意渠道线路应尽量选在中、粗颗粒土壤地基上,地下水埋藏较深以及无旁渗水补给的地段;3.砼预制板下铺塑料薄膜的渠道,这种渠道防渗措施防渗效果更好,并能起到一定的保温作用,减轻了冻胀破坏,造价低,运输量小,施工简单,技术难度不高,是一种比较好的抗冻、抗冲防渗措施。 相似文献