无血清悬浮MDCK细胞培养流感病毒纯化工艺的初步建立

目的 建立无血清悬浮MDCK细胞培养流感病毒的下游纯化工艺.方法 采用40 L反应器,收获无血清悬浮MDCK细胞培养的流感病毒,经澄清浓缩后,添加不同终浓度(1、10、30、50 U/mL)的Benzonase(R)核酸酶,置37℃酶解不同时间(2、4、6、8h),优化核酸酶去除细胞残留DNA的条件.采用两步层析法,探...     

禽流感治疗药物流感病毒神经氨酸酶抑制剂的研究进展

1流感、禽流感及流感病毒 近年来，在全球范围由病毒引起的传染性疾病肆虐，例如：SARS、流感及禽流感等都严重威胁人类的生存安全。 病毒作为最简单的生命形态，是生命世界中迄今发现得最少，也是人类最难驾驭的一类微生物。     

关注人畜共患的流感病毒

人类流感病毒有甲、乙、丙三个型别。甲型又分为许多亚型，在人类流行的主要为甲1和甲3亚型，近几年的病例及调查发现，原来只感染禽类的甲5和甲9亚型也可以感染人类，这些不同类，不同型别病毒的交替传播，便会引起社会流感周期性的流行。     

日本公开流感病毒表面蛋白立体构造预测数据

目前，世界各地的研究人员都可以在日本理化研究所的网站上，浏览流感病毒表面蛋白神经氨酸酶1500多个种类的立体构造预测数据。     

流感疫苗株H3N2(NYMCX-223A)主要抗原基因特征与传代稳定性

目的分析2013年流感疫苗生产用甲型H3N2(NYMCX-223A)毒株主要抗原血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因特征,并检测该疫苗株主种子批、工作种子批及疫苗病毒收获液的传代稳定性。方法对制备的H3N2疫苗株的主种子批、工作种子批及疫苗病毒收获液进行全面的生物学特性检测;采用RT-PCR法从主种子批、工作种子批及疫苗病毒收获液中扩增HA及NA基因片段,并进行全基因序列测定及分析;应用MEGA 5.05软件对7株不同年份的H3N2亚型疫苗株的HA氨基酸序列进行比对,绘制基因种系发生树。结果 H3N2疫苗株的主种子批、工作种子批抗原性与2013年度WHO推荐毒株相一致,其他生物学特性均符合《中国药典》三部(2010版)标准;主要抗原HA基因序列长度为1 701 bp,编码566个氨基酸;NA基因序列长度为1 410 bp,编码469个氨基酸,各代次流感病毒HA和NA基因核苷酸和氨基酸序列均一致,与GenBank公布的序列完全一致,同源性为100%。2013年与2012年H3N2疫苗株HA氨基酸序列相比,同源性为97.5%。2013年与2012年H3N2疫苗株具有较远的进化距离,与同源性结果相对应。结论 2013年甲型H3N2(NYMCX-223A)流感疫苗株主要抗原基因传代稳定,一般生物学特性符合《中国药典》三部(2010版)要求。2013年与2012年H3N2疫苗株序列差异较大。     

基于血凝素的新型流感疫苗的研究进展

现有流感疫苗虽然能够预防季节性流感,但不能有效防控流感大流行。在本世纪初人类社会面临H5N1禽流感和H1N1猪源流感等大流行威胁的前提下,欧美各国政府和疫苗企业加速了新型流感疫苗的研发进程。血凝素是现有流感疫苗的主要有效成分,也是诱生保护性抗体的主要抗原,因此成为新型流感疫苗抗原设计的热门靶点。本文就近年来基于血凝素的新型流感疫苗的研究进展作一综述。     

浅谈高致病性禽流感的预防与控制

禽流感是由甲型流感病毒引起的一种人畜共患急性传染病。根据禽流感致病性和毒力的不同,可以将其分为高致病性禽流感、低致病性禽流感和无致病性禽流感。禽流感病毒有不同的亚型,由H5和H7亚型毒株所引起的疾病称为高致病性禽流感（HPAI）,最近国内外由H5N1亚型引起的禽流感即为高致病性禽流感,其发病率和死亡率都很高,危害极大,世界卫生组织（OIE）将高致病性禽流感列为A型传染病,我国将高致病性禽流感列为一类动物疫病。     

流感病毒裂解工艺的优化

目的探讨影响流感病毒裂解的因素,优化流感病毒裂解工艺。方法分别在不同裂解时间(Triton X-100裂解1、2、3和4 h)、不同终浓度的裂解剂(终浓度为0.5%、0.6%、0.7%和0.8%的Triton X-100)、不同总蛋白浓度(2 000、3 000和4 000μg/ml)及不同的离子强度[终浓度为0.01、0.05、0.1和0.5 mol/L的PBS(p H 7.2)]下,对流感病毒进行裂解,电镜下观察病毒裂解效果,同时采用免疫单扩散法检测血凝素含量,Lowry法检测总蛋白含量,计算蛋白含量/血凝素含量比值(裂解后病毒纯度)及血凝素回收率,确定最佳裂解工艺参数。结果当裂解前病毒纯化液蛋白含量范围为2 000~3 000μg/ml,PBS终浓度为0.1 mol/L时,利用终浓度为0.7%~0.8%的Triton X-100裂解流感病毒2 h,可获得最佳裂解效果。结论确定了流感病毒最佳裂解参数,优化了流感病毒裂解疫苗生产中的裂解工艺。     

科学家研制出万能流感疫苗 无需每年接种

科学家已经研制出了一种注射一次就可以终身抵御所有流感病毒的疫苗,从而可以免除每年冬天接种流感疫苗的麻烦。研究发现这种新型万能流感疫苗可以有效抵御许多不同类型的流感病毒,包括致命的禽流感和H1N1流感病毒。研究人员称,该疫苗只需接种一次。     

Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养

目的探索Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养条件。方法在搅拌瓶中,选择合适的微载体,在无血清条件下培养Vero细胞和流感病毒。观察Vero细胞的生长状况,并检测流感病毒的血凝滴度。结果Vero细胞在Cytodex 3上生长最好,每个微载体上接种10个细胞为最佳接种浓度,以MOI=0.005和0.010 CCID50/细胞接种H1N1流感病毒后,在72h时,培养上清病毒血凝滴度达到最高。结论无血清条件下,Vero细胞在Cytodex 3上生长良好,流感病毒能在Vero细胞上成功培养。