滇龙胆提取物对脂多糖诱导的THP-1巨噬细胞的抗炎作用

研究了滇龙胆提取物及龙胆苦苷单体对脂多糖(LPS)诱导的THP-1巨噬细胞的抗炎作用,为其药理价值的开发提供理论基础.采用体外THP-1细胞诱导的M1型巨噬细胞模型,分别加入滇龙胆粗提物和龙胆苦苷单体处理后,检测巨噬细胞中细胞因子的mRNA水平和炎症信号通路蛋白表达.研究发现,与单独LPS刺激组相比,滇龙胆粗提物和龙胆苦苷单体均可以抑制巨噬细胞部分促炎因子mRNA表达;龙胆苦苷可以抑制IκBα蛋白降解和NF-κB p65、TBK1蛋白磷酸化.滇龙胆、龙胆苦苷具有较好的抗炎活性,其可通过抑制NF-κB信号通路发挥作用.     

大鼠第三脑室室管膜上巨噬细胞迁移过程的电镜观察

对第三脑室室管膜上巨噬细胞迁移过程进行不同时相的扫描电镜观察,结合透射电镜分析其细胞类型及相应功能。结果示第三脑室内存在室管膜上巨噬细胞,此类细胞胞体呈卵圆形或椭圆形,伸出多个舌状和指状伪足,其迁移的全过程是首先在室管膜表面形成穹窿样隆起,继而推开室管膜上皮细胞间隙,露出胞体,继续向外游走,最后完全游离在脑室腔内。透射电镜下该细胞呈长卵圆形,核大,异染色质多,细胞器较少,具有单核吞噬细胞的形态特征。本文在超微结构水平清晰地观察到第三脑室室管膜上巨噬细胞迁移过程的不同时相,并为进一步探讨其功能提供了超微形态学基础。     

4-羟基苯乙酸对M1型巨噬细胞极化及巨噬细胞泡沫化的影响

以多酚肠道菌群代谢物4-羟基苯乙酸(4-hydroxyphenylacetic acid,4-HPAA)为试验对象,研究其对M1型巨噬细胞极化及巨噬—泡沫细胞形成的影响。结果表明,4-HPAA能降低巨噬细胞M1极化标志基因TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA表达及分泌水平,抑制RAW264.7巨噬细胞向促炎的M1型巨噬细胞极化;油红O染色结果显示4-HPAA可显著降低ox-LDL诱导的巨噬细胞中脂滴蓄积,并显著降低胆固醇酯的含量(P＜0.05)。RT-PCR结果显示4-HPAA可显著上调ox-LDL诱导的泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G1(ABCG1),下调白细胞分化抗原36(CD36)基因的表达水平(P＜0.05)。说明4-HPAA能抑制巨噬细胞 M1型极化,同时能抑制巨噬细胞泡沫化,表明多酚肠道菌群代谢物4-HPAA可能在其改善动脉粥样硬化的过程中发挥重要作用。     

核酸在营养免疫中的功能

当营养不良伴随感染时则危及免疫系统,使免疫功能低下。因为蛋白质是机体免疫系统组成的基础物质,脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质也是必需物质,但有人认为机体自身生”成的内源性核酸,已足够需要,一般都不把外源性核酸的补给当做问题。相反对核酸在机体中的代谢物──“嘌呤硷”生成的尿酸,及形成的“尿结石”或“痛风症”却相当重视。据报导：美国人弗兰克［1］经20多年的研究证明：人体自身合成的核酸并不多,不能满足机体细胞新陈代谢的需要,常影响免疫系统的功能。他发现：20岁以后的成年人,合成核酸的能力日益衰退,所以需要从食物中提供。弗兰克还在临床上发现［2］：中、青年人虽然在膳食中使蛋白质、脂肪、糖类、维生素、     

普洱茶水提物对巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α的影响

目的探讨普洱茶水提物对巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。方法以佛波酯处理THP-1细胞48 h,分化得到巨噬细胞,以其为炎症细胞模型,用不同浓度的普洱茶水提物(125、250μg/ml)与终浓度为100 EU/ml的脂多糖的混合物作用于巨噬细胞,ELISA法检测细胞培养液中TNF-α的含量。结果普洱茶水提物能有效抑制巨噬细胞炎症因子TNF-α的分泌,且浓度为250μg/ml的普洱茶水提物对TNF-α分泌的抑制作用强于浓度为125μg/ml的普洱茶水提物,呈剂量依赖性。结论普洱茶水提物对巨噬细胞炎症因子TNF-α的分泌具有抑制作用。这种效果与已知的绿茶抗炎的主要成分EGCG无关。     

重组IL-17A耻垢分枝杆菌的构建及其对巨噬细胞表达炎症因子的影响

目的构建携带小鼠IL-17a编码基因的重组耻垢分枝杆菌(Recombinant Mycobacterium smegmatis,rMs),并研究其对巨噬细胞表达炎症因子的影响。方法双酶切质粒pET28a/mIL-17a和pMFA41,转化感受态E.coli TOP10,构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMFA41/mIL-17a,电转化耻垢分枝杆菌mc2155,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。分别以MOI为10∶1加入rMs、rMs+anti-IL-17A、Ms感染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,并设PBS对照组。荧光定量PCR法检测转染细胞中β防御素-2(Defensinβ2,Defb-2)、巨噬细胞炎症蛋白(Macrophage inflammatory protein,MIP)-1α和MIP-2β基因mRNA水平;ELISA法检测细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4及IFNγ蛋白的表达水平。结果重组表达质粒pMFA41/mIL-17a经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白mIL-17A可与大鼠抗小鼠IL-17A单克隆抗体特异性结合,在相对分子质量约20 000处可见特异性反应条带;rMs组RAW264.7细胞中Defb-2、MIP-1α、MIP-2β基因mRNA水平较Ms组及PBS组明显升高(P<0.01);rMs组细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4和IFNγ的蛋白浓度较Ms组及PBS组明显升高(P<0.01)。结论成功构建了表达具有生物学活性mIL-17A的重组耻垢分枝杆菌疫苗,该疫苗可有效促进体外培养的巨噬细胞表达MIP、Defb2、IFN-γ及IL-4,为新型疫苗的研发奠定基础。     

芝麻酚调控巨噬细胞极化改善肥胖小鼠脂肪组织炎症及胰岛素抵抗

目的：探讨芝麻酚能否通过调控巨噬细胞极化改善肥胖小鼠脂肪组织炎症及胰岛素抵抗。方法：建立高脂饲料喂饲的肥胖小鼠模型,灌服芝麻酚（100 mg/kg）8周,行腹腔糖耐量及胰岛素耐量试验后处死小鼠,测血脂和胰岛素水平。免疫印迹检测附睾脂肪组织P-AKT和P-JNK蛋白表达。脂肪组织切片行F4/80及Cd11c免疫组化及免疫荧光染色。实时荧光定量PCR测脂肪组织细胞因子及趋化因子mRNA表达。结果： 芝麻酚治疗后降低肥胖小鼠体质量及血脂水平,改善糖耐量损伤及胰岛素抵抗。芝麻酚治疗组小鼠脂肪组织巨噬细胞浸润减少,P-AKT表达恢复,P-JNK表达降低,M1型巨噬细胞标志物（Cd11c、iNOS、TNF-α和IL-6）mRNA表达减少,M2型标志物（Chi3l3、Arg1和Mgl1）mRNA表达增加。结论：芝麻酚减轻肥胖小鼠脂肪组织炎症和胰岛素抵抗,其作用与芝麻酚抑制脂肪组织JNK信号通路,改善巨噬细胞极化失衡状态有关。     

复方益生菌粉提高小鼠免疫力的实验研究

目的 探究鼠李糖乳杆菌R9639、干酪乳杆菌Zhang和植物乳杆菌P9三株益生菌组成的复方益生菌粉对小鼠免疫力的影响。方法 将小鼠分为阴性对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组各10只,并分别灌胃给予同等纯净水,0.21,0.42,1.25 mg/(kg·d)复方益生菌,观察复方益生菌对小鼠体重、脏器/体重比、溶血素半数溶血值、抗体生成细胞数量、迟发型变态反应、淋巴细胞转化、碳廓清功能、腹腔巨噬细胞吞噬功能及NK细胞活性的影响。结果 与阴性对照组比较,低、中、高剂量组小鼠体重、胸腺/体重比值和脾脏/体重比值差异均无统计学意义（P>0.05）;高剂量组小鼠的迟发型变态反应程度显著增加（P<0.01）;低、中、高剂量组小鼠的抗体生产细胞数量、溶血素半数溶血值、淋巴细胞增殖能力、NK细胞活性、碳廓清功能和腹腔巨噬细胞吞噬能力均显著增加（P<0.01）。结论 复方益生菌粉能提高小鼠免疫力,结果符合《保健食品检验与评价技术规范》中“具有增强免疫力功能”的评价标准。     

基于斑马鱼模型的藿香紫苏饮免疫调节功能研究

研究藿香紫苏饮对由酒石酸长春瑞滨所诱导的免疫力低下斑马鱼的免疫功能的调节作用。通过给斑马鱼静脉注射0.2 mg/mL酒石酸长春瑞滨诱导建立免疫力低下模型,将斑马鱼随机分为正常对照组、模型对照组、藿香紫苏饮低剂量组（500μg/mL）、藿香紫苏饮中剂量组（1 000μg/mL）、藿香紫苏饮高剂量组（2 000μg/mL）,每组30尾。使用荧光显微镜观察并分析各组斑马鱼巨噬细胞吞噬功能及T细胞减少的改善效果。结果表明,藿香紫苏饮高剂量组（2 000μg/mL）斑马鱼体内剩余荧光微球数量显著低于模型对照组（P<0.05）;藿香紫苏饮低、中、高剂量组斑马鱼T细胞荧光强度显著高于模型对照组（P<0.01）。藿香紫苏饮具有促进斑马鱼巨噬细胞吞噬、改善T细胞减少的功效。     

125I标价重组MIF在炎症模型小鼠体内的生物分布

摘要：目的:初步评价125I标记巨噬细胞移动抑制因子（MIF）在炎症显像中的应用价值。方法：Iodogen法制备125I-MIF,研究其稳定性、特异性及在炎症模型小鼠体内的生物学分布规律。结果：125I-MIF的标记率为96.5%,室温下48小时内标记化合物的生物学性质稳定。体内分布表明125I-MIF主要由肝脏代谢,经肾脏排泄,血液清除较快。尾静脉注射125I-MIF 0.5、1、6、24小时后,炎症肢体（靶）与对侧健肢（非靶）的%ID比值（T/NT）值分别为1.42、1.35、2.18和2.05。结论：125I-MIF具有在活体内炎症定位导向能力,但在早期优越性不明显,6小时后效果较佳,对隐匿性或亚急性炎症病灶的诊断有潜在的临床价值。