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自2003年SARS以来,具备广泛传染性的病毒事件屡见不鲜(如禽流感、甲型H1N1)。笔者曾经写过一篇文章,粗谈在面对类似SARS这种突发的网络安全事件中,检测、预警、应急体系的思路。时隔多年,网络安全的总体形势在发生变化,目前的主要威胁方式从入侵攻击、网络蠕虫转向主要通过网页挂马等方式传播木马,通过地下挂马产业链,窃取机密文件、隐私信息、各种账号,从而谋取暴利,并组建僵尸网络,发动群体攻击,严重威胁互联网的生存和发展。本文研究和分析了甲型N1N1这一事件对于木马检测防范的启示。 相似文献
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目的观察甲型H1N1流感患者病毒核酸阴转时限。方法选择2009年9月16~27日我院收治的甲型H1N1流感确诊病例38例,经同一名医生进行咽拭子采集,采用RT-PCR方法检测甲型通用、甲1通用、季节性流感、甲型H1N1亚型4个病毒亚型,以甲型通用、甲1通用、甲型H1N1亚型均阴转作为判定病毒核酸阴转的标准。结果 38例甲型H1N1流感患者病毒核酸阴转的时限最短1 d,最长14 d,平均4.5 d;病毒核酸阴转时间主要集中在第3、4、5天,第5天与第4天相比,甲型通用、甲1通用和甲型H1N1的阴转比例均明显增加(P<0.05);发病36 h内接受抗病毒治疗者,病毒核酸阴转平均时间为4.1 d;37~72 h接受抗病毒治疗者,病毒核酸阴转平均时间为5.2 d;有3例甲型通用、甲1通用、甲型H1N1亚型病毒核酸未同时阴转。结论甲型H1N1流感抗病毒治疗1周,大部分患者病毒核酸阴转,不具有传染性;尽早(36 h内)接受抗病毒治疗,可以缩短病毒核酸阴转时间;甲型通用、甲1通用、甲型H1N1亚型具有较好的一致性,对三者未同时阴转的情况,应注意是否同时合并其他甲型流感病毒亚型感染。 相似文献
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目的通过生物信息学分析禽流感病毒WDK/ST/27/03(H3N2)和Dk/ST/472/03(H4N6)HA、NA氨基酸序列,进一步探讨影响禽流感病毒感染血液肿瘤细胞株K-562和HL-60的机制。方法 RT-PCR扩增WDK/ST/27/03(H3N2)和Dk/ST/472/03(H4N6)HA、NA基因,经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定,对纯化的PCR产物进行测序。在GenBank中选取登录的H3N2和H4N6序列,利用在线生物信息工具ClustalW2(http://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalw2/)对这些序列和WDK/ST/27/03(H3N2)和Dk/ST/472/03(H4N6)HA、NA氨基酸序列进行比对分析。结果 RT-PCR扩增产物的大小与预期相符。生物信息学分析显示,WDK/ST/27/03(H3N2)HA的裂解位点是QNR*GLFG,Dk/ST/472/03(H4N6)HA的裂解位点是KAAR*GLFG,此位置的氨基酸无变化。HA的226位氨基酸为Gln(Q),228位氨基酸为Gly(G),具有禽流感病毒HA受体结合位点的特征,影响受体结合的位点98Y、136S、152W、183H、190E、194L、222W、225G、227S未见变异。NA活性位点及影响酶活的位点均无变异,但WDK/ST/27/03(H3N2)NA在接近N-末端的茎部6179位缺失19个氨基酸,致使NA茎部变短,且丢失2个潜在的糖基化位点。结论 WDK/ST/27/03(H3N2)的NA茎部缺失突变可能是造成其吸附、繁殖和复制能力低于Dk/ST/472/03(H4N6)的一个因素。 相似文献
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2009大流行H1N1流感病毒与经典H1N1猪流感病毒核酸扩增检测标准物质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
根据已发表的A/California/04/2009(H1N1)基因序列,通过基因合成获得该毒株的完整M、HA和NA的基因序列,并克隆于pET32a.从经典猪流感病毒A/swine/2003(H1N1)提取的RNA中扩增了完整M、HA和NA的基因序列,并克隆于pGEM-T.测序后采用体外转录方法制备6种RNA纯品.初步定量稀释后,将2个病毒的3个基因分别混合分装,采用荧光定量RT-PCR方法进行均匀性和稳定性检验,并委托外部实验室采用外标实时定量RT-PCR方法对所有RNA片段进行定值.均一性结果显示瓶间差异小于5%,稳定性实验表明室温20~25℃(相对湿度20%~50%)14天,2~8℃6个月以及-20℃保存1年的含量均无明显变化. 相似文献
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目的比较并评价3~8岁及9岁以上人群中,接种流感病毒裂解疫苗后的安全性及免疫原性。方法采用单中心无对照设计,在湖北省汉川市选择600名≥3岁受试对象,按3~8岁、≥9岁分为两组,比较两组受试者接种流感病毒裂解疫苗后的安全性及免疫原性。结果 3~8岁组H1N1、H3N2和B型流感病毒HI抗体阳转率分别为73.9%、68.1%和72.5%,≥9岁组分别为70.4%、89.2%和63.4%,3~8岁组H3N2型流感病毒抗体阳转率明显低于≥9岁组,差异有统计学意义(P <0.001),其他两型别抗体阳转率差异无统计学意义(P> 0.05);与免疫前比较,3~8岁组流感病毒HI抗体GMT增长倍数分别为11.4、9.1和14.5,≥9岁组分别为10.5、22.5和6.6,两组间差异无统计学意义(P> 0.05);3~8岁组免疫后抗体保护率分别为88.4%、100.0%和94.2%,≥9岁组分别为98.9%、100.0%和96.6%,≥9岁组H1N1型流感病毒抗体保护率明显高于3~8岁组,差异有统计学意义(P <0.001),其他两型别间差异无统计学意义(P> 0.05... 相似文献
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目的建立利用生物反应器制备Vero细胞流感H1N1全病毒灭活疫苗的新工艺。方法利用Vero细胞作为流感病毒增殖的细胞基质,分别以无血清培养液Pro VERO和含血清DMEM培养液,利用5 g/L微载体cytodex-1在3 L硅化生物反应器中进行培养,培养温度(37±0.5)℃,溶解氧(50±20)%,p H 7.2±0.2,搅拌速度(50±20)r/min,待细胞在微载体上长成单层后,以0.1 MOI接种流感病毒Vero细胞高产适应株H1N1/JD/Va,将收获的病毒液经Sepharose 4FF和Capto Q两级纯化,灭活后制备疫苗原液及成品,按照《中国药典》三部(2015版)方法对其进行检定。结果使用无血清细胞培养液培养Vero细胞24 h贴壁率约83%,含血清细胞培养液培养24 h贴壁率为112%;灌流培养方式培养至第6天时,细胞均长至单层,无血清细胞培养液最终细胞数达到(133.4±2.0)×10~4个/m L,含血清细胞培养液最终细胞数达到(353.4±5.9)×10~4个/m L。无血清病毒维持液培养,第66 h收获病毒液血凝效价为388,单位细胞产毒比例为2.9;含血清病毒维持液培养,第66 h收获病毒液血凝效价为891,单位细胞产毒比例为2.5。用含血清细胞培养液培养Vero细胞接种病毒,收获病毒液制备的疫苗原液及成品经检测,各项指标均符合《中国药典》三部(2015版)相关要求。结论建立了3 L生物反应器含血清细胞培养液培养Vero细胞和H1N1流感病毒的新工艺,为进一步放大生产规模奠定了基础。 相似文献