蚕丝蛋白中氨基酸的色谱分析检测方法研究

氨基酸是构成蚕丝蛋白的基础物质,氨基酸检测也是衡量蚕丝被是否增重的重要指标之一.色谱法因分析速度快、检测灵敏度高、适用范围广等特点而广泛应用于各领域.本文扼要概述了色谱法分析氨基酸的方法,包括氨基酸分析仪法、高效液相色谱(HPLC)法等,为今后的蚕丝氨基酸分析检测提供了参考.     

基于关联规则与遗传算法的蛋白质二级结构预测

文章通过建立蛋白质二级结构预测的数学模型,运用挖掘与遗传算法相结合的关联规则技术对蛋白质二级结构进行预测,设计并实现了该原型系统。实验表明,该文所采用的基于蛋白质氨基酸疏水性周期规律的预测模型方法较其它相关的二级结构预测方法有较好的准确性、有效性与可行性。     

重组大肠杆菌共表达D-海因酶和N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶

通过PCR分别扩增得到N-carbamoylase基因和上游带有RBS区的D-hydantoinase基因,并将其依次克隆入pBAD/His A质粒中,得到呈多顺反子结构的双酶表达质粒pBAD-CRH,转化E. coli Top10F￠得到重组菌TaraCRH. 实验证明,E. coli TaraCRH对外源蛋白的表达控制严紧,而加入阿拉伯糖诱导后可以成功表达两酶基因. 诱导条件优化结果表明,诱导温度采用29℃,培养基中阿拉伯糖浓度0.05 g/L可达到最高酶活. 进一步尝试采用玉米浆培养基代替LB培养基,在经过优化的玉米浆培养基中培养TaraCRH菌株,经阿拉伯糖诱导,海因酶和水解酶酶活分别达到3.52和4.21 U/mL.     

不同水解方法对植物叶片结合氨基酸测定影响分析

为建立植物叶片结合氨基酸（bound amino acid, BAA）适宜检测方法,试验采用全自动氨基酸分析仪对4种植物叶片BAA进行测定：zuixinZG二极管,钠体系色谱柱（125 mmHR）,柱后衍生光度法,570 mm/440 nm,单点校正。研究常规盐酸水解法、苯酚+盐酸水解法、β-巯基乙醇（β-mercaptoethanol, BME）+盐酸水解法、过甲酸氧化法对植物叶片17种BAA及其总量的影响。结果表明：过甲酸氧化法适合用于水稻和小麦叶片含硫氨基酸测定;BME+盐酸水解法适合用于4种植物叶片BAA测定。采用BME+盐酸水解26 h,植物叶片中多数极性正电和非极性氨基酸含量达到最大值;添加0.80%BME,植物叶片中极性正电氨基酸、负电氨基酸、中性氨基酸中的酪氨酸、胱氨酸及大部分非极性氨基酸含量达到最大值。该方法操作简单、重复性强、稳定性高,适合用于植物叶片BAA的检测。     

不同菌材栽培糙皮侧耳营养品质综合评价

摘 要：目的 分析不同菌材栽培糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)生长及营养品质差异,并对其营养品质进行综合评价。方法 以贵州5种常见菌材锥栗(Castanea henryi)、构树(Broussonetia papyrifera)、刺槐(Robinia pseudoacacia)、光皮桦(Betula luminifera)、青冈(Quercus glauca)为主要培养料栽培糙皮侧耳,对糙皮侧耳菌丝生长、子实体主要农艺性状及营养品质进行分析。结果 糙皮侧耳在光皮桦培养基上菌丝生长速率更快,在锥栗和刺槐栽培基质中子实体主要农艺性状更好。刺槐栽培基质中糙皮侧耳子实体粗蛋白、Cu、Zn、K元素含量最高,锥栗栽培基质中糙皮侧耳子实体多糖、Na、Mg、Fe、Ca元素含量最高。以5种菌材栽培的糙皮侧耳子实体总氨基酸、必需氨基酸及总药用氨基酸均为刺槐>青冈>光皮桦>构树>锥栗。5种菌材栽培的糙皮侧耳子实体呈味氨基酸主要为甜味和苦味氨基酸,其中以光皮桦栽培的糙皮侧耳子实体鲜味和甜味氨基酸含量最高。必需氨基酸营养品质评价及营养品质综合评价结果表明刺槐栽培糙皮侧耳子实体综合营养品质更好。Fe、苏氨酸、丙氨酸、谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸、组氨酸、Zn和多糖是5种菌材栽培的糙皮侧耳子实体主要差异营养成分。相关性分析结果显示菌材营养成分主要与糙皮侧耳菌丝生长、子实体主要农艺性状和矿物质元素含量显著相关。结论 不同营养成分的菌材对糙皮侧耳子实体生长和营养品质的影响不同,刺槐更适合作为生产糙皮侧耳主栽菌材。     

避雨栽培对酿酒葡萄果实氨基酸含量的影响

本研究利用高效液相色谱技术,分析避雨栽培和露地栽培条件下赤霞珠和霞多丽果实发育过程中21种氨基酸含量的变化.结果表明:避雨栽培除了显著降低这两个品种的果实中赖氨酸和脯氨酸含量外,对其它氨基酸含量的影响不尽相同.在霞多丽果实中,避雨栽培促进了大多数氨基酸含量的增加,而在赤霞珠果实中这些氨基酸的积累受到抑制.该研究对避雨栽培技术在酿酒葡萄生产中的应用具有重要的参考价值.     

胰蛋白酶水解黄粉虫蛋白工艺条件的优化

黄粉虫是一种蛋白质含量丰富的优质昆虫蛋白资源,黄粉虫蛋白水解物不仅氨基酸种类齐全而且具有独特的香味和鲜味,将其制成营养丰富、且有保健功能的复合氨基酸口服液,前景非常广阔。本文对胰蛋白酶水解黄粉虫蛋白的最佳条件进行了研究,结果为酶用量0.5%、固液比1∶3、水解温度55℃、水解最佳pH值7.5、水解时间7h;并针对胰蛋白酶水解率低的问题进行了提高水解能力的探讨。     

全自动氨基酸分析仪法测定4种贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸含量

建立一种测定贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸的全自动氨基酸分析仪法,以4种常见贝类为研究对象,采用0.02 mol/L盐酸溶液作为提取剂,体积分数5%磺基水杨酸溶液为蛋白沉淀剂,同时优化了缓冲溶液的组成及洗脱程序,并对该方法的线性范围、检出限、精密度以及回收率进行测定。结果表明:贝类肌肉中的谷胱甘肽和游离氨基酸有着较好的分离效果,线性关系良好,相关系数为0.999 1~0.999 9,检出限(RSN=3)为0.07~0.27μmol/L,加标平均回收率为86.40%~102.42%,日内和日间相对标准偏差分别为0.31%~0.73%和1.14%~2.60%。4种贝类肌肉组织中的游离氨基酸含量比较丰富,总游离氨基酸含量分别为1 396.39、1 016.04、911.15、287.01 mg/100 g,文蛤青蛤缢蛏牡蛎,主要的游离氨基酸为牛磺酸(Tau)、谷氨酸(Glu)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg);谷胱甘肽含量分别为103.20、82.53、61.77、33.37 mg/100 g,青蛤文蛤缢蛏牡蛎。该方法适用于贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸含量的测定与分析。     

DPPH·分光光度法测定抗坏血酸

基于抗坏血酸对DPPH·的清除作用,建立了一种测定抗坏血酸的简便、灵敏的新方法。该法检出限为5×10(-8)／ml,标准曲线在7×10(-8)～7×10(-6)／ml范围内呈线性,相对标准偏差为3．5％（C＝3．3×10(-7)g／ml,n＝6）。本法可用于纯溶液、药片及蔬菜中抗坏血酸的测定。