L-天冬氨酸α-脱羧酶工程菌株的构建 及其培养条件研究

L-天冬氨酸α-脱羧酶以L-天冬氨酸为底物, 脱去α-羧基后生成β-丙氨酸.利用PCR 扩增技 术, 将Escherichia coli DH5α中的PanD 基因克隆后连接到pET28c(+)载体上, 先转化E .coli DH5α中, 经过50 μg/mL 卡那霉素抗性筛选和酶切、测序验证后, 转化表达菌株E .coli BL21 (DE3), 得到具有L-天冬氨酸α-脱羧酶活性的工程菌株E .col i BL21(DE3)/ pE T28c(+)-panD . 经乳糖诱导该基因能有效表达C-末端具有组氨酸标签的L-天冬氨酸α-脱羧酶.通过对乳糖诱导时 间、乳糖诱导质量浓度、诱导温度、诱导菌龄和培养基诱导初始pH 值等发酵条件的优化, 得到最佳 培养条件为:乳糖诱导时间20 h , 乳糖质量浓度12 g/L , 诱导温度为35 ℃, 诱导菌龄为3 .5 h , 诱导 培养基初始pH 5 .5 , 通过对转化产物β-丙氨酸的检测结果分析显示, 工程菌株E .col i BL21 (DE3)/pE T28c(+)-panD 在优化条件下, 酶活力达186 U .     

三种形式曝气生物滤池设计特点对比分析

对传统形式BAF、内循环BAF和多级EM-BAF 3种形式的曝气生物滤池工艺进行了总结和对比分析,阐述了各自的原理、优化设计特点和应用情况等,分析了改良型BAF在有机物去除能力、硝化反硝化、可操作性及经济性等多方面的特点和优势,同时对BAF工艺的进一步研究和优化前景做了展望,以期为石化污水处理行业从业人员进行BAF技术选择、工程设计等提供参考和思路。     

工程菌对染料脱色性能的研究

采用原生质体融合技术,构建了脱色工程菌H-1,它可同时对结构差异大的还原大红R和蓝色盐VB染料进行脱色.确定了工程菌H-1的较佳脱色条件为厌氧、30℃、pH=7、接种量为3 g·L~(-1).对色度为417倍、631倍、812倍、1093倍的上述两种染料培养基分别脱色12 h,其中H-1对色度为417倍的蓝色盐VB的脱色率为85.5%,对还原大红R的脱色率为90.1%;对色度为1093倍的蓝色盐VB的脱色率为81.3 %,对还原大红R脱色率为86.5%.同时用单株原始菌株与混合菌对相同浓度的染料培养基脱色,对各菌的脱色结果进行了理论分析.工程菌扩大了脱色种类,提高了降解速率,具有广阔的应用前景.     

人参3-O-UGT1基因RNAi表达载体工程菌的构建

人参3-O-UGT1基因(Pg3-O-UGT1)是控制人参中二醇型单体皂苷合成的关键酶基因,而二醇型皂苷和三醇型皂苷具有相反的药理活性。本文利用RT-PCR技术和酶切连接技术成功构建人参3-O-UGT1基因RNAi(RNA interference)植物表达载体,通过热转化法将重组表达载体转化进发根农杆菌A4中,得到含有人参3-O-UGT1基因RNAi植物表达载体的工程菌,为诱导人参外植体转化和人参皂苷合成机理奠定了基础。     

炼油厂高浓度污水处理工程设计

炼油厂产生的高浓度污水具有水质复杂、有机物浓度高、可生化性差,水质、水量冲击频繁等特点。采用匀质-隔油-气浮-吸附-两段生化-絮凝沉淀-曝气生物滤池组合工艺对炼油高浓度污水进行单独处理。工程运行结果表明,在进水ρ(COD_(Cr))≤1 500 mg/L,ρ(NH_3-N)≤60 mg/L,ρ(石油类)≤500 mg/L,ρ(挥发酚)≤60mg/L,ρ(硫化物)≤35 mg/L的条件下,出水各指标稳定达到GB 8978—1996《污水综合排放标准》中一级标准的要求,该组合工艺具有良好的处理效果和较强的抗冲击负荷能力。     

异戊醇生物合成研究进展

在能源危机、环境危机和资源危机的影响下,发展新型环保替代能源越来越受到各国的重视。诸多研究证明,异戊醇与乙醇相比,具有更高的能量密度、更低的蒸汽压、更高的辛烷值等特点,更接近于汽油。就生产异戊醇所涉及到的各种技术问题,以及目前国际上研究生产异戊醇的工程菌和生物催化过程中的关键酶——酮酸脱氢酶的研究现状进行了综述,同时,也对异戊醇生物合成未来的发展趋势进行了展望。     

丛毛红曲霉工程菌TI- 25 高产莫纳可林K发酵工艺优化

为优化丛毛红曲霉工程菌TI-25 高产莫纳可林K（monacolin K,MK）的发酵工艺,以菌株TI-25 作为研究对象,以MK 产量为评价指标,采用固态发酵方式,在单因素试验基础上,采用响应面优化设计,探究丛毛红曲霉工程菌TI-25 高产MK 的最佳发酵工艺。结果表明：发酵瓶装米量、初始加水量和发酵变温时间均会显著影响发酵产物的MK 产量,而发酵时间、种子液培养基初始pH 值和种子液接种量对发酵产物的MK 产量的影响较小。因此,选取发酵瓶装米量、初始加水量、发酵变温时间3 个因素进行响应面优化设计。优化结果表明,菌株TI-25 固态发酵产MK 的最佳发酵工艺为发酵瓶装米量20 g/350 mL,初始加水量32.38 mL,30 ℃培养3 d 后,变温为28 ℃继续培养12 d,种子液接种量10%,种子液培养基初始pH4.5,在此条件下发酵培养,发酵产物红曲米中的MK 产量高达635.12 mg/kg。     

玉米联合固氮工程菌的研究

用分子生物学手段改造玉米联合固氮菌,解除铵对固氮酶合成的阻遏作用,以期增加对宿主的氮素供应,改善与宿主根系的相互关系。经接合转移法把载有组成型表达ｎｉｆＡ基因的ｐＣＫ３质粒导入从玉米根分离到的根际联合固氮菌Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｇｅｒｇｏｕｉａｅ５７－７,得到耐铵工程菌Ｅ７。Ｅ７在５０ｍｍｏｌ／Ｌ ＮＨ＾＋４下恢复７６％固氮酶活性,接种Ｅ７使玉米固氮率增加１４％,并促进玉米次生根分化及根系生长。     

白腐工程菌处理TNT炸药废水的研究

采用单因素寻优及正交方法研究了时间、温度、pH值、木质素用量等因素对白腐菌降解TNT炸药废水的影响。结果表明,当反应时间为48h,生化温度为℃,pH值为5,木质素投加量为n3时,TNT废水的COD去除率为99％。本文还对白腐菌降解TNT废水的动力学过程进行了探讨。     

降争工程菌处理染色废水的研究

采用缺氧-好氧工艺,在缺氧池中投加脱色菌,在好氧池中分别投加降解工程菌、降解高效菌和活性污泥,试验比较了这三种组合工艺对染色废水的处理效果,结果表明：脱色菌-降解工程菌工艺的效果最好,在高浓度下活性高、降解速率快、处理效果好。