海藻糖脂肪酸二酯的酶法合成及性质

采用固定化脂肪酶Novozym 435催化选择性合成6,6’-O-海藻糖脂肪酸二酯。在叔丁醇-吡啶（11∶9,V/V）混合溶剂中,通过海藻糖和不同碳链长度（C6～C18）的脂肪酸乙烯酯发生酯交换反应实现,海藻糖和脂肪酸乙烯酯物质的量比为1∶4。通过核磁共振波谱及质谱分析对产物进行结构鉴定,分析产物的亲水亲油平衡（hydrophilic lipophilic balance,HLB）值、发泡性能和热稳定性,同时用噻唑蓝法分析该系列海藻糖脂肪酸二酯的细胞毒性。结果表明：结构鉴定其为海藻糖脂肪酸二酯,产物得率为43%～75%;海藻糖癸酸二酯和海藻糖月桂酸二酯具有较好的发泡性能（起泡性分别为101.00%和142.67%,泡沫稳定性（80?min内）分别为40%～60%和50%～70%）,海藻糖油酸二酯热稳定性最佳（温度达到350?℃时剩余质量仍为60.58%）;细胞毒性结果表明海藻糖油酸二酯安全、低毒。研究结果为开发食品领域高附加值的新型糖酯类非离子型表面活性剂提供了新方向。     

无载体固定化少根根霉产脂肪酶发酵培养基的优化

通过单因子和正交实验,对无载体固定化少根根霉N-103产脂肪酶的发酵培养基进行研究,获得摇瓶发酵的最优培养基条件为:花生油5mL/L、麸皮多糖水解液75mL/L、棉籽蛋白15g/L、(NH4)2SO42g/L、MgSO41g/L、K2HPO42.5g/L.在此条件下进行摇瓶验证实验,少根根霉脂肪酶酶活可达100U/mL,为基础培养基配方对照组的1.33倍.     

响应曲面法优化Lipozyme TL IM催化大豆油制备1,3-甘油二酯

为优化固定化脂肪酶Lipozyme TL IM催化大豆油制备高纯度1,3-甘油二酯,在单因素实验的基础上,选择催化温度、酶添加量、水添加量作为自变量,1,3-甘油二酯产率作为响应值,利用Central Composite Design响应曲面设计方法,研究各反应条件对1,3-甘油二酯产率的影响.再利用Design Expert模拟二次多项式回归方程的预测模型,确定最佳条件组合.结果表明:在酶解温度为55℃,加水量30％,加酶量45％,1,3-甘油二酯在产率为56.82％,1,2-甘油二酯产率为12.45％,甘油二酯合计69.86％.     

氨基化硅胶载体固定化α-淀粉酶的研究

采用5种硅胶作为载体,戊二醛作偶联剂,制备了固定化α-淀粉酶.对制备固定化α-淀粉酶的硅胶目数、偶联剂浓度、温度、pH值的影响因素进行了研究和优化.并对固定化酶和游离酶的酶学性质进行了比较.结果表明:固定化酶的最适温度为75℃,比游离酶提高了10℃,固定化酶的热稳定性优于游离酶.与游离酶相比,其对酸碱的适应性、贮存稳定性、操作稳定性也都有较明显改善.固定化酶的Km值略低于游离酶,前者为2.13mg/ml,后者为1.02mg/ml.     

超声波对固定化α-淀粉酶催化活性的影响

对超声波处理固定化α-淀粉酶进行了研究,结果表明,在一定参数范围内,固定化α-淀粉酶活力升高.对超声功率、超声频率和超声时间等能够影响固定化酶活力的因素的研究和优化,得出最适当的超声参数为:超卢功率为40W、超声频率为15kHz、超声时间为5min.     

应用固定化木瓜蛋白酶制备大豆肽的研究

以壳聚糖为载体,用戊二醛交联将木瓜蛋白酶固定化,研究水解大豆分离蛋白制备大豆肽的工艺条件,结果表明:固定化木瓜蛋白酶的表观米氏常数为8.9 mg/mL.固定化木瓜蛋白酶的最适温度为55℃,最适pH为7.8,最佳底物浓度为2.0～3.0 mg/mL,大豆分离蛋白的最佳流速为0.2 mL/min,大豆分离蛋白的水解率达到42.6%,酶解液中大豆肽含量为1.453 mg/mL.酶解液多肽分子质量大部分在10 ku以下.     

基于乙醇氧化酶型酶膜的生物传感器的研制和应用

以可溶性淀粉和海藻酸钠混合胶为固定化载体,戊二醛为交联剂,通过固定化乙醇氧化酶(AOX)制成核微孔酶膜,构建出过氧化氢电极系统。同时研究了该酶电极的特性,以及温度、海藻酸钠浓度、pH等相关参数对酶膜检测能力的影响。实验结果表明,在pH8,35℃时酶膜活性最佳,当乙醇体积分数为0.01%～1%时响应值有良好的线性关系,最低乙醇检测浓度在0.001%以下,响应时间为20s。通过对酶膜活性半衰期的检测,建立了乙醇氧化酶型酶膜优化工艺条件,其性能良好,具有较好的应用前景,特别适用于乙醇的在线监测。     

产脂肪酶菌Geotrichum candidum NS3的固定化及其稳定性

从南昌地区含油土样中,筛选到一株脂肪酶产生菌白地霉(Geotrichum candidum NS3).菌株摇瓶发酵的水解酶活为321 U/g干细胞,合成酶活为0.54 U/g干细胞.以聚氨酯泡沫为载体对菌株Geotrichum candidum NS3进行固定化培养和稳定性研究,结果显示,聚氨酯泡沫颗粒尺寸6 mm×6 mm×6 mm,密度27 kg/m3,摇瓶培养60 h,有73.8%的细胞进入聚氨酯泡沫中生长固定,载体固定细胞干重达到2.32 g/g载体.电镜图片显示白地霉(Geotrichum candidumNS3)在载体孔隙内和脊壁上缠绕充盈,生长良好,固定结构稳定.固定化细胞颗粒连续5批次催化反应,相对水解酶活保持率和固定细胞干重保持率分别达到63.1%和71%,具有良好的细胞固定稳定性和酶活保持率.     

固定化细胞及反应器技术在食醋生产中的应用

食醋是人们日常生活中必需的酸性调味品，食酷的生产多是靠人工翻酷固态发酵的传统工艺方式来完成。在生产过程中，大量的辅料、填充料协同主料（大米等）一起完成整个醋酸发酵过程。这种生产方式存在着劳动强度大，生产周期长等问题，是我们酿造厂家急待解决的难题。应用固定化活细胞微生物发酵工程这一高新技术，通过生物反应器发酵生产食醋，给我们酿造厂家带来了新的希望：它不但解决了传统固态工艺存在的问题，同时还通过分别固定化多菌种活细胞共酵，完成制醋中酒化、乳酸化。醋化的过程，使一般液态深层发酵醋风味单一的老大难问题得…