肾上腺嗜酸细胞型皮质癌的临床病理特征及表皮生长因子受体基因状态

目的 探讨9例肾上腺嗜酸细胞型皮质肿瘤临床病理特点以及表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor，EGFR)在该肿瘤中蛋白表达、基因突变和基因拷贝数改变的情况。 方法 回顾性分析9例肾上腺嗜酸细胞型皮质腺瘤及皮质癌的临床特点、组织形态学特征，并应用免疫组化、Scorpion ARMS突变系统及荧光原位杂交的方法分析EGFR在该类肿瘤中的蛋白表达、基因突变和基因拷贝数改变的情况。结果 9例肾上腺嗜酸细胞型皮质癌中皮质醇增多症2例，无功能性7例。对所选病例进行随访，随访时间6-56个月，皮质癌患者死亡6例，所有腺瘤患者均健在。肾上腺嗜酸细胞型皮质癌中EGFR蛋白过表达率为77.8%（7/9），EGFR FISH阳性率为55.6%（5/9）；然而仅有22.2%（2/9）皮质腺瘤存在EGFR蛋白的表达，且EGFR FISH均为阴性（0/9）。肾上腺嗜酸细胞型皮质腺瘤及皮质癌中均未检测出EGFR基因扩增及基因突变。结论 肾上腺嗜酸细胞型皮质癌非常罕见，其诊断依据病理学及免疫表型，与腺瘤相比EGFR蛋白过表达和7号染色体的高多体性较常见于皮质癌，可能有助于二者的鉴别诊断，也有可能成为今后临床分子靶向治疗的方向。     

棒状链霉菌中lat基因的突变及其对克拉维酸产量的影响

以棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus NRRL3585的染色体为模板扩增得到1条1.77kb的lat基因片段,并将其用于构建重组质粒pKCLES。将pKCLES由E.coli ET12567接合转移至S.clavuligerus中。重组质粒pKCLES与S.clavuligerus染色体中野生型lat基因发生同源交换,从而获得了带有阿泊拉抗性的突变菌株。对S.clavuligerus NRRL3585以及lat突变菌株的基因组进行PCR验证,且测定了这2种菌株的产头酶素C的能力。结果均表明,突变菌株中的lat基因中插入了含有阿泊拉抗性的pKC1139片段而遭到了破坏。另外,以HPLC法测定了这2种菌株在不同培养时间(72h和96h)下的克拉维酸的产量,结果显示,lat突变菌株的克拉维酸产量最高能达到其原始菌株的2.3倍。     

基于基因突变原理的区域发展战略模式

在区域发展战略的内涵及其研究现状的基础上，给出了区域发展战略的目标、阶段和资源三维概念。借鉴生命科学原理的基因突变原理，揭示了区域发展战略的政策创新战略模式和科技创新战略模式。     

br基因的定点突变与表达

细菌视紫红质(bacteriorhodopsin BR)是极端嗜盐菌(Halobacterium halobium)紫膜上的一种光能转换色素蛋白，是一种极有前途的生物光电材料．野生型BR蛋白达不到实用光电材料的要求，因此，通过对细菌视紫红质基因(br基因)的定点改造，构建和表达BR突变体成为生物光电材料研究中的一个热点．以野生型br基因为模板，通过连续PCR的方法向br基因引入一个点突变，并将之克隆至pUCl9载体中．将经测序鉴定的br突变基因重组到穿棱质粒pNov—R中并转化BR缺陷型嗜盐菌L33，得到紫色阳性克隆．经PCR分析和Western杂交检测表明，阳性克隆中构建的br突变基因获得了表达．     

东北地区稻稗对五氟磺草胺的抗药性机制

[目的]明确东北地区稻稗对五氟磺草胺的抗药性机制。[方法]采用整株生测法测定不同种群对五氟磺草胺的抗药性水平及P450s活性差异,并采用基因测序法,研究ALS序列差异。[结果]种群R-2呈高等水平抗药性,抗性指数达25.67,种群R-1和R-3分别呈低和中等水平抗药性;3个抗性种群均未检测到突变;在施用马拉硫磷后,抗性指数比分别为1.99、5.42和1.60。[结论]抗性种群对五氟磺草胺抗药性并非靶标基因突变导致的,可能是P450s活性增强导致的非靶标抗药性。     

基因营养学的研究进展

从基因概念的发展、基因的分子生物学定义、基因多态性,基因突变与损伤,基因营养学的目的以及根据基因制定食谱并举应用实例综述基因营养学的研究进展。     

环境诱变剂——潜在的环境问题

凡是能够引起生物体遗传物质发生突然的或根本的改变,使其基因突变或染色体畸变达到自然水平以上的物质,统称为诱变剂。环境中的诱变剂有物理的,化学的,生物的三大类型。对于人类来说,环境诱变剂既有利也有弊,一方面可极大地丰富人类的生活需求,另一方面又存在致癌,致畸,致突变的潜在危害。     

脑梗死患者血浆胆固醇酯转运蛋白水平及其基因两种主要突变的检测

目的 检测脑梗死患者和正常人的胆固醇酯转运蛋白(CETP) 基因15 外显子D442G 突变和14 内含子I14A 突变的频率。方法 应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP) 的方法检测110 例脑梗死患者和100 例健康人胆固醇酯转运蛋白基因D442G 突变和I14A 突变;用本室建立的酶联免疫测定法(ELISA) 测定其血浆CETP 水平。结果 110 例脑梗死患者中发现4 例D442G杂合子, 1 例I14A 杂合子, 无纯合子, 突变率分别为3.6%、0.9%;100 例健康人中发现4 例D442G杂合子, 1 例D442G 纯合子, 1 例I14A 杂合子, 突变率分别为5%、1%, 两组相比较突变频率的差异无统计学意义(P>0.05);而脑梗死组TC、CETP 水平明显高于正常组(P<0.05), TG、LDL-C、apoB 水平与正常组相比差异性极其显著(P<0.005),HDL-C、apoAI 水平则显著低于正常组(P<0.005)。结论 脑梗死患者血脂和脂蛋白谱表现较强的动脉粥样硬化性, CETP 水平明显升高;CETP 基因突变频率与正常组比较无显著差异。     

碱性条件亚硝基自由基氧化鸟嘌呤和鸟苷

亚硝酸和NO2自由基被证明为致DNA突变因子,作为公认的氮原子中心的强氧化性业硝基自由基NO2对DNA的作用引起为数众多的科学家的关注,但未观察到其直接作用的结果.利用脉冲辐解技术在碱性条件下观察到NO2直接氧化鸟嘌呤阴离子和鸟苷阴离子,并测定pH 12条件下NO2氧化鸟嘌呤阴离子反应的速率常数κ=1.3×108dm3mol-1s一.但未观测到NO2与脱氧鸟苷-5-磷酸及DNA的其他碱基的反应,说明NO2选择性氧化鸟嘌呤,糖基和磷酸根及其组成的链具有保护DNA小被NO2.氧化的作用.     

后基因组时代的微阵列生物芯片技术

生物芯片是近十年来迅速发展起来的一种高通量生物信息检测和分析器件.微阵列生物芯片是一类发展较早、技术比较成熟、应用面较广的生物芯片,目前主要用于基因表达谱、基因突变和基因组多态性研究.随着现代生命科学和现代医学的快速发展,生物芯片的性能将会不断提高,应用范围不断扩大,芯片技术也将不断完善和发展.论文将围绕功能基因组研究及生物医学检测的实际需求,结合该实验室的研究工作,对于微阵列芯片的研究现状、面临的技术瓶颈以及未来可能的发展方向等进行讨论.