复合工程菌B350处理采油废水的反应动力学特征

在对某油田采油废水水质进行监测的基础上，开展了利用复合工程菌B350降解采油废水中有机物的试验研究，并与活性污泥的降解结果进行了对比。经12h的降解，B350对TOC的去除率为75.3％，而对比的活性污泥仅为55．5％；4h为必要的反应时间。用Monod反应动力学方程进行拟合计算，B350和活性污泥的降解平衡常数Ks、最大基质比去除速度vmax、难降解TOC含量、反应级数b、反应系数a分别为：5．22mg／L与3．53mg/L，14．83h^-1与7．71h^-1，8．43mg/L与16．15mg／L．0．48与0．48，4．59与3．98。B350处理采油废水的反应程度和速度均优于活性污泥；活性污泥与B350的反应级数相同，说明在低有机物浓度范围内反应速度受浓度的影响较小。     

能产生植物抗性诱导蛋白harpin的自生固氮工程菌的构建

通过三亲交配的方法 ,把带有梨火疫欧文氏杆菌hrp基因簇的重组粘粒pCPP4 30接合转移进入固氮菌催娩克氏菌X2R中。经质粒提取检测、PCR专一扩增、Southernblotting分析和生物测定结果表明 ,工程菌X2R( pCPP4 30 )构建成功。该菌诱发过敏反应的能力是大肠杆菌DH5( pCPP4 30 )的 10倍以上。在温室小区用X2R(pCPP4 30 )菌液处理番茄 ,番茄早疫病的感染指数比出发菌降低 13.0 9% ,果实数量和单果重分别比对照增加 2 2 .31%和 2 0 .0 8% ,本工作表明 :hrp基因簇在自身固氮菌中可以表达和分泌harpin。     

能产生植物抗诱导蛋白harpin的自生固氮工程菌的构建

通过三亲交配的方法,把带有梨火疫欧文氏杆菌ｈｒｐ基因族的重组粘粒ｐＣＰＰ４３０接合转移进入固氮菌催娩克氏菌Ｘ２Ｒ中。经质粒提取检测、ＰＣＲ专一扩增、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析和生物测定结果表明,工程菌Ｘ２Ｒ构建成功。该菌诱发过敏反应的能力是大肠杆菌ＤＨ５的１０倍以上,在温室小区用Ｘ２Ｒ（ｐＣＰＰ４３０）菌液处理番茄番茄早疫病的感染指数比出发菌降低１３．０９％,果实数量和单果重分别比对照     

工程菌在聚酯废水生物处理中的试验研究

为提升好氧生化系统的处理能力,将HSB菌群投入MBR处理系用中进行中试,中试结果表明,HSB菌可提升COD处理能力10%左右。使用HSB菌启动生化系统约需6 d,启动时间比使用传统活性污泥接种启动时间缩短20 d左右。HSB菌可用于聚酯废水的处理,并可以取得较好的处理效果。     

以基因重组技术开发木聚糖类半纤维素资源

木聚糖类半纤维素是一类取之不尽而又亟待开发利用的碳水化合物，经生物降解后所产生的木糖和少量其它单糖，可以用作基本碳源生产各种发酵产品，包括有机酸、氨基酸、单细胞蛋白、糖醇、工业酶类、溶剂或燃料醇。有关半纤维素酶及其基因的研究已经积累了很多资料，其中包括木聚糖酶、木糖苷酶、阿拉伯糖苷酶、葡萄糖醛酸酶、木聚糖乙酰酯酶以及它们的基因。通过基因重组技术可以使发酵工程菌获得降解半纤维素的能力，或者把能有效降解半纤维素的微生物构建成发酵工程菌，从而把半纤维素转化为所需求的生物工程产品。     

合成生物学构建微生物工程菌研究进展

合成生物学作为21世纪多领域交叉的新兴学科,在探索生命活动基本规律和生物技术的创新突破上大有助益。合成生物技术是构建工程菌的新型手段,这种技术被广泛用于生产多种目标产物,如氨基酸、有机酸、芳香族化合物、糖类等。利用先进的模块和系统设计以及新的基因组编辑方法,对模式工程菌中复杂的代谢途径进行工程化改造,可高效提升重组工程菌中目的产物的产量,促进社会生产力高速发展。本文综述了利用合成生物学构建微生物工程菌的最新进展,阐述了合成生物技术的发展历程,提供了微生物工程菌构建的主要应用实例。随着对工程菌研究的深入,合成生物学技术将为发酵产业带来全新的突破与机遇。     

生物工程菌Bacta-Pur(R)处理城市污水的效果研究

利用SBR反应器,探讨了XLG型生物工程菌Baeta-Pur(R)对城市污水的处理效果.试验结果表明:投加工程菌后,其对COD和TP的最高去除率可分别达到94.51%和79.43%,但对NH3-N的去除率较低.处理后出水的COD和TP均可满足《城镇污水处理厂污染物排放标准》(GB 18918-2002)的一级B标准.     

响应面法优化产低温脂肪酶工程菌Cl02的发酵条件

目的采用响应面法优化产低温脂肪酶工程菌Cl02的发酵条件。方法通过单因素试验考察培养基中酵母氮源含量、pH值、甘油含量和甲醇含量对酶活的影响,确定产酶的主要影响条件,在此基础上,根据Box-Benheken中心组合试验设计原理,采用三因素三水平的响应面分析法,综合考察各因子对低温脂肪酶酶活的影响,建立低温脂肪酶酶活的二次回归模型。结果培养基中酵母氮源含量、pH值和甲醇含量对酶活的影响显著。最适产低温脂肪酶条件为:酵母氮源含量7.3 g/L、pH 6.0、甲醇含量9.1 g/L,在此条件下,低温脂肪酶酶活可达42.25 IU/ml,比优化前(28.0 IU/ml)提高了50.9%。结论利用响应面法优化的发酵条件可显著提高工程菌的产酶能力,为规模化生产低温脂肪酶奠定了基础。     

工程菌发酵产酶及其在1,3-丙二醇耦合酶催化制备中的应用

培养定向进化后的质粒保藏菌E.coli BL21(DE3)pLysS/PET-15b-dhaT’-24并进行质粒抽提,将抽提的质粒转化入感受态宿主细胞E.coli BL21(DE3)pLysS中得产1,3-丙二醇氧化还原酶的工程菌。工程菌经乳糖诱导后进行发酵培养获得酶活为182 U/mL的1,3-丙二醇氧化还原酶,最适反应pH值为10,pH值稳定范围为7.0～9.0,最适反应温度为55℃,温度稳定范围为30～45℃。利用工程菌产的1,3-丙二醇氧化还原酶进行转化3-羟基丙醛为1,3-丙二醇的反应,同时偶联甘油脱氢酶(由另一工程菌制备)转化甘油的反应进行辅酶NADH的再生,实现了1,3-丙二醇的双酶耦合的连续反应。由于来源于工程菌的双酶酶学性质相适应,反应连续进行34 h后,底物3-羟基丙醛的转化率达63.4%,产物1,3-丙二醇的产率达64.6%。     

高产靛蓝色素大肠杆菌基因工程菌的构建及其发酵条件优化

通过基因重组技术构建重组苯乙烯单加氧酶基因的高产靛蓝色素大肠杆菌基因工程菌Escherichia coli AB,研究优化工程菌E. coli AB生物合成靛蓝色素的发酵条件。单因素试验分别考察不同发酵温度、底物质量浓度、起始pH值和接种量4 个因素对于靛蓝色素合成的影响,选取发酵温度、底物浓度和起始pH值3 个对靛蓝色素产量影响显著的因素进行响应面设计试验优化。经模型分析获得优化发酵条件为：底物质量浓度0.95 mg/mL,发酵温度29 ℃,起始pH 6.9。在该条件下,工程菌E. coli AB催化合成靛蓝色素产量为67.65 mg/mL。优化发酵条件的实验结果与预测值相符,说明回归模型切实可行。