白腐工程菌生化降解TNT炸药废水的研究

利用白腐工程菌生化降解TNT废水,其效果显著,且克服了以往白腐菌在应用上的不便,填补了国内彻底处理TNT废水的空白。该方法具有处理效果好、周期短、安全可靠等特点。通过试验证明了该方法在技术是可行的,有着良好的应用前景。     

抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌的构建及其酶学特性

通过基因重组,定点突变,基因整合和诱变等手段构建了一个抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌株B135,试管及三角瓶发酵结果显示,酶产量是10048U/ml,是2709碱性蛋白酶产量的55％,抗氧化型碱性蛋白酶浓度是5．9mg/ml,该酶与1mol/L过氧化氢作用15min后,酶活保存90％以上,而709则保存12％,说明B135碱性蛋白酶是抗氧化的。     

工程菌处理制药废水

本文报导了用生物工程技术构建的多功能降解性工程菌对高浓度制药废水的处理技术。工程菌LEY6是以乙酸钙不动杆菌T3株（Acinetobacter calcoaceticns T3）为受体,恶臭假单胞菌6－81株（Pseudomonas putida 6-81),节杆菌4＃株（Arthrobacter sp4＃）为供体,采用多基因转化受体原生质球构建而成。废水处理工程以接触氧化方式对废水进行处理。工艺采用物化预处理,工程菌深度处理的工艺路线。处理效果：进水CODCr=40000mg/L,出水CODCr＝200mg/L以下。     

表达MAGE-1/HSP70/MAGE-3工程菌的稳定性

目的检测重组工程菌pET28a-MAGE-1/HSP70/MAGE-3/BL21(DE3)生物学性状的稳定性。方法将工程菌菌株连续传50代,每隔10代挑取单克隆菌落进行诱导表达,并计算质粒丢失率。提取不同代次的质粒,扫描电镜观察,检测融合蛋白表达水平,并进行工程菌的染色镜检及生化鉴定。结果pET28a-MAGE-1/HSP70/MAGE-3/BL21(DE3)融合蛋白工程菌呈典型的大肠杆菌形态,各代次菌的各项检测结果与原始菌种差异无显著意义。结论重组工程菌pET28a-MAGE-1/HSP70/MAGE-3/BL21(DE3)生物学性状稳定,可作为生产用菌种。     

提高活性炭净水效能和延长使用周期的工业化试验研究

通过对提高活性炭净水效能和延长使用周期的工业化试验研究，并结合大庆石化公司化肥厂现场应用的实际情况，从社会效益和经济效益的角度出发，阐述了工程菌固化技术在生活水活性炭系统中推广应用的可行性与必要性。     

nirS基因重组工程菌降解亚硝酸盐的初步研究

通过基因工程手段增加厌氧氨氧化菌亚硝酸盐还原酶(nitrite reductase,nirS)的表达量,运用质粒载体p GEM-T克隆nirS基因。琼脂糖凝胶电泳检测显示,nirS基因重组工程菌在440 bp处有明显的目的条带;nirS基因重组工程菌扩大培养7~8 h后即达到生长曲线稳定期,引入外加氮源后,菌体生长情况更优。通过不同菌液投加量以及处理不同初始浓度的亚硝酸钠溶液,检测nirS基因重组工程菌的性能。结果表明,当nirS基因重组工程菌投加30 m L(细菌数为2.3×107个/m L),亚硝酸盐初始质量浓度为40 mg/L时,亚硝酸盐去除率达到90%以上。nirS基因重组工程菌可适用于亚硝酸盐废水的处理。     

生物强化技术处理冷轧废水实践研究

采用生物强化技术,向活性污泥系统中投加BP型高效复合微生物,考察其对冷轧废水的处理效果和最佳工艺参数.结果表明,在连续进水的条件下,控制活性污泥的SV<,30>为20%、BP高效复合菌的投加质量浓度为10mg/L、HRT为20 h、DO为4.0 mg,L、温度为25～32℃,系统对COD<,Gr>、氨氮的去除率分别达到91%和95%以上,比对照组分别提高16%和5%.在某冷轧薄板厂污水处理站采用该技术对原生化系统进行改造后,出水水质稳定,各项指标达到了<钢铁工业水污染物排放标准>(GB 13456--1992)的一级排放标准.     

降解工程菌处理染色废水的研究

采用缺氧－好氧工艺，在缺氧池中投加脱色菌，在好氧池中分别投加降解工程菌、 降解高效菌和活性污泥，试验比较了这三种组合工艺对染色废水的处理效果。结果表明：脱 色菌－降解工程菌工艺的效果最好，在高浓度下活性高、降解速率快、处理效果好。     

人参β-AS基因RNAi表达载体工程菌的构建

利用重组PCR和酶切连接技术构建了人参β-香树素合成酶(β-AS)基因RNAi(RNAinterference,RNAi)植物表达载体,再经热转化法转化到发根农杆菌A4菌株中,得到含有人参β-AS基因RNAi植物表达载体的工程菌,为诱导转化人参外植体奠定了基础。     

高产琥珀酸重组大肠杆菌的构建及厌氧发酵

以野生型大肠杆菌Escherichia coli W为出发菌株,利用Red同源重组系统分别敲除了乳酸脱氢酶基因(ldhA)、乙醇脱氢酶基因(adhE)、丙酮酸甲酸裂解酶基因(pflB)、丙酮酸氧化酶基因(poxB)和乙酸激酶基因(ackA),再通过无氧生长进化筛选过程,构建得到在厌氧条件下能有效生长,并以琥珀酸为主要发酵产物的重组大肠杆菌WS100(△ldhA,△adhE,△pflB,△poxB,△ackA)。利用15 L发酵罐进行厌氧发酵测定显示,经72 h发酵,菌体密度OD600最大值可提高至6.48,琥珀酸产量达到70.13 g/L,琥珀酸的生产强度为0.98 g/(L.h),葡萄糖-琥珀酸转化率为76%。发酵液中副产物含量低,乙酸含量为5.34 g/L,乳酸产量仅为0.15 g/L,未检测到甲酸和乙醇生成。结果表明,厌氧条件下,该工程菌可有效利用低营养成分的无机盐培养基,在不表达任何外源基因的条件下可稳定高产琥珀酸,具有极大的工业化开发前景。