脑梗死患者血浆胆固醇酯转运蛋白水平及其基因两种主要突变的检测

目的 检测脑梗死患者和正常人的胆固醇酯转运蛋白(CETP) 基因15 外显子D442G 突变和14 内含子I14A 突变的频率。方法 应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP) 的方法检测110 例脑梗死患者和100 例健康人胆固醇酯转运蛋白基因D442G 突变和I14A 突变;用本室建立的酶联免疫测定法(ELISA) 测定其血浆CETP 水平。结果 110 例脑梗死患者中发现4 例D442G杂合子, 1 例I14A 杂合子, 无纯合子, 突变率分别为3.6%、0.9%;100 例健康人中发现4 例D442G杂合子, 1 例D442G 纯合子, 1 例I14A 杂合子, 突变率分别为5%、1%, 两组相比较突变频率的差异无统计学意义(P>0.05);而脑梗死组TC、CETP 水平明显高于正常组(P<0.05), TG、LDL-C、apoB 水平与正常组相比差异性极其显著(P<0.005),HDL-C、apoAI 水平则显著低于正常组(P<0.005)。结论 脑梗死患者血脂和脂蛋白谱表现较强的动脉粥样硬化性, CETP 水平明显升高;CETP 基因突变频率与正常组比较无显著差异。     

碱性条件亚硝基自由基氧化鸟嘌呤和鸟苷

亚硝酸和NO2自由基被证明为致DNA突变因子,作为公认的氮原子中心的强氧化性业硝基自由基NO2对DNA的作用引起为数众多的科学家的关注,但未观察到其直接作用的结果.利用脉冲辐解技术在碱性条件下观察到NO2直接氧化鸟嘌呤阴离子和鸟苷阴离子,并测定pH 12条件下NO2氧化鸟嘌呤阴离子反应的速率常数κ=1.3×108dm3mol-1s一.但未观测到NO2与脱氧鸟苷-5-磷酸及DNA的其他碱基的反应,说明NO2选择性氧化鸟嘌呤,糖基和磷酸根及其组成的链具有保护DNA小被NO2.氧化的作用.     

后基因组时代的微阵列生物芯片技术

生物芯片是近十年来迅速发展起来的一种高通量生物信息检测和分析器件.微阵列生物芯片是一类发展较早、技术比较成熟、应用面较广的生物芯片,目前主要用于基因表达谱、基因突变和基因组多态性研究.随着现代生命科学和现代医学的快速发展,生物芯片的性能将会不断提高,应用范围不断扩大,芯片技术也将不断完善和发展.论文将围绕功能基因组研究及生物医学检测的实际需求,结合该实验室的研究工作,对于微阵列芯片的研究现状、面临的技术瓶颈以及未来可能的发展方向等进行讨论.     

我国科学家发现全新的视网膜色素变性机制

<正>科技部门户网站报道(2014-04-24)近日,973计划"近视发病机理及干预的基础研究"项目研究团队原创性发现了常染色体隐性遗传视网膜色素变性的高发致病基因SLC7A14,并揭示了SLC7A14基因突变的发生率及其生物学机理.这是第一个由国内科学家独立发现的常染色体隐性视网膜色素变性致病基因,标志着我国在相关研究领域实现了突破.     

2017年云南省登革病毒Ⅰ型分离株NS1基因的鉴定及分析

目的鉴定并分析2017年云南省登革病毒Ⅰ型(dengue virusⅠ,DENVⅠ)分离株的NS1基因。方法采用病毒RNA提取试剂盒提取登革热(dengue fever,DF)患者血清RNA,RT-PCR法鉴定病毒类型,并扩增DENVⅠ的NS1基因,进行测序。应用BIOEDIT软件比对NS1及DENVⅠ标准株(DQ672562.1)的核苷酸及氨基酸序列,并进行突变分析。应用MEGA 5.1软件中的NJ法(1000 Boot strap replicate)构建NS1基因的系统进化树。结果共分离获得16株DENVⅠ的NS1基因,经比对发现,201703、201704、201708、201709、201713分离株NS1基因第21位碱基由C变为T(无义突变);201705、201706、201712分离株NS1基因第289位碱基由T变为A(有义突变),氨基酸曲L变为M。16株分离株NS1基因其他突变位点均相同,共85处发生碱基突变,其中5个为有义突变。16株分离株与2011-China Donggua(JQ048541.1)、2008-Singapore(GU370049.2)、2014-Taiwan(KU365900.1)、2005-China Fujian(DQ193572.1)、2016-Malaysia(KX452065.1)、2007-Indonesia(KC762646.1)、2015-South Korea(KP406802.1)、2006-Japan(AB178040.1)、2007-Thailand(HM469966.1)、2013-singapore(KJ806945.2)有较近的亲缘关系。结论 2017年云南省16株分离毒株均为DENVⅠ,可能属于东南亚国家的输入性毒株。     

亲子鉴定中IdentifilerTM系统15个STR基因座突变分析

目的:观察和分析IdentifilerTM系统15个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因座在亲子鉴定中的突变现象.方法:应用IdentifilerTM荧光标记复合扩增试剂盒检测710例亲子鉴定案,对其中发现突变基因座的案件加用STRtyper荧光标记复合扩增试剂盒进行等位基因检测,或6个mini Y-STR基因座检测.结果:在认定亲子关系的615例中,IdentifilerTM荧光标记复合扩增试剂盒中的15个基因座确定7例突变,其中vWA基因座2例,D13S17、FGA、D18S51、D21S11、D19S433基因座各1例;一步突变的6例,二步突变的1例.其突变均来自父亲,且年龄均在35岁以上.结论:在亲子鉴定中用IdentifileTM荧光标记复合扩增试剂盒检测到1～2个基因座不符合遗传规律时,有必要增加突变率低、稳定性好的STR基因座进行复核并排除近亲关系.     

儿童感染的乙型肝炎病毒S基因的分子特征

目的初步调查儿童感染的乙型肝炎病毒表面抗原的基因特征。方法收集10名HBV感染的儿童血清标本,抽提血清中的HBV DNA,采用PCR扩增HBV S基因并测序,利用Genotyping软件对PCR产物序列进行分型,并分析HBV S基因的突变情况。结果 10份血清标本中,扩增出HBV S基因并成功测序6份,其余4份扩增阴性不满足测序要求。6份PCR产物所测序列标本经Genotyping比对后,均属于B型,与NCBI收录的参考序列AF100309同源性最高;5例是adw,1例是ayw。HBV S基因中编码＂a＂抗原决定簇的核苷酸序列突变点分别为G529A、T531C、C534A、T562A、T581A、A589C。编码＂a＂抗原决定簇的氨基酸序列突变点分别为I126T、P127T、S143T、G145A。核苷酸突变点G529A、T562A不引起编码＂a＂抗原决定簇的氨基酸序列突变,为无义突变。而其他4点突变均可引起编码＂a＂抗原决定簇相应氨基酸序列发生改变。结论所调查儿童主要感染B基因型HBV;其感染的HBV S抗原＂a＂决定簇的氨基酸序列出现I126T、P127T、S143T、G145A的突变,可能是逃避乙肝疫苗诱导的免疫保护的一种机制。     

浅谈制笔行业有毒有害物质（二）——溶剂对健康的影响

上期＂浅谈制笔行业有毒有害物质＂一文中,针对《欧盟玩具安全新指令》中的法规EN71-3,结合其它法规的要求,着重介绍了十九大重金属对人体的危害。《欧盟玩具安全新指令》除了对重金属的种类和限值做出更新外,对可迁移元素的限制从8种增加到了19种;列明了55种禁用香料和11种需要贴警示标签香料的名称;首次禁用致癌、致基因突变、影响生育（CMR）物质;禁止生产和销售若干类不符合其它法例（包括化妆品指令和有关与食品接触物料的指令）的玩具;明确规定玩具必须遵守一般化学制品法规,特别是2006年12月18日通过的《欧洲议会和理事会（CE）关于化学品注册、评估、授权和限制（REACH）以及建立欧洲化学品管理局的第1907/2006号条例》。     

脆壁克鲁维酵母KFade5，7基因的克隆及其5′非编码区结构与功能研究

通过补偿乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)KlADE5，7基因突变，从脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)基因组文库中克隆了KfADE5，7基因。该基因全长4975bp，编码793个氨基酸，氨基酸序列与已知的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)ScADE5，7基因编码区有68．3％的同源度。利用KfADE5,7-lacZ融合基因，对5′非编码区进行缺失分析，发现了具有完整启动子功能的区域，在启动子上游还发现了两个增强转录和两个减弱转录的区域。     

晚期混合裂变产物内照射诱发体细胞 HPRT 基因位点突变的剂量效应关系研究

运用多核细胞法及胞质分裂阻断微核（ＣＢＭＮ）法对５组Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因位点突变频率及微核进行检测。实验组静脉注射放射性比活度为３．６４×１０５Ｂｑ／ｍｌ的晚期混合裂变产物后１至９ｄ心脏穿刺取血。结果表明：静注后第１ｄ，累积剂量达１．７３ｃＳｖ时，与对照组相比，ＨＰＲＴ位点突变频率、、微核率均已显著增加（ｐ＜０．０１）；累积剂量与ＨＰＲＴ位点突变频率、微核细胞率、微核率间均可拟合成剂量效应函数Ｙ＝ａ＋ｂｌｎＸ；ＨＰＲＴ基因突变检测可望成为生物剂量计。