儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速临床特征分析

目的:对儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速(CPVT)临床表现进行观察分析,为CPVT的诊断提供参考依据。方法:回顾性分析2007年1月至2014年1月间我单位通过RYR2、贮钙蛋白2(CASQ2)基因突变检测确诊为CPVT的5例汉族患者的临床资料以及肾上腺素激发试验等结果。结果:患者心电图表现为静息状态下,右胸导联T波切迹、双向、双峰和明显U波,QT间期正常。其中1例因情绪激动诱发晕厥,此时动态心电图提示:室早诱发pVT,进而恶化成为室扑、室颤,患者在持续晕厥数分钟后自行缓解,室颤转为室速、室早二联律,最终恢复窦律。5例患者中,有3例患者通过平板运动试验诱发出其CPVT的室性心动过速(VT),在终止运动之后,VT转化为PVC,随后逐渐恢复窦律。虽然另外2例未激发出VT,但PVC均出现频发。且4例患者在停用肾上腺素之后,自行恢复窦律,1例则经静脉应用BB后转复窦律。结论:CPVT属遗传性心脏离子通道疾病,儿茶酚胺激素的分泌则是诱发其发病的重要触发因子,β受体阻滞剂对CPVT的治疗具有较好有效性与安全性。     

应用PCR 和单克隆抗体方法从人粪便及肿瘤组织中检测大肠癌基因突变的研究

目的: 检测大肠癌病人粪便中脱落细胞与肿瘤组织细胞的DNA,对比两者K-ras 基因序列和突变位点的变化,为临床非介入性的、简便的大肠癌诊断提供理论和实验依据。方法: 分离和提纯大肠癌组织及粪便中脱落细胞的DNA,用PCR(Polymerase chain reaction)法扩增K-ras基因,克隆K-ras基因PCR 产物并进行DNA序列的测定。免疫组化检测大肠癌相应抗原的表达:采用ELISA法,用大肠癌单克隆抗体对大便样品进行检测。结果: 同一病人的大肠癌组织细胞与粪便中的脱落细胞的K-ras基因的序列完全一致,并检测到1例K-ras基因点突变。K-ras基因突变与否与大肠癌病理类型和大肠癌单克隆抗体检测大便样品中脱落细胞的癌抗原表达水平有一定的相关性。结论: 以大肠癌分子发病机理为基础的非介入性检测粪便中K-ras突变是可行的,有望成为正常人群大肠癌筛查以及诊断的新方法之一,可以为大肠癌的早期发现及监测大肠癌的发生、发展和预后提供理论和实验依据。     

基于ARMS-TaqMan的EGFR基因E21突变检测

基于突变扩增凝滞(ARMS)技术和TaqMan探针检测技术,以肝癌细胞基因组为模板构建EGFR突变型质粒.针对EGFR基因型设计了特异性的ARMS引物,建立了快速定性检测人EGFR基因突变检测模型.结果表明,该方法的EGFR基因E21突变最低检测限达到101 co pies/m L,分辨率达到1％.     

CD59活性位点相关性基因突变的构建与表达

构建了野生型和突变型CD59重组质粒,建立了高效真核表达系统,探讨了W40位点的生物学活性。采用基因点突变技术使CD59W40基因位置缺失（突变1,M1）及C39W40K41→W39W40W41（突变2,M2）,重叠延伸PCR（overlap extension PCR）定点诱变扩增突变基因,重组入真核表达质粒pIRES,利用阳离子脂质体（Lipfectamine2000）将重组质粒转染中国仓鼠卵巢细胞（CHO）进行表达。酶切鉴定及序列测定证实成功构建了pIRES-MICD59、pIRES—M2CD59和pIRES-WTCD59,突变基因约500bp。G418筛选出了CHO转染细胞的稳定细胞克隆,免疫荧光、ELISA检测筛选MICD59、M2CD59和WTCD59蛋白高表达株,连续传代30代有高表达;补体溶细胞反应显示与野生型CD59相比,突变型M1CD59失去对补体的抑制功能,而M2CD59抗补体活性略增高。证实CD59的W40位点对其功能具有重要作用,封闭此位点可提高补体活性,有望用于肿瘤治疗。     

当鱼鳔消失以后(四) 从鱼类到四足动物

一位古生物学家在1915年写道:"在最早的两栖动物和所有的鱼类之间,还是存在着结构上的重要区别,根据目前的古生物学上的发现,这种障碍是不可逾越的。"遗传就是两组完整基因的镶嵌,而不是像达尔文所想象的那样如同两种饮料的调和一样的过程。1882年达尔文去世时,达尔文学派也开始衰落了,虽然越来越多的科学家接受了进化的观点,但是达尔文的理论基础却不甚稳固。不同的生命形式之间的缺口还是很大,而达尔文有关遗传的想法还只是一种模糊的猜测,不能够解释遗     

东北地区稻稗对五氟磺草胺的抗药性机制

[目的]明确东北地区稻稗对五氟磺草胺的抗药性机制。[方法]采用整株生测法测定不同种群对五氟磺草胺的抗药性水平及P450s活性差异,并采用基因测序法,研究ALS序列差异。[结果]种群R-2呈高等水平抗药性,抗性指数达25.67,种群R-1和R-3分别呈低和中等水平抗药性;3个抗性种群均未检测到突变;在施用马拉硫磷后,抗性指数比分别为1.99、5.42和1.60。[结论]抗性种群对五氟磺草胺抗药性并非靶标基因突变导致的,可能是P450s活性增强导致的非靶标抗药性。     

人体β-防御素-3突变基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的对人体β-防御素-3基因进行定点突变,并在E.coli中表达。方法从人正常皮肤组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增编码β-防御素-3成熟肽的cDNA,测序正确后,设计含突变位点的引物,用PCR重叠延伸法对β-防御素-3成熟肽cDNA进行定点突变,将突变产物克隆至pUC18,并在E.coli中融合表达。结果测序结果表明,经RT-PCR所得的β-防御素-3成熟肽序列与GenBank中报道的序列完全一致。经过突变,β-防御素-3成熟肽第29位谷氨酰胺密码子由CAG突变为精氨酸密码子CGA,其余核苷酸序列均未发生变化。将突变β-防御素-3基因在E.coli中诱导表达后,可见突变β-防御素-3蛋白表达。结论已成功克隆并表达了β-防御素-3突变体基因。     

科学家发现“贪食基因”可致强迫性进食

据《哈芬登邮报》报道,日前科学家发现一种"贪食基因",可能导致人们强迫性进食,嘴巴停不下来导致肥胖的出现。研究员以老鼠作为研究对象,发现Bdnf基因突变后,会使得大脑无法接收到饱足讯息。     

AMPK基因突变导致肌肉糖原增加可能用于Ⅱ型糖尿病治疗

一个由Mary-EllenHarper、RobertDent和RuthMcPherson博士领导的渥太华研究组联合来自美国加州伯克力的研究人员对AMPK（腺苷单磷酸活化蛋白激酶）基因进行了深入研究。这种酶控制着我们细胞中的能量数量。在两个没有亲缘关系的家族中的成员细胞中发现的这种基因的突变导致肌肉中AMPK活性加倍。