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为了研究遗传密码子对表达调控的影响,利用PCR重叠延伸法,对萝卜抗真菌蛋白Rs-AFP2基因编码序列区的部分核苷酸进行沉默突变,构建突变体Rs-AFPm。序列分析表明,PCR产物全长240bp,有一个阅读框,编码的蛋白由29个氨基酸的信号肽和51个氨基酸的抗真菌蛋白组成。突变体与突变前的Rs-AFP2基因相比,在编码区第3号氨基酸Lys相差一个碱基(TTG→TTA),第5号氨基酸G1n相差一个碱基(CAG→CAA),第6号稀有密码子Arg相差两个碱基(CAG→CGA)。重新合成引物,将切除信号肤的Rs-AFP2基因和Rs-AFPm基因与原核表达载体pET-21b( )分别重组到大肠杆菌BL21菌株。IPTG诱导后,二者均得到了表达。软件分析显示,突变前pETAFPm表达产物占全菌蛋白的3%,突变后pETAFPo的表达产物占全菌蛋白含量的8%;表达蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经超声波破碎后,蛋白质复性,抑菌结果表明,pETAFPm。表达产物的抑菌半径大于pETAFP2表达产物的抑菌半径。这些都说明改造后的Rs-AFPm基因与Rs-AFP2基因相比,已有效地提高表达量。 相似文献
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针对WiFi指纹定位中管理指纹库的聚类方法不稳定,且类交界附近定位性能差的问题。研究使用粒子群算法改进模糊C均值聚类,并提出隶属度最小间隔的想法,将不能明确分类的指纹划分至多个子指纹库实现具有交叉的软划分管理。期间针对标准粒子群容易陷入局部最优出现早熟的不足,将满意度与线性递减惯性系数结合并引入突变。通过查看由聚类导致误差增大的发生区域,分析类交界处定位性能差的原因,将指纹库进行不同重合程度的软划分。结果表明,改进后的粒子群算法寻优能力更好,而且与改进粒子群算法融合的模糊C均值聚类结果稳定不受初始值影响,将软划分和多种硬聚类对比,类交界附近定位误差明显减小,说明软划分指纹库更适合指纹定位。 相似文献
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编辑朋友:据国际咖啡组织统计,全球每年消耗的咖啡是4 000亿杯,每秒钟世界上就有1.4万杯咖啡被喝掉。我国喝咖啡的人也越来越多,然而,咖啡与现代人健康的研究进展,您知道多少呢?上海读者:常昕咖啡有助防肝癌2005年,日本研究人员对9万多名日本人进行调研,发现在过去的10年中,喝咖啡者比不喝咖啡者患肝癌的概率少了50%还多。调查显示,每天喝1~2杯咖啡就会对肝脏有保护作用,如喝3~4杯咖啡,其保护作用会增强。2007年6月,瑞典一项研究显示,每天喝两杯咖啡可使罹患肝癌风险降低43%,其结果与日本的研究结果竟如此相似。不仅如此,瑞典的研究指出,咖啡 相似文献
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【摘要】 目的 研究CT引导经皮肺穿刺活检获得组织检测非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的可行性。方法 入组40例晚期或局部晚期无法手术的NSCLC患者,采用18 G自动活检枪,经CT引导行肺穿刺活检获取肿瘤组织,行EGFR基因检测,观察术后并发症,分析检测结果。结果 40例病例均经穿刺活检获得足够的病变组织进行组织学诊断和基因突变检测,EGFR基因突变率为37.5%(15/40),其中腺癌患者突变率为50.0%(12/24),非腺癌患者突变率为18.8%(3/16),两者间差异有统计学意义;3例患者穿刺后出现气胸,3例患者出现咯血;无血胸、纵隔气肿、感染及针道种植等并发症;EGFR基因突变患者使用吉非替尼治疗获得良好疗效。结论 CT引导的经皮肺穿刺活检技术简便、安全,是晚期NSCLC获得肿瘤组织检测EGFR基因突变的可靠方法,能够用于预测晚期NSCLC的靶向治疗效果。 相似文献
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牛奶中富含多种营养成分,包括蛋白质、脂质、碳水化合物等,每100 g牛奶中就含有3 g蛋白质,其中主要包括乳清蛋白和酪蛋白。β-酪蛋白占牛奶蛋白总量的24%~28%,其主要包括两种基因型:A1型与A2型。A1β酪蛋白经消化后产生的β-酪啡肽-7会导致人体消化功能紊乱、心血管疾病等不良反应。A2β-酪蛋白则产生较少甚至并不产生β-酪啡肽-7,在胃肠道消化、提高抗氧化功能、降低胆固醇浓度等方面具有益生作用。本文综述了β-酪蛋白基因型在人体内消化后所产生的影响,并阐述了A2β-酪蛋白的益生功能,讨论其对人体健康的作用。并从β-酪蛋白基因型在乳制品中的应用入手,阐述A2β-酪蛋白乳制品的研究进展,为今后乳制品中A2β-酪蛋白的功能研究提供指导意义。 相似文献
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目的探讨聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)检测方法对确定苯丙酮尿症(PKU)患者基因突变来源的应用价值,以便更好地应用于PKU基因诊断和产前诊断。方法对15例确诊的经典型PKU患者及其双亲的PAH基因的第3、5、6、7和11外显子及部分内含子行PCR扩增和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析;无PKU家族史的正常人作为正常对照。PCR-SSCP检测出异常外显子行PCR正、反向测序确定突变类型并分析患者的基因突变来源。结果5例患者的30个等位基因共检出16个突变,共14个突变等位基因来源均得到确定,1例患者(基因型为G247V/R243X)的突变来源未能确定。结论(1)PCR-SSCP检测方法可以确定PKU患者的基因突变来源(包括纯合突变和杂合突变),但对于2个基因突变位于同一外显子的杂合子患者,该方法不能很好地确定基因突变来源。(2)PCR-SSCP方法能够区分基因突变纯合子与基因突变杂合子。 相似文献
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