乳酸乳球菌镉抗性菌株的鉴定及质粒消除的研究

为构建乳酸菌食品级载体/受体系统.从分离自内蒙古传统乳制品103株乳源性乳酸菌中筛选出7株高浓度镉抗性菌株.特异性16SrDNA PCR扩增产物的序列测定结果表明.其中两株为乳酸乳球菌.PCR扩增镉抗性基因部分序列证实了这两株乳酸乳球菌含有镉抗性基因,为镉抗性阳性菌株.通过物理和化学方法消除乳酸乳球菌内源质粒,确定了镉抗性质粒,并获得一系列衍生菌株,包括无质粒菌株.为进一步研究各种质粒的功能及基因表达提供了理想的宿主,也为乳酸菌食品级载体/受体系统的构建奠定了基础.     

干酪生产用菌种的筛选

发酵剂菌种对干酪的品质有重要影响.采用从新疆民族乳制品(奶疙瘩、酸奶)中分离的菌株,研究了3种单一菌株(乳酸乳球菌、瑞士乳杆菌、干酪乳杆菌)和4种混合菌株(乳酸乳球菌:瑞士乳杆菌(1:1)、乳酸乳球菌:干酪乳杆菌(1:1)、瑞士乳杆菌:干酪乳杆菌(1:1)、嗜热链球菌:保加利亚乳杆菌(1:1))的发酵性能和生化特性,确定了适于干酪加工的菌种为乳酸乳球菌、乳酸乳球菌:干酪乳杆菌(1:1)、瑞士乳杆菌:干酪乳杆菌(1:1).     

乳酸乳球菌细胞壁蛋白酶的分离纯化

本研究确定了分离纯化乳酸乳球菌细胞壁蛋白酶(CEP)的最佳技术路线.用裂解液(50mmol/L Tris-HCI,2mmol/L EDTA-Na2,100mmol/L NaCl,0.5%Tritonx-100,1mg/ml溶菌酶,pH8.5)悬浮菌体(20ml/g),37℃下保温3h,离心后取上清液即为粗酶液.粗酶液通过45%硫酸铵沉淀,DEAE-Sephadcx A-25和Sephacryl-S-300 HR两步层析,可以得到纯化的细胞壁蛋白酶.蛋白酶提纯倍数达到74.048%,最后回收率为14.865%,PAGE电泳检测为一条带,SDS-PAGE检测蛋白酶为单体结构,分子量大约为53kD.用纯化后CEP酶解乳清蛋白,酶解液ACE抑制率为45%.     

Enterococcus faecium AS8及其胞外多糖对发酵乳流变学特性的影响

通过红外光谱、气相色谱-质谱联用和流变仪的检测,探究产自屎肠球菌（Enterococcus faecium）AS8的胞外多糖（exopolysaccharide,EPS）（AS8-EPS）的结构组成和流变性能。采用3 种发酵乳作为样品,分别为Streptococcus thermophilus＋Lactobacillus bulgaricus、EPS＋S. thermophilus＋L. bulgaricus和E. faecium AS8。结果表明,在贮藏期间,不同发酵乳样品具有不同的流变学性质。同时,补充添加EPS和原位EPS对发酵乳流变性能具有不同的影响。通过Sephadex G-100和Sephadex G-50的分离纯化,获得2 种多糖,分别为AS8-1-EPS和AS8-2-EPS。AS8-1-EPS主要单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖（分别占59.1%、26.8%、7.9%）,还有含量很少的其他单糖;AS8-2-EPS主要单糖组成为甘露糖、葡萄糖、半乳糖和鼠李糖（分别占65.4%、21.3%、8.9%、4.4%）。红外光谱检测结果表明AS8-1-EPS和AS8-2-EPS均为杂多糖。     

阿魏酸对粪肠球菌和屎肠球菌产酪胺机制的影响

摘 要：研究阿魏酸对高产酪胺的粪肠球菌XL-M66和屎肠球菌XL-M76生长、基因表达以及产酪胺的影响。利用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应技术分析2 株菌在阿魏酸作用下的酪氨酸脱羧途径相关基因表达情况,并使用高效液相色谱法检测2 株肠球菌培养48 h期间酪胺积累量。结果表明：未添加酪氨酸底物时,阿魏酸对酪氨酸脱羧酶（tyrosine decarboxylase,tyrDC）和酪氨酸/酪胺透性酶（tyrosine/tyramine permease,tyrP）基因的转录影响不大（P＞0.05）,但能促进酪氨酰-tRNA合成酶（tyrosyl-tRNA synthetase,tyrS）基因的转录（P＜0.05）。反之存在酪氨酸时,阿魏酸对tyrS基因表达的影响不大（P＞0.05）,却能显著抑制tyrDC和tyrP基因的表达（P＜0.05）。同时,阿魏酸能显著抑制粪肠球菌XL-M66和屎肠球菌XL-M76的生长（P＜0.05）,最终使得酪胺产量分别降低27.0%和19.9%。     

戊糖片球菌表面蛋白性质及抑菌作用研究

以戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus) F28-8为研究对象,菌株的生长情况与产酸能力分析表明,F28-8具有良好的酸适应能力,透射电镜(TEM)观察表明其存在蛋白层结构。应用5 mol/L LiCl提取菌株表面蛋白并进行SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS分析,发现该菌株表面含有主要组分为分子量83.5 kDa的N-乙酰基胞壁酿-L-丙氨酸酰胺酶和分子量51. 1 kDa的LysM肽聚糖结合域蛋白。进一步的菌株表面性质测试、胶原蛋白黏附实验以及抑菌实验结果显示,表面蛋白的剥离显著降低了菌株F28-8的表面性质(自动聚集能力、表面疏水性和表面电荷),降幅达到19.0%～56. 1%;LiCl提取的F28-8表面蛋白能显著降低沙门氏菌(Salmonella enterica subsp. CICC 21513)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus CICC 21600)对胶原蛋白的黏附力,降幅分别为74. 59%和81. 16%;LiCl提取的F28-8表面蛋白对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别达到31. 5%和15. 6%。研究结果表明,戊糖片球菌F28-8表面蛋白能改变菌体表面性质,增强其抑制致病菌黏附的能力并表现出一定的抑菌能力,在抗菌剂开发领域具有一定的应用潜力。     

应用模糊数学方法评价水牛乳Mozzarella干酪发酵剂

以发酵剂的产酸性能、黏度大小、双乙酰含量、pH4.6可溶性氮含量、滋味等五项为评价指标,应用模糊数学综合评价方法评价水牛乳Mozzarella干酪发酵剂中球菌与杆菌比例。结果表明,Lb.与St.以1∶1.2的比率混合时,模糊概率达0.83,菌种的综合品质最好,且与其它比率的菌种在统计学上存在显著差异(p<0.05)。     

妇科手术后,不妨试试人体润滑剂

Q由于子宫肌瘤越长越大,处于更年期的平平准备接受主治医生的建议,尽早手术。为防复发,主治医生建议她采用子宫切除术。平平有些犹豫,担心手术会影响自己的"性"福生活,引起丈夫的不满。A随着年龄增长,女性体内的性激素水平下降,生殖器官也会逐渐衰退,过去原本"驾轻就熟"的性生活也会有所变化。这是因为女性进入中老年后,体内的雌激素水平不断下降,阴道分泌物减少,阴道会变得干涩。特别是处于更年期或做过妇科手     

产细菌素的戊糖片球菌的筛选及其细菌素的理化性质研究

从牛肉丸中分离筛选到1株具有抑菌活性的乳酸菌菌株N463,对单核细胞增生李斯特菌ATCC54003的生长具有良好的抑制作用.16S rDNA序列同源性分析鉴定乳酸菌N463为戊糖片球菌.在排除有机酸、过氧化氢的干扰后,确定该抑菌物质为蛋白类物质,即细菌素,命名为细菌素N463.理化性质研究表明细菌素N463具有较好的热...     

具有溶栓活性的重组乳酸乳球菌的构建

利用PCR方法从纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis subsp.natto)基因组DNA中扩增纳豆激酶原基因,构建了纳豆激酶原基因的表达载体pFY002,转化Lactococcus lactis NZ9000,得到活性表达纳豆激酶的重组菌Lactococcus lactis NZ9000/pFY002。利用纤维蛋白平板法检测其溶栓活性,并对诱导剂乳链菌肽(NisinA)的浓度、温度、诱导时间对重组菌产酶的影响进行探究。