萌动期破壁灵芝孢子对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

目的 :观察萌动期灵芝孢子对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。方法 :体内、外试验及碳廓清试验观察小鼠巨噬细胞的吞噬作用。结果 :0 .1 2～ 1 .2 0 mg/ml的灵芝孢子明显促进了巨嗜细胞的体外吞噬作用 ;0 .1 2～ 1 .80 g/kg剂量范围内 ,灵芝孢子对受试小鼠巨嗜细胞的体内吞噬功能有明显促进作用 ;每日口服 0 .2 4～ 1 .80 g/kg的灵芝孢子可使受试小鼠的碳廓清指数明显增加 ,并存在量效依赖关系。结论 :萌动期破壁灵芝孢子对小鼠巨噬细胞吞噬功能具显著促进作用。     

灵芝多糖肽对小鼠巨噬细胞自由基的清除作用

目的: 研究灵芝多糖肽对小鼠腹腔巨噬细胞自由基的清除作用。方法: 用四氧嘧啶、叔丁基氢过氧化物(tBOOH) 为氧化剂, 分别在小鼠体内、体外损伤小鼠腹腔巨噬细胞, 以DCHF-DA 为荧光指示剂,用共聚焦显微镜观察巨噬细胞的荧光变化, 并用共聚焦显微镜作时间系列扫描, 观察巨噬细胞荧光的动态变化。结果: 四氧嘧啶(75 mg·kg^-1, iv) 、叔丁基氢过氧化物(7.76 ×10^-5 mol·L^-1) 可造成巨噬细胞的氧化损伤, 使荧光密度增加, 灵芝多糖肽可减轻其损伤, 使荧光密度减少。时间系列扫描显示:随时间改变, 灵芝多糖肽可减少静息状态下小鼠腹腔巨噬细胞荧光密度, 也可减少由PMA(50 nmol·L^-1) 诱导的呼吸爆发状态下小鼠腹腔巨噬细胞荧光密度。结论: 灵芝多糖肽具有抗氧化作用, 对小鼠腹腔巨噬细胞自由基有清除作用。     

巴西蘑菇多糖对小鼠脑组织表达粒-巨噬细胞集落刺激因子的影响

目的: 研究巴西蘑菇多糖(ABPS)对小鼠脑组织表达粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的影响。方法: 应用组织培养技术、克隆形成法、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法检测小鼠脑组织在ABPS 作用下表达GM-CSF 的变化。结果: 不同浓度的ABPS 对小鼠脑组织表达GM-CSF 有明显的促进作用,浓度范围为2 ~ 6mg·ml^-1之间,最佳浓度为4mg·ml^-1。经Light Frame software 分析,小鼠GMCSF在960 bP处出现一高峰。结论: ABPS 有促进小鼠脑组织表达GM-CSF 的作用,证实了ABPS 促进粒单祖细胞生成的机理。     

人M—CSF与SCF融合蛋白的构建及其在昆虫细胞中的表达

应用重组DNA技术构建M－CSF与SCF的融合基因并将其克隆于昆虫杆状病毒转移载体pVL1392中,通过与野生型芷蓿夜蛾核型多角体病毒（ANPV)DNA共转染草地液蛾细胞Sf9,融合基因插入AcNPV基因组。重组病毒感染单层Sf9细胞后,表达产物分泌到胸外培养液中,用MTT比色法和TF－1细胞株可检测到表达产物与IL－3的协同效应。上述研究为开发具有应用价值的新型细胞融合因子奠定了基础。     

莲藕渣多糖通过MAPK/NF-κB途径调节小鼠腹腔巨噬细胞的免疫应答

揭示莲藕渣多糖（Lotus Root Residue Polysaccharide,LRP）对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞的体外免疫调节作用,探讨LRP刺激腹腔巨噬细胞产生免疫应答的信号通路。利用MTT法测定不同浓度LRP对细胞活力影响;选用不同浓度梯度及同一浓度不同时间点的LRP刺激细胞,Griess法检测细胞NO释放量;半定量PCR检测细胞TLR4、TLR2受体及免疫关联因子（TNF-α、IL-6、iNOS、1L-1β、COX-2、Nfkbia）mRNA的表达,蛋白印迹法检测其MAPK通路（ERK1/2、JNK、p38）及Akt的磷酸化,同时研究了LRP对和蛋白AP-1及NF-κB的影响,对LRP对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节活性及其信号机制进行评估。研究表明,LRP对小鼠腹腔巨噬细胞无毒作用,25~50 μg/mL LRP促进细胞生长,细胞存活率为104.82%和102.53%（p<0.05）;NO浓度随LRP浓度提高而显著提高（p<0.05）,200 μg/mL LRP刺激细胞产生一氧化氮（NO）为36.47 μmol/L,200 μg/mL的LRP处理细胞,NO产量随培养时间延长而增多（p<0.05）,24 h时NO浓度为44.18 μmol/L;mRNA基因表达研究显示,LRP调控TLR4、TLR2受体,并调节免疫基因的表达;此外,LRP促进核蛋白c-Jun、p65由核外转向核内,增强ERK1/2、JNK、p38蛋白的磷酸化水平,但对于Akt的磷酸化没有显著影响。因此,莲藕渣多糖（LRP）可通过MAPK/NF-κB途径增强BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞免疫应答。     

兜唇石斛发酵多肽Asp-Asp-Asp-Tyr和Asp-Tyr- Asp-Asp对LPS诱导RAW264.7细胞的抗炎作用

为了研究兜唇石斛发酵多肽Asp-Asp-Asp-Tyr（DDDY）、Asp-Tyr-Asp-Asp（DYDD）对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞抗炎活性。以合成的兜唇石斛发酵多肽为研究对象,采用噻唑蓝法筛选增殖活性最高的发酵多肽浓度,通过中性红吞噬实验和倒置显微镜观察发酵多肽对细胞的吞噬作用和分化形态变化,使用ELISA试剂盒测定细胞中NO及细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10和肿瘤坏死因子TNF-α的分泌量。结果表明：12.5、25、50和100 μg/mL四组质量浓度的发酵多肽对细胞无毒性并有增殖作用;100 μg/mL的DDDY和DYDD和1 μg/mL的LPS处理可以激活细胞,增强细胞吞噬能力,相对吞噬率为2.05%、1.97%和2.19%;构建LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型,发现两种发酵多肽处理有效抑制细胞分化,使细胞恢复正常形态;抑制细胞NO分泌能力,100 μg/mL DDDY和DYDD处理组的NO分泌能力降低到LPS组的0.41倍和0.49倍;并且对抑炎细胞因子分泌能力的提高和促炎细胞因子的降低有显著效果,均表现出剂量反应关系。由此可知,DDDY和DYDD对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应具有抗炎作用,为后面探究发酵多肽的炎症机制提供理论支持。     

滑子菇多糖的免疫活性及抗肿瘤作用

本文选用豚鼠血清为补体的模型进行体外抗补体实验的检测、采用体外对小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7的毒性试验、腹腔巨噬细胞吞噬中性红活性能以及刺激巨噬细胞产生NO和H2O2的能力来研究滑子菇多糖的免疫活性;通过对人体前列腺癌22Rv.1细胞和人体肝癌Hep 2B细胞增殖的抑制作用试验对滑子菇多糖的抗肿瘤活性进行研究。实验显示,滑子菇多糖具有较好的抗补体活性,并且活性随多糖浓度增大而增强,多糖浓度达到12.5 mg/mL活性变化不大,多糖浓度在0.005-0.5 mg/mL范围在一定程度上能够促进巨噬细胞的增殖,能增强腹腔巨噬细胞吞噬中性红活性能,并且促进巨噬细胞分泌NO和H2O2能力,表明滑子菇多糖具有较好的免疫活性;对人体前列腺癌细胞和人体肝癌细胞这两种癌细胞具有较强的抑制作用,并且活性与浓度呈现量效关系。     

~(60)Co γ射线对小鼠巨噬细胞和淋巴细胞浆微管的影响

本实验采用间接免疫荧光技术,观察了小鼠腹腔巨噬细胞和肠系膜淋巴结细胞胞浆微管经(60)Coγ射线照射后的变化及分布特点;同时还对此变化进行了动态观察、研究;并在透射及扫描电镜下观察了(60)Coγ射线对胞浆内微管、中心粒和表面微绒毛的影响。实验结果表明:(1)辐照对巨噬、淋巴细胞内胞浆微管的分布及荧光染色模式有明显影响,并且与辐照剂量有关;(2)经一定时间后,由辐照所致的胞浆微管变化可以完全恢复;(3)透射电镜下可见辐照后胞浆微管、中心粒基本消逝,扫描电镜下可见经辐照后细胞表面突起或微绒毛发生明显变化。     

^238Puα粒子照射对类巨噬细胞（P388D1）免疫功能的影响

吸入有害因子，特别是难溶性粒子后，肺巨噬细胞是最先受到损害的一类免疫活性细胞。研究α粒子对巨噬细胞免疫功能的效应，在阐明吸入难溶性α粒子对机体免疫功能损伤中具有重要的意义。本文以类巨噬细胞（Ｐ３８８８Ｄ１）作为巨噬细胞的模拟细胞，用＾２３８Ｐｕ电镀源作为α辐射源，观察了α辐射对巨噬细胞免疫吞噬功能和Ｆｃ受体表达功能的影响，及这两项免疫指标对α辐照敏感性的差异。接受较大剂量或照射后较长时间，细胞吞噬     

鳖甲粗多糖预防辐射损伤效应的初步研究

研究了口服鳖甲粗多糖对受照射小鼠外周血白细胞数，巨噬细胞吞噬细功能以及外周血淋巴细胞微核的影响，结果表明，预防口服３ｄ鳖甲粗多糖，可明显升高受６ＧｙＸ照射小鼠的外周血白细胞总数，显著提高吞噬百分率，消化百分率及吞噬指数，并能降低外周血淋巴细胞微核率，提示：鳖甲粗多糖具有良好的减轻放射损伤作用，临床应用前景广阔。